Ce travail a été soutenu par le Département provincial de la science et de la technologie du Jilin (YDZJ202201ZYTS181).

La procédure animale a été approuvée par le comité d’éthique de l’Université de médecine chinoise de Changchun (numéro d’enregistrement : 2021214). Des souris C57BL/6J spécifiques exemptes d’agents pathogènes (8 à 10 semaines, poids de 18 à 22 g), mâles et femelles, ont été logées dans des cages ventilées indépendamment à 22 °C et à 65 % d’humidité relative. Les souris ont commencé l’expérience après 7 jours d’alimentation adaptative, au cours desquels elles avaient libre accès à l’eau et à la nourriture.
1. Préparation du médicament
<ol><li>Préparation du LJZD REMARQUE : Le médicament chinois utilisé a été acheté à l’hôpital affilié de l’Université de médecine chinoise de Changchun et a été identifié comme étant de la médecine chinoise authentique (voir tableau 1).<ol><li>Mettez Dangshen (12 g), Baizhu (12 g), Gancao (6 g), Chenpi (12 g), Jiangbanxia (9 g) dans un pot en céramique spécialisé (voir Tableau des matériaux). Ajouter 1000 mL d’eau distillée et laisser tremper à température ambiante pendant 1 h (voir figure 1A).</li>
		<li>Poudre 12 g Réduire en poudre fine avec un moulin et faire tremper dans 300 mL d’eau distillée dans un autre récipient pendant 1 h à température ambiante.</li>
		<li>Mélangez la médecine chinoise ci-dessus dans le pot en céramique spécialisé. Faire bouillir le mélange et maintenir à feu moyen jusqu’à ce qu’il ne reste que 300 ml de décoction. Utilisez de la gaze médicale pour filtrer et conservez le filtrat à température ambiante.</li>
		<li>Ajouter 1000 mL d’eau distillée et répéter l’opération de décoction ci-dessus une fois de plus. Filtrez à nouveau avec de la gaze médicale. Mélanger le filtrat et le faire bouillir jusqu’à ce qu’il ne reste que 150 ml.</li>
		<li>Centrifuger le liquide concentré à 10 000 x g pendant 5 min et concentrer davantage le surnageant obtenu à 30 mL à feu moyen. Transférez le concentré final dans un plat et séchez-le à l’aide d’un four de séchage électrique jusqu’à ce qu’il ne reste que le soluté sous forme de poudre.</li>
		<li>Peser le solide ci-dessus et le dissoudre dans de l’eau distillée stérile pour obtenir une solution contenant 22,85 mg de médicament par 0,2 mL (114,16 mg/mL), soit la dose quotidienne des souris.</li>
	</ol></li>
	<li>Préparation de l’acide 5-amino-salicylique REMARQUE : L’acide 5-amino-salicylique (5-ASA ; voir tableau des matériaux) a un bon effet préventif sur l’UC-CRC, et il a été utilisé comme médicament positif dans cette étude23.<ol><li>Dissoudre 64 mg de poudre de 5-ASA dans 200 mL d’eau distillée stérile pour obtenir une solution de 5-ASA à 1,82 mg/mL. La dose quotidienne pour une seule souris était de 0,2 ml.</li>
	</ol></li>
	<li>Préparation de la solution d’injection d’AOM<ol><li>Ajouter 2,5 mL d’eau distillée stérile dans de la poudre d’OMA à 25 mg (voir le tableau des matériaux) et mélanger à l’aide d’un mélangeur vortex (voir le tableau des matériaux) pour obtenir une solution mère d’OMA à 10 mg/mL, conserver à -20 °C jusqu’à utilisation.</li>
		<li>Préparer la solution injectable d’OMA en diluant la solution mère d’OMA avec de l’eau distillée stérile à 10 :1 (1 mg/mL).</li>
	</ol></li>
</ol>2. Mise en place du modèle UC-CRC
REMARQUE : L’expérience a été divisée en 4 groupes : contrôle, modèle, LJZD et groupe 5-ASA, 10 souris dans chaque groupe. À l’exception du groupe témoin, les autres groupes ont été traités avec l’AOM et le DSS.
<ol><li>Injection intrapéritonéale de solution injectable d’OMA REMARQUE : Après une alimentation adaptative pendant 7 jours, les souris ont reçu une solution injectable d’OMA (1 mg/mL) par injection intrapéritonéale (voir figure 1B).<ol><li>Tenez la souris avec le ventre vers le haut et la tête légèrement vers le bas. Saisir la peau du dos pour resserrer la peau abdominale et percer la peau à environ 1 cm à droite de l’intersection de la racine des deux cuisses sur la ligne médiane de l’abdomen avec une seringue de 1 mL (voir le tableau des matières).</li>
		<li>Poussez l’aiguille de la seringue de 1 ml à une distance de 3 à 5 mm sous la peau, en la maintenant parallèle à la ligne médiane abdominale, et insérez l’aiguille de 0,3 à 0,5 mm dans la cavité abdominale à 45°.</li>
		<li>Après que la pointe ait traversé le muscle abdominal, l’opérateur détecte une perte soudaine de résistance. Ensuite, tirez la seringue vers l’extérieur et vers l’arrière pour observer si des infiltrations de liquide se produisent. Sinon, pousser lentement la solution injectable d’AOM dans les souris à 0,1 mL/10 g.</li>
	</ol></li>
	<li>Stimulation cyclique d’une solution de SSD à 2 % REMARQUE : Chaque souris induite par l’OMA a reçu 500 ml de solution de DSS aux semaines 3, 6 et 9, et les souris ont bu librement pendant cette période.<ol><li>Préparer une solution de SSD à 2 % en ajoutant 500 mL d’eau distillée stérile à 10 g de DSS (voir le tableau des matières). Mélanger avec un mélangeur vortex et conserver à 4 °C jusqu’à utilisation.</li>
		<li>Chaque souris induite par l’OMA boit 500 mL de solution DSS à 2 % librement pendant 7 jours les semaines 3, 6 et 9 après l’induction de l’OMA.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Traitement médicamenteux
REMARQUE : Les humains adultes ont besoin de 63 g de LJZD par jour. Selon la formule de conversion de la dose expérimentale de médicament chez la souris et chez l’humain, dose expérimentale équivalente pour les souris (mg/kg) = dose humaine (mg/kg)/poids corporel (60 kg) x 9,1, la dose quotidienne des souris était d’environ 9,6 g/kg.
<ol><li>Traiter le groupe LJZD et 5-ASA avec 0,1 mL/10 g de la solution préparée de LJZD et de 5-ASA par gavage gastrique à la semaine 7 et à la semaine 15, respectivement.<ol><li>Pour l’administration intragastrique chez la souris, effectuez la procédure suivante. Tenez la souris dans la main gauche et dans la main droite, tenez l’appareil de perfusion gastrique. Insérez l’aiguille de la seringue dans la bouche et faites-la glisser le long de la paroi arrière du pharynx des souris. Faites glisser le long du pharynx pendant que les souris avalent et continuez à avancer. Lorsqu’il y avait une sensation de résistance et que la seringue pouvait être enfoncée dans le pharynx, retirez l’aiguille et terminez l’injection.</li>
	</ol></li>
	<li>Traitez le groupe témoin et le groupe modèle avec la même quantité de solution saline (voir le tableau des matériaux).</li>
	<li>Traitez les souris de chaque groupe avec un médicament approprié une fois par jour à la même heure pendant la période d’administration.</li>
</ol>4. Évaluation du modèle UC-CRC et efficacité de la LJZD
<ol><li>Score de l’indice d’activité de la maladie REMARQUE : Selon le tableau 2, le score de l’indice d’activité de la maladie (IAD) a été évalué en combinant la perte de poids, la viscosité fécale et le saignement des selles des souris.<ol><li>Enregistrez quotidiennement le poids des souris depuis le début de l’alimentation adaptative jusqu’à la fin du traitement médicamenteux.</li>
		<li>Observez attentivement la consistance fécale de chaque souris expérimentale et notez les selles comme l’une des trois conditions suivantes : selles normales et molles et diarrhée aqueuse.</li>
		<li>Enregistrez les saignements fécaux des animaux de laboratoire comme l’une des trois conditions suivantes : pas de saignement, peu de saignements et du sang visible dans les selles.</li>
	</ol></li>
	<li>Détection du taux d’IL-6 dans le sérum<ol><li>Traiter les souris avec LJZD ou 5-ASA pendant 9 semaines. Fixez les souris en saisissant la peau du cou de la souris avec la main gauche et en appuyant doucement sur la table expérimentale pour prendre la position latérale du décubitus. Coupez les moustaches des souris avec des ciseaux. Coupez soigneusement les moustaches des souris avec des ciseaux (voir le tableau des matériaux) pour éviter la contamination du sang. REMARQUE : Les souris qui ne pouvaient pas se tortiller librement étaient considérées comme correctement fixées. Si cela ne se produit pas, les souris doivent être réparées.</li>
		<li>Anesthésier la souris par inhalation d’isoflurane à 2 %. Stérilisez la peau autour du globe oculaire avec de l’éthanol (voir le tableau des matériaux). Appuyez doucement sur la peau de l’œil sur le côté pour que le globe oculaire soit congestionné et saillant.</li>
		<li>Clampez le globe oculaire avec une pince à épiler et retirez les globes oculaires avec précision et rapidement. Laissez le sang s’égoutter dans le tube centrifuge (voir Tableau des matériaux). Dans le processus, appuyez sur le cœur de la souris pour accélérer la collecte de sang.</li>
		<li>Conservez le sang prélevé à température ambiante pendant 30 min et centrifugez-le à 3 500 x g pendant 10 min. Prélever le surnageant et détecter le niveau d’IL-6 selon les instructions du kit de détection du contenu en IL-6 (voir le tableau des matériaux).</li>
	</ol></li>
	<li>Séparation du tissu colorectal<ol><li>Euthanasier les souris après prélèvement sanguin en inhalant 5 % d’isoflurane surdosé et luxation cervicale (voir tableau des matières) conformément à l’éthique animale.</li>
		<li>Conservez les souris dans un environnement anatomique cryogénique. Immobilisez les souris en position couchée. Coupez les poils du bas-ventre avec des ciseaux et stérilisez-les à l’éthanol.</li>
		<li>Pincez le point d’intersection entre les deux racines de la cuisse et la ligne médiane abdominale avec une pince à paupières (voir tableau des matériaux). Coupez une incision transversale d’environ 1 à 1,5 cm avec des ciseaux.</li>
		<li>Coupez une incision longitudinale le long de la ligne médiane de l’abdomen à partir du milieu de l’incision transversale vers l’apophyse xiphoïde.</li>
		<li>Retirez les tissus péricolorectaux en direction de l’anus pour séparer le colorectum des tissus environnants. Attention à ne pas endommager le colorectum.</li>
		<li>Poussez la peau de l’abdomen sur les côtés pour exposer complètement le colorectum. Retirer le colorectum de la cavité abdominale à l’aide d’une pince à paupières et couper les segments de l’anus au caecum (exclure) ; La longueur totale est d’environ 10 cm. Conserver les tissus colorectaux obtenus dans une solution saline à 4 °C.</li>
	</ol></li>
	<li>Évaluation de la longueur et du poids du rectum<ol><li>Extraire la solution saline à 4 °C avec une aiguille de 5 mL (voir le tableau des matières) pour rincer l’intérieur du colorectum. Ensuite, placez le colorectum sur du papier absorbant pour absorber l’humidité du tissu.</li>
		<li>Pesez les tissus colorectaux puis placez-les sur du papier A4 pour mesurer leur longueur.</li>
	</ol></li>
	<li>Mesurer le nombre de tumeurs dans le colorectum<ol><li>Coupez le colorectum dans le sens de la longueur pour le déplier complètement et observez le nombre et la taille des tumeurs dans le colorectum.</li>
	</ol></li>
	<li>Analyse pathologique du colorectum<ol><li>Fixer le colorectum dans du paraformaldéhyde à 4% pendant 24 h. Incorporer le tissu rectal fixé dans de la paraffine fondue et sectionner en continu sur une épaisseur de 5 μm par un microtome de congélation des tissus.</li>
		<li>Selon la procédure de Hou et al.24, détacher les sections dans du xylène, puis le déshydrater avec des concentrations en série d’éthanol. Après avoir coloré avec une solution d’hématoxyline pendant 5 min, rincez les sections à l’eau pure. Après cela, colorez avec une solution d’éosine à 0,5 % pendant 1 min (voir tableau des matériaux).</li>
		<li>Effectuez à nouveau une déshydratation en gradient et un traitement transparent au xylène. Scellez les coupes et observez-les au microscope optique (voir le tableau des matériaux) et photographiez, comme décrit par Xie et al.25.</li>
	</ol></li>
	<li>Analyse immunohistochimique du colorectum<ol><li>Déparaffinez et déshydratez les sections selon la méthode ci-dessus. Réparer l’antigène dans les sections avec une technique de réparation thermique à haute pression, comme décrit par Gok et al.26.</li>
		<li>Faire tremper les sections dans des bloqueurs de peroxydase endogènes à température ambiante pendant 15 min. Scellez les sections avec du sérum de chèvre (voir le tableau des matériaux).</li>
		<li>Ajouter l’anticorps primaire ZO-1 (1 :1000), l’occludine (1 :1000) et le KI67 (1 :500 ; voir le tableau des matériaux) dans les sections et incuber toute la nuit à 4 °C. Rincer les sections avec un tampon PBS (voir le tableau des matières), y ajouter un anticorps secondaire à usage général (1 :5000 ; voir le tableau des matériaux) et incuber à 37 °C pendant 30 min.</li>
		<li>Ajoutez la solution DAB (voir Tableau des matériaux) aux sections pour le développement des couleurs. Contre-colorez les sections avec une solution d’hématoxyline.</li>
		<li>Déshydratez, transparentisez et scellez à nouveau les sections. Observer l’expression des protéines au microscope optique.</li>
	</ol></li>
</ol>

Décoction de Liujunzi : un traitement efficace pour la prévention de l’UC-CRC

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Le CCR est l’un des cancers les plus courants dans le monde, avec environ 1 148 000 nouveaux cas et plus de 576 000 décès chaque année. Le CCR peut être divisé en trois types selon différentes causes, y compris héréditaire, sporadique et UC-CRC31. L’incidence du CCR chez les patients atteints de maladies inflammatoires de l’intestin telles que la colite ulcéreuse est significativement plus élevée que celle de la population générale. La colite ulcéreuse stimule le développement...

Le cancer colorectal (CCR) est une tumeur maligne gastro-intestinale courante, la troisième tumeur maligne la plus fréquente et la deuxième cause de décès dans le monde, représentant 10 % de l’incidence mondiale du cancer et 9,4 % du total des décès liés au cancer 1,2. Des facteurs génétiques, une inflammation chronique, un régime riche en graisses, le diabète et une flore intestinale anormale sont des facteurs de risque de CCR 3,4. Parmi eux, les maladies inflammatoires de l’intestin, en particulier la coloproctite ulcéreuse (CU), sont un facteur de risque évident de CCR 5,6. Le CCR associé à la COLITE ULCÉREUSE (UC-CRC) est un processus de transition de l’inflammation, de l’hyperplasie atypique et du cancer basé sur l’inflammation chronique du colorectum, qui est différent du modèle typique de développement de l’adénome-adénocarcinome du CCR 7,8. Par rapport à la population générale, le risque de CCR est environ 10 à 40 fois plus élevé chez les patients atteints de maladies inflammatoires de l’intestin9.
Actuellement, la chirurgie est toujours le traitement standard du CCR et, selon l’emplacement et le stade de la tumeur, une radiothérapie, un traitement médicamenteux systémique ou une combinaison des deux sont possibles10. Bien que ces modalités de traitement traditionnelles aient fait de grands progrès, en raison de l’hétérogénéité élevée et du taux de récidive du CCR, le pronostic est mauvais et l’effet du traitement n’est pas idéal11,12. Par conséquent, la détection précoce, le diagnostic précoce et le traitement complet sont essentiels pour améliorer le taux de survie des patients atteints de CCR, et il est particulièrement important de prêter attention à la transformation de la colite ulcéreuse en CCR. Au fil des ans, la médecine traditionnelle chinoise (MTC) a attiré beaucoup d’attention dans le traitement de l’UC-CRC ou de la gastrite chronique en raison de ses effets secondaires limités et de son efficacité significative. Sur la base d’un traitement dialectique, les célèbres praticiens de la médecine chinoise de différentes générations ont créé un grand nombre de prescriptions classiques, telles que la décoction Huangqi Jianzhong13, la décoction Sijunzi14 et la pilule Sishen15.
La décoction de Liujunzi (LJZD) est issue des travaux de Yi Xue Zheng Zhuan compilés sous la dynastie Ming et est une prescription classique de la MTC16. Comme le montre le tableau 1, le LJZD se compose de six herbes traditionnelles, dont Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. (Dangshen), Poria cocos (Schw.), Loup (Fuling), Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu), Glycyrrhiza uralensis Fisch. (Gancao), Citrus reticulata Blanco (Chenpi) et Pinellia ternata (Thunb.) Breit (Banxia), qui a pour effet de reconstituer le qi et de renforcer la rate, d’assécher l’humidité et de résoudre les mucosités. Dans la pratique clinique moderne, il est souvent utilisé pour traiter la gastrite chronique, les ulcères gastriques et les ulcères duodénaux. La recherche pharmacologique moderne a montré que la LJZD et la LJZD modifiée ont une valeur d’application élevée dans le traitement adjuvant de la colite ulcéreuse et du cancer du tube digestif 17,18,19.
À l’heure actuelle, il existe de nombreuses façons de construire des modèles murins UC-CRC, mais le modèle murin induit par l’azoxyméthane (AOM)/sulfate de dextran sodique (DSS) est le modèle UC-CRC le plus largement utilisé ; les symptômes cliniques, les observations morphologiques et pathologiques ont prouvé que le modèle est très similaire à l’UC-CRC humaine20,21. Le principe de base est d’induire d’abord la cancérogenèse avec l’OMA cancérigène chimique, puis d’exposer continuellement les souris à l’environnement de stimulation inflammatoire du DSS pour simuler les dommages continus et la réparation de l’épithélium de la muqueuse intestinale, construisant ainsi un modèle murin UC-CRC22. L’objectif de cette étude est d’établir un modèle murin de CCR-UC par injection intrapéritonéale d’OMA et stimulation cyclique du DSS à court terme et d’évaluer l’effet du médicament et le mécanisme moléculaire de la LJZD sur le CCR-UC afin de fournir une base scientifique pour le traitement du CCR-UC.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Azoxymethane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A5486</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-amino salicylic acid</td>
			<td>Kuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd</td>
			<td>3819413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J mice</td>
			<td>Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>NO 210726210100853716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slip</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>10212432C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB color development kit</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>2005289</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dewatering machine&#160;</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JJ-12J</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextran sulfate sodium</td>
			<td>Dalian Meilun Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>MB5535</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding machine</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JB-P5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin-eosin dye</td>
			<td>Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>B1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-6</td>
			<td>Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd</td>
			<td>MM-0163M2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science Co., Ltd</td>
			<td>R510-22-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KI67 primary antibody</td>
			<td>Google Biotechnology Inc</td>
			<td>GB121141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral gum</td>
			<td>Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>10004160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Object slide</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>10212432A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Occludin primary antibody</td>
			<td>Affnity</td>
			<td>DF7504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orthostatic optical microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Nikon Eclipse CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pathological microtome</td>
			<td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td>
			<td>RM2016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZO-1 primary antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab221547</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishment of coloproctitis cancer model in mice and evaluation of therapeutic effect of chinese medicine

Le cancer colorectal (CCR) est une tumeur maligne courante du système digestif et est devenu la troisième tumeur maligne la plus fréquente dans le monde et la deuxième cause de décès par malignité. La coloproctite ulcéreuse (CU) est une lésion précancéreuse, et le CCR associé à la COLITE ULCÉREUSE (CCR-UC) est le sous-type le plus courant de CCR. Par conséquent, un modèle raisonnable de CCR-UC est la pierre angulaire et la garantie du développement de nouveaux médicaments. La médecine traditionnelle chinoise (MTC) a été largement utilisée dans le traitement de l’UC-CRC en raison de sa bonne efficacité. En tant que prescription tonique classique de la MTC, la décoction de Liujunzi (LJZD) a été largement utilisée dans le traitement de l’UC-CRC. Dans cette étude, un modèle UC-CRC a été établi en combinant l’azométhane et le sulfate de dextran sodique, et le LJZD a été administré. Les données ont confirmé que le LJZD peut inhiber efficacement la transition du cancer dans l’UC-CRC en utilisant le poids corporel de la souris, la longueur colorectale, les facteurs pathologiques et inflammatoires, la fonction de barrière colorectale et les marqueurs du cancer. Ce protocole fournit un système d’évaluation de l’efficacité de la MTC dans la prévention et le traitement de l’UC-CRC.

Colorectal cancer (CRC) is a common gastrointestinal malignancy, the third most common malignancy, and the second most common cause of death in the world, accounting for 10% of the global cancer incidence and 9.4% of the total cancer-related death1,2. Genetic factors, chronic inflammation, high-fat diet, diabetes, and abnormal intestinal flora are risk factors for CRC3,4. Among them, inflammatory bowel disease, especially ulcerative coloproctitis (UC), is a clear risk factor for CRC5,6. UC-associated CRC (UC-CRC) is a transition process of inflammation, atypical hyperplasia, and cancer based on chronic inflammation of the colorectum, which is different from the typical adenoma-adenocarcinoma development model of CRC7,8. Compared with the general population, the risk of CRC is approximately 10-40 times higher in patients with inflammatory bowel disease9.
Currently, surgery is still the standard treatment for CRC, and depending on the location and stage of the tumor, radiation therapy, systemic drug therapy, or a combination of both are possible10. Although these traditional treatment modalities have made great progress, due to the high heterogeneity and recurrence rate of CRC, the prognosis is poor, and the treatment effect is not ideal11,12. Therefore, early detection, early diagnosis, and comprehensive treatment are key to improving the survival rate of CRC patients, and it is particularly important to pay attention to the transformation of UC to CRC. Over the years, traditional Chinese medicine (TCM) has attracted much attention in the treatment of UC-CRC or chronic gastritis due to its limited side effects and significant efficacy. Based on dialectical treatment, famous Chinese medicine practitioners of various generations have created a large number of classic prescriptions, such as Huangqi Jianzhong decoction13, Sijunzi decoction14, and Sishen pill15.
Liujunzi decoction (LJZD) originated from the works of Yi Xue Zheng Zhuan compiled in the Ming Dynasty and is a classic prescription in TCM16. As shown in Table 1, LJZD consists of six traditional herbs, including Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. (Dangshen), Poria cocos (Schw.) Wolf (Fuling), Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu), Glycyrrhiza uralensis Fisch. (Gancao), Citrus reticulata Blanco (Chenpi) and Pinellia ternata (Thunb.) Breit (Banxia), which has the effect of replenishing qi and strengthening the spleen, drying dampness, and resolving phlegm. In modern clinical practice, it is often used to treat chronic gastritis, gastric ulcers, and duodenal ulcers. Modern pharmacological research has shown that LJZD and modified LJZD have high application value in the adjuvant treatment of UC and digestive tract cancer17,18,19.
At present, there are many ways to construct UC-CRC mouse models, but the azoxymethane (AOM)/dextran sulfate sodium (DSS) induced mouse model is the most widely used UC-CRC model; the clinical symptoms, morphological, and pathological observations have proved that the model is very similar to human UC-CRC20,21. The basic principle is to first induce carcinogenesis with chemical carcinogen AOM and then continuously expose mice to the inflammatory stimulation environment of DSS to simulate the continuous damage and repair of intestinal mucosal epithelium, thereby constructing a UC-CRC mouse model22. The aim of this study is to establish a mouse model of UC-CRC by intraperitoneal injection of AOM and cyclic stimulation of DSS in the short term and to evaluate the effect of the drug and the molecular mechanism of LJZD on UC-CRC in order to provide a scientific basis for the treatment of UC-CRC.

Pleins feux sur l’auteur : La décoction de liujunzi comme traitement traditionnel chinois du cancer de la coloproctite

Établissement d’un modèle de cancer de la coloproctite chez la souris et évaluation de l’effet thérapeutique de la médecine chinoise

This study was on the prevention and treatment of coloproctitis cancer with traditional Chinese medicine. We aim to establish a mouse model for coloproctitis cancer and evaluate traditional Chinese medicine indicators. We confirmed that the Chinese medicine Liujunzi decoction is a effective treatment for coloproctitis cancer prevention.In the future, we will work to identify more sensitive biomarkers for colon and rectal cancer and screen Liujunzi decoction for therapeutic targets.

La décoction de LJZD a été préparée selon le rapport de composition des médicaments du tableau 1 et la méthode de décoction de la MTC de la figure 1A. Selon le point temporel indiqué à la figure 1B, des souris ont reçu une injection intrapéritonéale de 1 mg/mL d’OMA le 7e jour, et les souris ont eu libre accès à de l’eau potable contenant 2 % de DSS au cours des 3e, 6e et 9esemaines....

Watch this Scientific Journal Video about Author Spotlight: Liujunzi Decoction as a Traditional Chinese Treatment for Coloproctitis Cancer at JoVE.com

Ce protocole fournit un modèle murin de cancer colorectal associé à la coloproctite ulcéreuse induit par l’azométhane combiné à du sulfate de dextran sodique. Le modèle a été utilisé pour évaluer l’efficacité des composés de la médecine traditionnelle chinoise dans la prévention et le traitement du cancer colorectal.

Colorectal cancer (CRC) is a common malignancy of the digestive system and has become the third most common malignancy worldwide and the second leading ...

Cette étude portait sur la prévention et le traitement du cancer de la coloproctite avec la médecine traditionnelle chinoise. Nous visons à établir un modèle murin pour le cancer de la coloproctite et à évaluer les indicateurs de la médecine traditionnelle chinoise. Nous avons confirmé que la décoction de Liujunzi de médecine chinoise est un traitement efficace pour la prévention du cancer de la coloproctite.À l’avenir, nous travaillerons à identifier des biomarqueurs plus sensibles pour le cancer du côlon et du rectum et à dépister la décoction de Liujunzi pour des cibles thérapeutiques.

establishment-coloproctitis-cancer-model-mice-evaluation-therapeutic

Research

JoVE Journal

Medicine

Establishment of Coloproctitis Cancer Model in Mice and Evaluation of Therapeutic Effect of Chinese Medicine

607 vues.  Changchun University of Chinese Medicine. Cette étude portait sur la prévention et le traitement du cancer de la coloproctite avec la médecine traditionnelle chinoise. Nous visons à établir un modèle murin pour le cancer de la coloproctite et à évaluer les indicateurs de la médecine traditionnelle chinoise. Nous avons confirmé que la décoction de Liujunzi de médecine chinoise est un traitement efficace pour la prévention du cancer de la coloproctite.À l’avenir, nous travaillerons à identifier des biomarqueurs ...

Vidéo: Pleins feux sur l’auteur : La décoction de liujunzi comme traitement traditionnel chinois du cancer de la coloproctite

Colorectal cancer (CRC) is a common malignancy of the digestive system and has become the third most common malignancy worldwide and the second leading cause of malignancy-related death. Ulcerative coloproctitis (UC) is a precancerous lesion, and UC-associated CRC (UC-CRC) is the most common subtype of CRC. Therefore, a reasonable UC-CRC model is the cornerstone and guarantee of new drug development. Traditional Chinese medicine (TCM) has been widely used in the treatment of UC-CRC due to its good efficacy. As a classic tonic prescription of TCM, Liujunzi decoction (LJZD) has been widely used in the treatment of UC-CRC. In this study, a UC-CRC model was established by combining azomethane and dextran sulfate sodium, and the LJZD was administered. The data confirmed that LJZD can effectively inhibit cancer transition in UC-CRC by using mouse body weight, colorectal length, pathological and inflammatory factors, colorectal barrier function, and cancer markers. This protocol provides a system for evaluating the efficacy of TCM in the prevention and treatment of UC-CRC.

This protocol provides a mouse model of ulcerative coloproctitis-associated colorectal cancer induced by azomethane combined with dextran sulfate sodium. The model was used to evaluate the efficacy of traditional Chinese medicine compounds in the prevention and treatment of colorectal cancer.

Recherche

Médecine

Preparation of Liujunzi Decoction (LJZD) for the Treatment of Ulcerative Coloproctitis-Colorectal Cancer  (UC-CRC)

To begin place Dang Shen, Bai Zhu, into a specialized ceramic pot. Add 1000 milliliters of distilled water and let it soak at room temperature for one hour. Using a grinder, grind 12 grams of Fu ling into a fine powder.Then, soak the powdered Fu ling in 300 milliliters of distilled water in a separate container for one hour at room temperature. Mix the prepared Chinese herbal mixture in the specialized ceramic pot. Boil the mixture and maintain it over medium heat until the decoction volume reduces to 300 milliliters.Combine the filtrate obtained from the decoction and continue boiling until the volume reduces to 150 milliliters. Then centrifuge the concentrated liquid at 10, 000 G for five minutes. Concentrate the obtained supernatant to 30 milliliters over medium heat.Transfer the final concentrate to a dish and dry it using an electric drying oven until only the solute remains as a powder. Now, weigh the obtained powder, and dissolve it in sterile distilled water to create the daily dosage for mice. To prepare five amino salicylic acid, weigh 64 milligrams of five amino salicylic acid powder, and dissolve it in 200 milliliters of sterile distilled water.

Préparation de la décoction de Liujunzi (LJZD) pour le traitement de la coloproctite ulcéreuse-cancer colorectal (UC-CRC)

Establishment of an Ulcerative Coloproctitis-Colorectal Cancer (UC-CRC) Model to Evaluate the Therapeutic Effect of Chinese Medicine

To begin, gently position the mouse with its belly up and the head slightly down. Grasp the back skin to secure the abdominal area and insert a one milliliter syringe needle, one centimeter to the right of the midline of the abdomen at the intersection of the line, connecting both thighs. Gradually insert the one milliliter syringe needle to a depth of three to five millimeters under the skin.Insert the needle approximately 0.3 to 0.5 millimeters into the abdominal cavity at a 45 degree angle. Once the needle tip passes through the abdominal muscle, notice a sudden decrease in resistance. Slowly inject 0.1 milliliters of the azoxymethane injection solution per 10 grams of body weight into the mice.Subsequently, retract the syringe gently. Then add 500 milliliters of sterile distilled water to 10 grams of DSS. To prepare a 2%DSS solution.Mix the solution with a vortex mixer and store at four degrees Celsius until use, administer the prepared LJZD and five amino salicylic acid solution daily at a consistent time via gastric gavage to the respective groups at week seven and week 15.

Mise en place d’un modèle de coloproctite ulcéreuse-cancer colorectal (UC-CRC) pour évaluer l’effet thérapeutique de la médecine chinoise

Evaluation of an Ulcerative Coloproctitis-Colorectal Cancer (UC-CRC) Model and Efficacy of Liujunzi Decoction (LJZD)

To begin, establish the UC-CRC mouse model and administer the prepared LJZD and 5-ASA solution to the respective groups. After the drug treatment, monitor the weight of mice daily from the beginning of adaptive feeding until the end of drug treatment. Diligently observe and document the fecal consistency of each experimental mouse, categorizing it as normal, loose stools or watery diarrhea.Carefully document any fecal bleeding observed in the experimental animals, categorizing it into no bleeding, minimal bleeding, or visible blood in the stool. To separate the colorectal tissue, maintain the euthanized mice within a cryogenic anatomical environment. Secure the mice in a supine position.Using scissors, trim the lower abdominal hair and sterilize the area with ethanol. Using eyelid forceps, gently grasp the intersection point between the two thigh roots and the abdominal midline. Then use scissors to create a one to 1.5 centimeters long transverse incision.Perform a longitudinal incision along the median line of the abdomen, starting from the midpoint of the transverse incision to the xiphoid process. Carefully detach the peri-colorectal tissues in the direction towards the anus, separating the colorectum rom the surrounding tissue. Gently push aside the abdominal skin to fully expose the colorectum.Using eyelid forceps, extract the colorectum from the abdominal cavity and section it from the anus to the cecum. Preserve the collected colorectal tissues in saline at four degrees Celsius. The UC-CRC model group had a significant weight loss compared to the control group which was alleviated by LJZD treatment.LJZD treatment improved the disease activity index compared with the UC-CRC model group.