Reazione a catena di ibridazione RNA Fluorescenza a montaggio intero Ibridazione in situ di geni chemiosensoriali nelle appendici olfattive delle zanzare

Il nostro gruppo si interessa al sistema chemio-sensoriale delle zanzare. Speriamo che prendendo di mira il senso del gusto e dell'olfatto di una zanzara, possiamo impedirle di trovarci e pungerci. L'ibridazione fluorescente in situ con reazione a catena di ibridazione è uno sviluppo recente.

Questa tecnologia è altamente sensibile, robusta e in grado di multiplexare diversi bersagli genici in modo tale da poter visualizzare l'espressione e la localizzazione di questi geni contemporaneamente all'interno del loro ambiente nativo. La trascrittomica speciale è un metodo all'avanguardia utilizzato nel campo della biologia spaziale. Questa tecnologia è in grado di multiplexare diverse migliaia di geni ed è possibile visualizzare l'espressione di questi geni contemporaneamente.

Il nostro protocollo ci permette di visualizzare direttamente quali neuroni nell'antenna esprimono uno dei circa 50 possibili recettori ionotropici. Questo ci fornisce una tabella di marcia fondamentale per guidare la nostra comprensione di come questi recettori fattoriali classici potrebbero mediare i comportamenti. I neuroni olfattivi all'interno degli organi olfattivi di un insetto, come l'antenna, sono tipicamente sepolti all'interno di un guscio chitinoso protettivo.

Ciò rende molto difficile visualizzare l'espressione dei recettori olfattivi in quei neuroni. Il nostro protocollo utilizza una combinazione di trattamenti con chitinasi e protocolli di fluorescenza e trasparenza all'avanguardia per superare queste sfide.