Este trabalho foi apoiado pelo Departamento Provincial de Ciência e Tecnologia de Jilin (YDZJ202201ZYTS181).

O procedimento animal foi aprovado pelo Comitê de Ética da Universidade de Medicina Chinesa de Changchun (Número de registro: 2021214). Camundongos C57BL/6J livres de patógenos específicos (8-10 semanas, peso 18-22 g), machos e fêmeas, foram alojados em gaiolas ventiladas independentemente a 22 °C e 65% de umidade relativa. Os camundongos iniciaram o experimento após 7 dias de alimentação adaptativa, durante os quais tiveram livre acesso à água e à dieta.
1. Preparação de medicamentos
<ol><li>Preparação do LJZD NOTA: O medicamento chinês utilizado foi adquirido ao Hospital Afiliado da Universidade de Medicina Chinesa de Changchun e foi identificado como medicina chinesa genuína (ver Tabela 1).<ol><li>Coloque Dangshen (12 g), Baizhu (12 g), Gancao (6 g), Chenpi (12 g), Jiangbanxia (9 g) em um pote de cerâmica especializado (ver Tabela de Materiais). Adicionar 1000 ml de água destilada e deixar de molho à temperatura ambiente durante 1 h (ver figura 1A).</li>
		<li>Pó 12 g Encher em pó fino com um moedor e mergulhar em 300 mL de água destilada em outro recipiente por 1 h à temperatura ambiente.</li>
		<li>Misture a medicina chinesa acima no pote de cerâmica especializado. Ferva a mistura e depois mantenha em fogo médio até restar apenas 300 mL de decocção. Use gaze médica para filtrar e preservar o filtrado à temperatura ambiente.</li>
		<li>Adicionar 1000 mL de água destilada e repetir a operação de decocção acima mais uma vez. Filtre novamente usando gaze médica. Combine o filtrado e ferva até restarem apenas 150 mL.</li>
		<li>Centrifugar o líquido concentrado a 10.000 x g por 5 min e concentrar o sobrenadante obtido a 30 mL em fogo médio. Transfira o concentrado final para um prato e seque-o em estufa de secagem elétrica até que reste apenas o soluto em pó.</li>
		<li>Pesar o sólido acima e dissolvê-lo em água destilada estéril para obter uma solução contendo 22,85 mg de droga por 0,2 mL (114,16 mg/mL), que é a dose diária de camundongos.</li>
	</ol></li>
	<li>Preparação de ácido 5-amino salicílico NOTA: O ácido 5-amino salicílico (5-AAS; ver Tabela de Materiais) tem um bom efeito preventivo na RCU-CCR, e foi usado como droga positiva neste estudo23.<ol><li>Dissolver 64 mg de pó de 5-ASA em 200 mL de água destilada estéril para obter 1,82 mg/mL de solução de 5-AAS. A dose diária para um único camundongo foi de 0,2 mL.</li>
	</ol></li>
	<li>Preparação da solução injetável de AOM<ol><li>Adicionar 2,5 ml de água destilada estéril em pó de AOM 25 mg (ver Tabela de Materiais) e misturar por misturador de vórtice (ver Tabela de Materiais) para fazer 10 mg/ml de solução-mãe de AOM, conservar a -20 °C até à utilização.</li>
		<li>Preparar a solução de injeção de AOM diluindo a solução-mãe de AOM com água destilada estéril a 10:1 (1 mg/mL).</li>
	</ol></li>
</ol>2. Estabelecimento do modelo UC-CRC
OBS: O experimento foi dividido em 4 grupos: controle, modelo, LJZD e grupo 5-ASA, sendo 10 camundongos em cada grupo. Com exceção do grupo controle, os demais grupos foram tratados com OMA e ESD.
<ol><li>Injeção intraperitoneal de solução injetável de AOM NOTA: Após alimentação adaptativa para 7 d, os camundongos receberam solução de injeção de AOM (1 mg/mL) por injeção intraperitoneal (ver Figura 1B).<ol><li>Segure o mouse com a barriga para cima e a cabeça levemente para baixo. Segure a pele posterior para apertar a pele abdominal e perfure a pele aproximadamente 1 cm à direita da intersecção da linha da raiz de ambas as coxas na linha média do abdome com uma seringa de 1 mL (ver Tabela de Materiais).</li>
		<li>Empurre a agulha de seringa de 1 mL para uma distância de 3-5 mm sob a pele, mantendo-a paralela à linha média abdominal, e insira a agulha 0,3-0,5 mm na cavidade abdominal a 45°.</li>
		<li>Depois que a ponta passa pelo músculo abdominal, o operador sente uma perda súbita de resistência. Em seguida, puxe a seringa para fora e para trás para observar se ocorre infiltração de líquido. Caso contrário, empurre a solução de injeção de AOM lentamente para os ratos a 0,1 mL/10 g.</li>
	</ol></li>
	<li>Estimulação cíclica da solução de DSS a 2% NOTA: Cada camundongo induzido por OMA recebeu 500 mL de solução de DSS nas semanas 3, 6 e 9, e os camundongos beberam livremente durante esse período.<ol><li>Preparar a solução de DSS a 2% adicionando 500 ml de água destilada estéril a 10 g de DSS (ver Tabela de Materiais). Misture com um misturador de vórtices e conservar a 4 °C até à utilização.</li>
		<li>Cada camundongo induzido por OMA bebe livremente 500 mL de solução de DSS a 2% por 7 dias nas semanas 3, 6 e 9 após a indução com OMA.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Tratamento medicamentoso
NOTA: Humanos adultos precisam de 63 g de LJZD por dia. De acordo com a fórmula de conversão de dose experimental de camundongos e drogas humanas, dose experimental equivalente para camundongos (mg/kg) = dose humana (mg/kg)/peso corporal (60 kg) x 9,1, a dose diária de camundongos foi de cerca de 9,6 g/kg.
<ol><li>Tratar o grupo LJZD e 5-ASA com 0,1 mL/10 g da solução preparada de LJZD e 5-AAS por gavagem gástrica na semana 7 e na semana 15, respectivamente.<ol><li>Para administração intragástrica em camundongos, execute o seguinte procedimento. Segure o mouse na mão esquerda e, na mão direita, segure o aparelho de perfusão do estômago. Insira a agulha da seringa na boca e deslize-a pela parede posterior da faringe dos ratos. Deslize pela faringe enquanto os ratos engolem e continuam a avançar. Quando houvesse uma sensação de resistência, e a seringa pudesse ser empurrada para dentro da faringe, puxe a agulha para fora e complete a injeção.</li>
	</ol></li>
	<li>Tratar o grupo controle e modelo com a mesma quantidade de soro fisiológico (ver Tabela de Materiais).</li>
	<li>Trate os ratos em cada grupo com droga apropriada uma vez por dia à mesma hora durante o período de administração.</li>
</ol>4. Avaliação do modelo de CCR-RCU e eficácia do LJZD
<ol><li>Escore do índice de atividade da doença NOTA: De acordo com a Tabela 2, o escore do índice de atividade da doença (DAI) foi avaliado pela combinação de perda de peso, viscosidade fecal e sangramento fecal dos camundongos.<ol><li>Registre o peso dos camundongos diariamente desde o início da alimentação adaptativa até o final do tratamento medicamentoso.</li>
		<li>Observe cuidadosamente a consistência fecal de cada camundongo experimental e registre os movimentos intestinais como uma das três condições: fezes normais, soltas e diarreia aquosa.</li>
		<li>Registrar o sangramento fecal dos animais experimentais como uma das três condições: sem sangramento, pouco sangramento e sangue visível nas fezes.</li>
	</ol></li>
	<li>Detecção do nível de IL-6 no soro<ol><li>Trate camundongos com LJZD ou 5-ASA por 9 semanas. Fixe os ratos segurando a pele do pescoço do rato com a mão esquerda e pressionando suavemente a mesa experimental para assumir a posição de decúbito lateral. Corte os bigodes dos ratos com uma tesoura. Corte cuidadosamente os bigodes dos ratinhos com uma tesoura (ver Tabela de Materiais) para evitar a contaminação do sangue. NOTA: Os ratos que não conseguiam mexer livremente foram considerados devidamente fixados. Se isso não acontecer, os ratos devem ser fixados.</li>
		<li>Anestesiar o camundongo por inalação de isoflurano a 2%. Esterilizar a pele ao redor do globo ocular com etanol (ver Tabela de Materiais). Pressione a pele dos olhos do lado suavemente para deixar o globo ocular congestionado e saliente.</li>
		<li>Aperte o globo ocular com uma pinça de cotovelo e remova os globos oculares com precisão e rapidez. Deixe o sangue escorrer para o tubo centrífugo (ver Tabela de Materiais). No processo, toque no coração do mouse para acelerar a coleta de sangue.</li>
		<li>Manter o sangue coletado em temperatura ambiente por 30 min e centrifugar a 3.500 x g por 10 min. Coletar o sobrenadante e detectar o nível de IL-6 de acordo com as instruções do kit de detecção de conteúdo IL-6 (consulte a Tabela de Materiais).</li>
	</ol></li>
	<li>Separando o tecido colorretal<ol><li>Eutanasiar os camundongos após a coleta de sangue inalando isoflurano com overdose de 5% e deslocamento cervical (ver Tabela de Materiais) de acordo com a ética animal.</li>
		<li>Manter os camundongos em um ambiente anatômico criogênico. Imobilizar os camundongos em decúbito dorsal. Corte os pelos da parte inferior do abdômen com tesoura e esterilize-os com etanol.</li>
		<li>Aperte o ponto de intersecção entre as duas raízes da coxa e a linha média abdominal com pinça palpebral (ver Tabela de Materiais). Corte uma incisão transversal de cerca de 1-1,5 cm com tesoura.</li>
		<li>Clipar uma incisão longitudinal ao longo da linha mediana do abdome a partir do ponto médio da incisão transversal em direção ao processo xifoide.</li>
		<li>Remova os tecidos pericolorretais na direção do ânus para separar o colorreto do tecido circundante. Tenha cuidado para não danificar o colorreto.</li>
		<li>Empurre a pele do abdômen para os lados para expor totalmente o colorreto. Remova o colorreto da cavidade abdominal com pinça palpebral e corte os segmentos do ânus ao ceco (excluindo); O comprimento total é de cerca de 10 cm. Armazenar os tecidos colorretais obtidos em solução salina a 4 °C.</li>
	</ol></li>
	<li>Avaliação do comprimento e peso do reto<ol><li>Extrair o soro fisiológico a 4 °C com uma agulha de 5 ml (ver Tabela de Materiais) para lavar o interior do colorretal. Em seguida, coloque o colorreto sobre papel absorvente para absorver a umidade do tecido.</li>
		<li>Pese os tecidos colorretais e, em seguida, coloque-os em papel A4 para medir seu comprimento.</li>
	</ol></li>
	<li>Medir o número de tumores no colorreto<ol><li>Corte o colorreto longitudinalmente para desdobrá-lo completamente e observe o número e o tamanho dos tumores no colorreto.</li>
	</ol></li>
	<li>Análise patológica do colorreto<ol><li>Fixar o colorreto em paraformaldeído a 4% por 24 horas. Embutir o tecido retal fixado em parafina derretida e cortar continuamente com uma espessura de 5 μm por um micrótomo de congelamento de tecido.</li>
		<li>De acordo com o procedimento de Hou et al.24, desparafinar os cortes em xileno e desidratá-los com concentrações seriadas de etanol. Após coloração com solução de hematoxilina por 5 min, enxaguar os cortes com água pura. Depois disso, corar com solução de eosina a 0,5% por 1 minuto (ver Tabela de Materiais).</li>
		<li>Realizar novamente a desidratação do gradiente e o tratamento transparente com xileno. Selar os cortes e observá-los ao microscópio óptico (ver Tabela de Materiais) e fotografar, conforme descrito por Xie et al.25.</li>
	</ol></li>
	<li>Análise imunoistoquímica do colorreto<ol><li>Despifilar e desidratar as seções de acordo com o método acima. Reparar o antígeno nos cortes com técnica de reparo térmico a alta pressão, conforme descrito por Gok et al.26.</li>
		<li>Mergulhe os cortes em bloqueadores de peroxidase endógena à temperatura ambiente por 15 min. Selar as secções com soro de cabra (ver Tabela de Materiais).</li>
		<li>Adicione o anticorpo primário ZO-1 (1:1000), Occludina (1:1000) e KI67 (1:500; ver Tabela de Materiais) às seções e incube durante a noite a 4 °C. Enxaguar as secções com tampão PBS (ver Tabela de Materiais), adicionar anticorpo secundário de uso geral (1:5000; ver Tabela de Materiais) e incubar a 37 °C durante 30 minutos.</li>
		<li>Adicione a solução DAB (consulte Tabela de materiais) às seções para desenvolvimento de cores. Contramanchar os cortes com solução de hematoxilina.</li>
		<li>Desidrate, transparente e sele as seções novamente. Observar a expressão da proteína pelo microscópio óptico.</li>
	</ol></li>
</ol>

Decocção de Liujunzi: um tratamento eficaz para a prevenção de UC-CRC

Os autores não têm nada a revelar.

O CCR é um dos cânceres mais comuns em todo o mundo, com aproximadamente 1.148.000 novos casos e mais de 576.000 mortes a cada ano. O CCR pode ser dividido em três tipos de acordo com diferentes causas, incluindo hereditárias, esporádicas e RCU-CCR31. A incidência de CCR em pacientes com doenças inflamatórias intestinais, como a RCU, é significativamente maior do que na população geral. A RCU estimula o desenvolvimento do CCR através da via inflamatória-neoplásica, que difere da via ...

O câncer colorretal (CCR) é uma neoplasia maligna comum do trato gastrointestinal, a terceira neoplasia maligna mais comum e a segunda causa de morte mais comum no mundo, sendo responsável por 10% da incidência mundial de câncer e 9,4% do total de mortes relacionadas aocâncer1,2. Fatores genéticos, inflamação crônica, dieta rica em gordura, diabetes e flora intestinal anormal são fatores de risco para CCR 3,4. Dentre elas, a doença inflamatória intestinal, especialmente a coloproctite ulcerativa (RCU), é um claro fator de risco paraCCR5,6. O CCR associado à RCU (CCR-RCC) é um processo de transição de inflamação, hiperplasia atípica e câncer baseado na inflamação crônica do colorreto, que é diferente do modelo típico de desenvolvimento de adenoma-adenocarcinoma doCCR7,8. Comparado com a população geral, o risco de CCR é aproximadamente 10-40 vezes maior em pacientes com doença inflamatóriaintestinal9.
Atualmente, a cirurgia ainda é o tratamento padrão para o CCR e, dependendo da localização e do estágio do tumor, a radioterapia, a terapia medicamentosa sistêmica ou a combinação de ambos sãopossíveis10. Embora essas modalidades tradicionais de tratamento tenham feito grandes progressos, devido à alta heterogeneidade e taxa de recorrência do CCR, o prognóstico é ruim e o efeito do tratamento não é oideal11,12. Portanto, a detecção precoce, o diagnóstico precoce e o tratamento abrangente são fundamentais para melhorar a taxa de sobrevida dos pacientes com CCR, e é particularmente importante prestar atenção à transformação da RCU em CCR. Ao longo dos anos, a medicina tradicional chinesa (MTC) tem atraído muita atenção no tratamento do CCR-RCU ou gastrite crônica devido aos seus efeitos colaterais limitados e eficácia significativa. Com base no tratamento dialético, famosos praticantes da medicina chinesa de várias gerações criaram um grande número de prescrições clássicas, como a decocção Huangqi Jianzhong13, a decocção Sijunzi14 e a pílula Sishen15.
A decocção de Liujunzi (LJZD) originou-se dos trabalhos de Yi Xue Zheng Zhuan compilados na Dinastia Ming e é uma prescrição clássica na MTC16. Como mostrado na Tabela 1, LJZD consiste de seis ervas tradicionais, incluindo Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. (Dangshen), Poria cocos (Schw.) Wolf (Fuling), Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu), Glycyrrhiza uralensis Fisch. (Gancão), Citrus reticulata Blanco (Chenpi) e Pinellia ternata (Thunb.) Breit (Banxia), que tem o efeito de repor o qi e fortalecer o baço, secar a umidade e resolver o catarro. Na prática clínica moderna, é frequentemente usado para tratar gastrite crônica, úlceras gástricas e úlceras duodenais. Pesquisas farmacológicas modernas têm demonstrado que o LJZD e o LJZD modificado têm alto valor de aplicação no tratamento adjuvante do câncer da RCU e do trato digestivo 17,18,19.
Atualmente, existem muitas maneiras de construir modelos de camundongos UC-CRC, mas o modelo de camundongo induzido por azoximetano (AOM)/dextran sulfato de sódio (DSS) é o modelo de UC-CRC mais amplamente utilizado; os sintomas clínicos, as observações morfológicas e patológicas comprovaram que o modelo é muito semelhante ao CCR-RCU humano20,21. O princípio básico é primeiro induzir a carcinogênese com AOM carcinogênico químico e, em seguida, expor continuamente camundongos ao ambiente de estimulação inflamatória da ESD para simular o dano contínuo e o reparo do epitélio da mucosa intestinal, construindo assim um modelo de camundongo UC-CRC22. O objetivo deste estudo é estabelecer um modelo murino de CCR-RCC por injeção intraperitoneal de OMA e estimulação cíclica de ESD em curto prazo e avaliar o efeito da droga e do mecanismo molecular do LJZD no CCR-RCU, a fim de fornecer uma base científica para o tratamento do CCR-RCU.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Azoxymethane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A5486</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-amino salicylic acid</td>
			<td>Kuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd</td>
			<td>3819413</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J mice</td>
			<td>Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>NO 210726210100853716</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slip</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>10212432C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB color development kit</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>2005289</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dewatering machine&#160;</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JJ-12J</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextran sulfate sodium</td>
			<td>Dalian Meilun Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>MB5535</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding machine</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JB-P5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin-eosin dye</td>
			<td>Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>B1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IL-6</td>
			<td>Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd</td>
			<td>MM-0163M2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD Life Science Co., Ltd</td>
			<td>R510-22-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KI67 primary antibody</td>
			<td>Google Biotechnology Inc</td>
			<td>GB121141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral gum</td>
			<td>Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd</td>
			<td>10004160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Object slide</td>
			<td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td>
			<td>10212432A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Occludin primary antibody</td>
			<td>Affnity</td>
			<td>DF7504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orthostatic optical microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Nikon Eclipse CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pathological microtome</td>
			<td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td>
			<td>RM2016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZO-1 primary antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab221547</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

establishment of coloproctitis cancer model in mice and evaluation of therapeutic effect of chinese medicine

O câncer colorretal (CCR) é uma neoplasia maligna comum do sistema digestivo e tornou-se a terceira neoplasia maligna mais comum em todo o mundo e a segunda causa de morte relacionada à malignidade. A coloproctite ulcerativa (RCU) é uma lesão pré-cancerosa, e o CCR associado à RCU (CCR-RCU) é o subtipo mais comum de CCR. Portanto, um modelo razoável de CCR-UC é a pedra angular e a garantia do desenvolvimento de novos fármacos. A medicina tradicional chinesa (MTC) tem sido amplamente utilizada no tratamento do CCR-RCU devido à sua boa eficácia. Como prescrição tônica clássica da MTC, a decocção de Liujunzi (LJZD) tem sido amplamente utilizada no tratamento do CCR-RCU. Neste estudo, um modelo de CCR-RCU foi estabelecido pela combinação de azometano e sulfato de sódio dextrana e o LJZD foi administrado. Os dados confirmaram que o LJZD pode efetivamente inibir a transição do câncer no UC-CRC usando o peso corporal do rato, comprimento colorretal, fatores patológicos e inflamatórios, função da barreira colorretal e marcadores de câncer. Esse protocolo fornece um sistema de avaliação da eficácia da MTC na prevenção e tratamento do CCR-RCU.

Colorectal cancer (CRC) is a common gastrointestinal malignancy, the third most common malignancy, and the second most common cause of death in the world, accounting for 10% of the global cancer incidence and 9.4% of the total cancer-related death1,2. Genetic factors, chronic inflammation, high-fat diet, diabetes, and abnormal intestinal flora are risk factors for CRC3,4. Among them, inflammatory bowel disease, especially ulcerative coloproctitis (UC), is a clear risk factor for CRC5,6. UC-associated CRC (UC-CRC) is a transition process of inflammation, atypical hyperplasia, and cancer based on chronic inflammation of the colorectum, which is different from the typical adenoma-adenocarcinoma development model of CRC7,8. Compared with the general population, the risk of CRC is approximately 10-40 times higher in patients with inflammatory bowel disease9.
Currently, surgery is still the standard treatment for CRC, and depending on the location and stage of the tumor, radiation therapy, systemic drug therapy, or a combination of both are possible10. Although these traditional treatment modalities have made great progress, due to the high heterogeneity and recurrence rate of CRC, the prognosis is poor, and the treatment effect is not ideal11,12. Therefore, early detection, early diagnosis, and comprehensive treatment are key to improving the survival rate of CRC patients, and it is particularly important to pay attention to the transformation of UC to CRC. Over the years, traditional Chinese medicine (TCM) has attracted much attention in the treatment of UC-CRC or chronic gastritis due to its limited side effects and significant efficacy. Based on dialectical treatment, famous Chinese medicine practitioners of various generations have created a large number of classic prescriptions, such as Huangqi Jianzhong decoction13, Sijunzi decoction14, and Sishen pill15.
Liujunzi decoction (LJZD) originated from the works of Yi Xue Zheng Zhuan compiled in the Ming Dynasty and is a classic prescription in TCM16. As shown in Table 1, LJZD consists of six traditional herbs, including Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. (Dangshen), Poria cocos (Schw.) Wolf (Fuling), Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu), Glycyrrhiza uralensis Fisch. (Gancao), Citrus reticulata Blanco (Chenpi) and Pinellia ternata (Thunb.) Breit (Banxia), which has the effect of replenishing qi and strengthening the spleen, drying dampness, and resolving phlegm. In modern clinical practice, it is often used to treat chronic gastritis, gastric ulcers, and duodenal ulcers. Modern pharmacological research has shown that LJZD and modified LJZD have high application value in the adjuvant treatment of UC and digestive tract cancer17,18,19.
At present, there are many ways to construct UC-CRC mouse models, but the azoxymethane (AOM)/dextran sulfate sodium (DSS) induced mouse model is the most widely used UC-CRC model; the clinical symptoms, morphological, and pathological observations have proved that the model is very similar to human UC-CRC20,21. The basic principle is to first induce carcinogenesis with chemical carcinogen AOM and then continuously expose mice to the inflammatory stimulation environment of DSS to simulate the continuous damage and repair of intestinal mucosal epithelium, thereby constructing a UC-CRC mouse model22. The aim of this study is to establish a mouse model of UC-CRC by intraperitoneal injection of AOM and cyclic stimulation of DSS in the short term and to evaluate the effect of the drug and the molecular mechanism of LJZD on UC-CRC in order to provide a scientific basis for the treatment of UC-CRC.

Autor em destaque: Decocção de Liujunzi como tratamento tradicional chinês para câncer de coloproctite

Estabelecimento do Modelo de Câncer de Coloproctite em Camundongos e Avaliação do Efeito Terapêutico da Medicina Chinesa

This study was on the prevention and treatment of coloproctitis cancer with traditional Chinese medicine. We aim to establish a mouse model for coloproctitis cancer and evaluate traditional Chinese medicine indicators. We confirmed that the Chinese medicine Liujunzi decoction is a effective treatment for coloproctitis cancer prevention.In the future, we will work to identify more sensitive biomarkers for colon and rectal cancer and screen Liujunzi decoction for therapeutic targets.

A decocção do LJZD foi preparada de acordo com a proporção de composição dos fármacos na Tabela 1 e o método de decocção da MTC na Figura 1A. De acordo com o momento indicado na Figura 1B, os camundongos foram injetados intraperitonealmente com 1 mg/mL de AOM no7º dia, e os camundongos tiveram livre acesso à água potável contendo 2% de DSS na3ª,6ª e9ª semanas. O modelo de camundongo UC...

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Este protocolo fornece um modelo de camundongo de câncer colorretal ulcerativo associado à coloproctite induzido por azometano combinado com sulfato de sódio dextrana. O modelo foi utilizado para avaliar a eficácia de compostos da medicina tradicional chinesa na prevenção e tratamento do câncer colorretal.

Colorectal cancer (CRC) is a common malignancy of the digestive system and has become the third most common malignancy worldwide and the second leading ...

Este estudo foi sobre a prevenção e tratamento do câncer de coloproctite com a medicina tradicional chinesa. Nosso objetivo é estabelecer um modelo de camundongo para câncer de coloproctite e avaliar indicadores da medicina tradicional chinesa. Confirmamos que a medicina chinesa Liujunzi decocção é um tratamento eficaz para a prevenção do câncer de coloproctite.No futuro, trabalharemos para identificar biomarcadores mais sensíveis para câncer de cólon e reto e rastrear decocção de Liujunzi para alvos terapêuticos.

establishment-coloproctitis-cancer-model-mice-evaluation-therapeutic

Research

JoVE Journal

Medicine

Establishment of Coloproctitis Cancer Model in Mice and Evaluation of Therapeutic Effect of Chinese Medicine

607 visualizações.  Changchun University of Chinese Medicine. Este estudo foi sobre a prevenção e tratamento do câncer de coloproctite com a medicina tradicional chinesa. Nosso objetivo é estabelecer um modelo de camundongo para câncer de coloproctite e avaliar indicadores da medicina tradicional chinesa. Confirmamos que a medicina chinesa Liujunzi decocção é um tratamento eficaz para a prevenção do câncer de coloproctite.No futuro, trabalharemos para identificar biomarcadores mais sensíveis para câncer de cólon e reto e rastrear de...

Vídeo: Autor em destaque: Decocção de Liujunzi como tratamento tradicional chinês para câncer de coloproctite

Colorectal cancer (CRC) is a common malignancy of the digestive system and has become the third most common malignancy worldwide and the second leading cause of malignancy-related death. Ulcerative coloproctitis (UC) is a precancerous lesion, and UC-associated CRC (UC-CRC) is the most common subtype of CRC. Therefore, a reasonable UC-CRC model is the cornerstone and guarantee of new drug development. Traditional Chinese medicine (TCM) has been widely used in the treatment of UC-CRC due to its good efficacy. As a classic tonic prescription of TCM, Liujunzi decoction (LJZD) has been widely used in the treatment of UC-CRC. In this study, a UC-CRC model was established by combining azomethane and dextran sulfate sodium, and the LJZD was administered. The data confirmed that LJZD can effectively inhibit cancer transition in UC-CRC by using mouse body weight, colorectal length, pathological and inflammatory factors, colorectal barrier function, and cancer markers. This protocol provides a system for evaluating the efficacy of TCM in the prevention and treatment of UC-CRC.

This protocol provides a mouse model of ulcerative coloproctitis-associated colorectal cancer induced by azomethane combined with dextran sulfate sodium. The model was used to evaluate the efficacy of traditional Chinese medicine compounds in the prevention and treatment of colorectal cancer.

Medicina

Preparation of Liujunzi Decoction (LJZD) for the Treatment of Ulcerative Coloproctitis-Colorectal Cancer  (UC-CRC)

To begin place Dang Shen, Bai Zhu, into a specialized ceramic pot. Add 1000 milliliters of distilled water and let it soak at room temperature for one hour. Using a grinder, grind 12 grams of Fu ling into a fine powder.Then, soak the powdered Fu ling in 300 milliliters of distilled water in a separate container for one hour at room temperature. Mix the prepared Chinese herbal mixture in the specialized ceramic pot. Boil the mixture and maintain it over medium heat until the decoction volume reduces to 300 milliliters.Combine the filtrate obtained from the decoction and continue boiling until the volume reduces to 150 milliliters. Then centrifuge the concentrated liquid at 10, 000 G for five minutes. Concentrate the obtained supernatant to 30 milliliters over medium heat.Transfer the final concentrate to a dish and dry it using an electric drying oven until only the solute remains as a powder. Now, weigh the obtained powder, and dissolve it in sterile distilled water to create the daily dosage for mice. To prepare five amino salicylic acid, weigh 64 milligrams of five amino salicylic acid powder, and dissolve it in 200 milliliters of sterile distilled water.

Preparação de decocção de Liujunzi (LJZD) para o tratamento do câncer colorretal ulcerativo Coloproctite (UC-CRC)

Establishment of an Ulcerative Coloproctitis-Colorectal Cancer (UC-CRC) Model to Evaluate the Therapeutic Effect of Chinese Medicine

To begin, gently position the mouse with its belly up and the head slightly down. Grasp the back skin to secure the abdominal area and insert a one milliliter syringe needle, one centimeter to the right of the midline of the abdomen at the intersection of the line, connecting both thighs. Gradually insert the one milliliter syringe needle to a depth of three to five millimeters under the skin.Insert the needle approximately 0.3 to 0.5 millimeters into the abdominal cavity at a 45 degree angle. Once the needle tip passes through the abdominal muscle, notice a sudden decrease in resistance. Slowly inject 0.1 milliliters of the azoxymethane injection solution per 10 grams of body weight into the mice.Subsequently, retract the syringe gently. Then add 500 milliliters of sterile distilled water to 10 grams of DSS. To prepare a 2%DSS solution.Mix the solution with a vortex mixer and store at four degrees Celsius until use, administer the prepared LJZD and five amino salicylic acid solution daily at a consistent time via gastric gavage to the respective groups at week seven and week 15.

Estabelecimento de um Modelo de Câncer Colorretal Ulcerativo Coloproctite (CCU) para Avaliação do Efeito Terapêutico da Medicina Chinesa

Evaluation of an Ulcerative Coloproctitis-Colorectal Cancer (UC-CRC) Model and Efficacy of Liujunzi Decoction (LJZD)

To begin, establish the UC-CRC mouse model and administer the prepared LJZD and 5-ASA solution to the respective groups. After the drug treatment, monitor the weight of mice daily from the beginning of adaptive feeding until the end of drug treatment. Diligently observe and document the fecal consistency of each experimental mouse, categorizing it as normal, loose stools or watery diarrhea.Carefully document any fecal bleeding observed in the experimental animals, categorizing it into no bleeding, minimal bleeding, or visible blood in the stool. To separate the colorectal tissue, maintain the euthanized mice within a cryogenic anatomical environment. Secure the mice in a supine position.Using scissors, trim the lower abdominal hair and sterilize the area with ethanol. Using eyelid forceps, gently grasp the intersection point between the two thigh roots and the abdominal midline. Then use scissors to create a one to 1.5 centimeters long transverse incision.Perform a longitudinal incision along the median line of the abdomen, starting from the midpoint of the transverse incision to the xiphoid process. Carefully detach the peri-colorectal tissues in the direction towards the anus, separating the colorectum rom the surrounding tissue. Gently push aside the abdominal skin to fully expose the colorectum.Using eyelid forceps, extract the colorectum from the abdominal cavity and section it from the anus to the cecum. Preserve the collected colorectal tissues in saline at four degrees Celsius. The UC-CRC model group had a significant weight loss compared to the control group which was alleviated by LJZD treatment.LJZD treatment improved the disease activity index compared with the UC-CRC model group.