JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

פרוטוקול זה הוא עבור הביצועים של מעקף קיבה אחד-השקה (OAGB) על עכברים. המפעיל מבצע כיס קיבה צינורי מהודק וארוך ואחריו השקה מהחיים. עבור דגם זה, מתרבה המפעיל את אותו יחס בין biliopancreatic ואיברים נפוצה בבני אדם; לכן, האיבר biliopancreatic מודד 35 ס מ.

Abstract

המטרה של פרוטוקול זה היא להגדיר דגם פרה של ניתוח בריאטרי, ליתר דיוק, OAGB בחולדות מהשמנת יתר. בהתבסס על מודל זה פרה, מחקרי האורך יכול להתבצע כדי לספק הבנה משופרת של המנגנונים התוצאות ראיתי לאחר ניתוח בריאטרי בבני אדם. למטרה זו, חולדות מופעלים על דרך פתיחה של הבטן בהרדמה כללית עם איזופלוריין. ראשית, יוצר המנתח כיס קיבה צינורי וארוך: לאחר עיקול גדול hiatal לנתיחה, הקיבה nonglandular הידוק והוסרו. לאחר מכן, הקיבה הנותרים יהודק גם על מנת ליצור צינור קיבה ולהשמיט את antrum של הקיבה. לאחר מכן, המנתח מבצע gastrojejunostomy הקצה לצד אחד של 35 ס מ מן הזווית duodenojejunal. אורך איבר זה נבחר כדי לשחזר את אותו יחס בין האיבר biliopancreatic (BPL) לבין אורך איבר (CL) נפוצים כמו ניתוח בריאטרי אנושי. המבצע מסתיים על ידי סגירת מעגל aponeurotic, עורית. בניהול מוקדם לאחר הניתוח מורכב הידרציה תת עורית, זריקה תוך שרירית אנטיביוטי מניעתי, זריקה הקודקוד של כדי להרדים את הניהול של משככי כאבים, השבת בעלי חיים לטבע פרוגרסיבי של דיאטה.

Introduction

השמנת יתר חולנית היא נושא מרכזי בעולם המערבי, עם הגדלת שכיחות1. ניתוח בריאטרי נשאר הטיפול יעיל רק לטווח ארוך עבור השמנת יתר חולנית2, עם יתרונות ברורים על מחלות הקשורות להשמנת יתר רקע3. רו-en-Y קיבה לעקוף את השרידים (RYGB) את תקן זהב כפי שהוא אחד מההליכים העתיק ואחד ביותר שבוצעה ברחבי העולם עם המשך הארוך4. OAGB היא הליך עדכנית יותר תואר לראשונה בשנת 2001 על ידי ראטלג5. היא מתוארת כ חלופה יעילה RYGB6 , מספר יתרונות. נתונים מוקדמת עולה על יעילות דומה כדי RYGB במשקל, הרזולוציה של מחלות הקשורות להשמנת יתר רקע6,7. יתר על כן, נחסכים הסיכונים של היצרות או דליפה של ההשקה jejunojejunal ב RYGB, הסיכון בקע פנימי עשוי להיות נמוך יותר מאשר עם RYGB8.

המנגנונים הפיזיולוגיים במשקל לאחר ניתוח בריאטרי נותרו שנויים במחלוקת, ואפשר ללמוד בני9. מודלים בעלי חיים שימושיים להבין איך בריאטרי ניתוחים עשויים להשפיע על מטבוליזם הגלוקוז, שינויים נוירואנדוקריניים או מנגנוני השובע. חסרים נתונים השוואתיים בין הליכים, השפעות ארוכות טווח של ניתוחים אלה צריכים להיות יותר מובן10. זה בלתי אפשרי לחלוטין לתקנן מראש, לאחר הניתוח טיפול קליני, משביע רצון מעקב יכול להיות קשה להשיג: כמה מחקרים דוח אובדן-כדי-בצע-up מדרג גבוה כמו 30% בשנה הראשונה11.

הקונספט של מעקף קיבה הוא שילוב של הליך מגבילות, עקב יצירת כיס קיבה, ו מידה מתונה של תת ספיגה של, הנובע הכללת התריסריון, מעי צם הפרוקסימלית של המעבר במערכת העיכול. כיום, אורך איבר בניתוח בריאטרי הוא עדיין עניין של ויכוח12,13. הנתונים מראים שהשתנות גבוהה של נהלים והסכמה לא הגיעה עדיין על אורך האיבר אופטימלית עבור14,OAGB15. למרות זאת, מחברים רבים דיווחו באורך 200 ס מ BPL כמו תקן17,OAGB16,18. האורך הממוצע של המעי הדק הוא כ-700 ס מ19.

מספר מודלים מכרסם של RYGB פותחו ברחבי העולם20, עם וריאציות נהדר מבחינת גודל נרתיק, אורך איבר, ושמירה על העצב vagal. אבל סופרים מעטים דיווחו על מודל של OAGB ניסיוני; מסיבה זו, צוות theresearch פיתח מודל של OAGB בשיתוף עם מנתחים בריאטרי. הרציונל מאחורי התפתחות המודל היה לחקות מעקף קיבה התאמן אצל בני אדם. המודל משלב הקמת כיס קיבה עם הכללת את antrum וגוף של הקיבה. על זה, המנתח עושה צריבה של הקיבה nonglandular באמצעות מכשיר הידוק. לעומת בפרוטוקול הקודם20, הצוות החליט להוסיף לטיפול אנטיביוטי מניעתי לכל-פעיל כדי לצמצם את התחלואה מקושר אל ההשקה במערכת העיכול, כמו שגרת ניתוח האנושי21.

אורך האיבר עכבר להשתמש במודל זה נבחר כדי לשחזר את היחס בין BPL את המשחק הקלאסי נח בבני אדם. מדידות ראשוניות הראו את האורך הכולל של המעי הגס קטן בחולדות בין 90 ל-120 ס מ22. כתוצאה מכך, אורך BPL במחירים OAGB היה 35 ס מ. יתר על כן, המודל הזה הוא מעשית מבלי לבצע כל מצדו בכלי הדם, הימנעות כיס קיבה איסכמיה.

Protocol

כל השימוש בבעלי חיים תאמו הנחיות הקהילה האירופית, אושרה על ידי ועדת האתיקה המקומית (Comité d'éthique en expérimentation animale N ° 121) במשרד החינוך להשכלה גבוהה ואת המחקר (Ref #02285.03).

1. בעלי חיים ודיאטות

  1. חולדות
    1. השתמש חולדות Wistar זכר במשקל 260-320 g, החלה בדיאטה עתירת שומן (HFD) רוב בגיל 7 שבועות.
  2. דיאטה
    1. זירוז של השמנה דיאטה-induced, לפחות 12 שבועות לפני הניתוח של HFD. לתת החולדות גישה חופשית את HFD ומים.
      הערה: HFD מורכב מעבדה מטוהרים hypercaloric מכרסם דיאטה המכילה 45% שומן (ראה טבלה של חומרים).
    2. ודא כי החולדות הם שמנים בזמן הניתוח, עם משקל בין 600-800 גרם.

2. חומרים

  1. ציוד כירורגי
    1. אוטוקלב כל מכשירי ניתוח לפני הניתוח.
    2. לפרוס כל מכשירי הניתוח לצורך ההליך (ראו טבלה של חומרים).
    3. מבצע ההשקה תחת זכוכית מגדלת, באמצעות מכשירים המיקרוכירורגית קונבנציונאלי.
    4. ודא כי החולדות ממוקמות על הצלחת חימום בטמפרטורה של 37 ° C, מתחת למנורת חום. מקם את לוח חשמלי איזותרמי כנדרש.
  2. הכנה הרדמה של בעלי חיים
    1. עזים ומתנגד העכברוש עם שאיפה של 3% איזופלוריין vol באוויר עבור אינדוקציה של ההרדמה בתיבת מכרסמים.
    2. להעביר את החולדה לצלחת ההתחממות ולתחזק את ההרדמה עם facemask באותו קצב זרימה של 3%. ודא האסתטיזציה מלאה על ידי צובט את הזנב של החיה.
    3. לגלח את הפרווה הקדמי, המתאים לאזור החתך של פתיחת בטן, ס מ ~ 3-באזור רחב מצאתי את האגן בעלי חיים, באמצעות מכונת גילוח חשמלית.
    4. לגלח אזור ס מ ברוחב 3 בחלק האחורי של החיה, ממורכזת על הצוואר של החיה. שלב זה מקלה על הולכה כוח monopolar.
    5. תרסיס פתרון החיטוי מבוססי אלכוהול מעל האתר מבצע.

3. ניתוח

  1. פתיחת בטן
    1. החל מבוססי אלכוהול חיטוי מקומי על העור מגולח.
    2. פתח את הבטן עם קו האמצע עורית חתך של הסרעפת של כ 3 ס מ אורך עם אזמל. פתח את fascia הצפק לאורך לינאה אלבה עם איזמל monopolar.
    3. ודא כי חלל הצפק נפתח בלכל אורכה של החתך עורית.
      חושפים את חלל הצפק עם מפסק עצמית.
  2. עקומת רבתי, דיסקציה hiatal
    1. לנתח את עקומת קיבה גדולה יותר מצומת בין הקיבה הבלוטות ואת nonglandular בצד שמאל של הוושט בטן עם מספריים כירורגיים.
    2. בהדרגה מצב של קרישת חסר את כלי gastrosplenic עם האזמל monopolar, על מנת במלואו לשחרור העיקול קיבה הגדול שלו זווית. ואז לחשוף את האזור hiatal באמצעות חלוקתה של הרצועות דק.
    3. לנתח את הצד הימני של הוושט בטן, שימור של עורק הקיבה השמאלי של עצב vagal, שימוש בניתוח ידנית.
  3. כיס קיבה confection
    1. הקיבה nonglandular אבלציה
      1. החל מרכיב עיקרי 35 מ מ אקדח (ראה טבלה של חומרים) בצומת בין הקיבה הבלוטות ואת nonglandular בצד שמאל של צומת גסטרו. ודא כי הקיבה nonglandular בצד ימין של השדכן.
      2. לירות באקדח ולאחר מכן להסיר את הקיבה nonglandular resected.
    2. כיס קיבה
      1. החלת מהדק השני באמצעות התקן (TA) קולות נשימה טובים יותר (3-3.5 מ מ) (ראה טבלה של חומרים), במקביל הידוק הראשון, מצד ימין של צומת גסטרו כדי לא לכלול את antrum, וחלק בגוף הקיבה.
      2. ודא כי התוצאה של שני הקווים סיכות כיס קיבה כ 0.5 ס מ.
  4. OAGB
    1. המעי הגס קטן מדידה
      1. אתר הזווית duodenojejunal. מעי צם הפרוקסימלית הוא החלק המעי הגס קטן הממוקם תחת החלק המדיאלי של המעי הגס; . זה החלק רק nonmobile של המעי הגס קטן בחולדה.
      2. עם קלטת 5 ס מ באורך, באופן ידני למדוד 35 ס מ מן הזווית duodenojejunal. לאחר מכן לבצע את enterotomy punctiform בצד antimesenteric של מעי צם.
    2. Gastrojejunal השקה
      1. לבצע gastrotomy punctiform עם האזמל monopolar בצד עקומת רבתי של המשקה קיבה, בדיוק בין השניים הקודמים להדק שורות. אם כיס קיבה אינה לגמרי ריק, לבצע לחץ ידני עדין כיס קיבה לרוקן אותה.
      2. מבצע סוף לצד gastrojejunal לחיבור תעלות עם מלקחיים nontraumatic, בעל מחט קטנה.
      3. להתחיל את התפר עם שני תפרים הגפיים של 7-0 isotactic פוליפרופילן (ראה טבלה של חומרים), תפירת שתי קצוות gastrotomy עם הגפיים של enterotomy.
      4. לאחר מכן, עם החוטים באותו המשמש את התפרים שתי הגפיים, לבצע שני תפרים פועל בכל צד של ההשקה. אם יש צורך, חזור ההשקה כדי להקל את התמרון. ודא שאיכות והחיבור על-ידי הצבת קרוב תפרים, לפחות שבעה או שמונה בכל צד של ההשקה.
      5. לקחת 1 מ"מ ברוחב serosa כל תפר. הימנע לוקח רירית כל התפר כדי לקבור בעדינות את רירית המעית ועל קיבה פנימה התפר.
        הערה: התוצאה של זה היא השקה gastrojejunal terminolateral עם איבר biliopancreatic, משמאל, של /CL (אי אל) מסולקים בצד הימין. ודא כי ההשקה חדיר עם לחץ עדין על המשקה קיבה.
  5. סגירת מעגל טיפול מיידי
    1. לשטוף את חלל הצפק עם 0.9% NaCl פתרון והחלף ידנית על אברי הבטן לעמדות הפיזיולוגית שלהם.
    2. קרוב לקיר הבטן בתפר רץ אחד של קלוע תפר פוליאסטר 2-0 (ראה טבלה של חומרים) עם מחט-בעל קלאסית.
    3. סגור את העור עם תפר פועל אחד של polyglactin 910 4-0 (ראה טבלה של חומרים).
    4. לבצע שתי זריקות הקודקוד של לידוקאין 1% בכל צד של פתיחת בטן. מחלקים מנה הכוללת של 1 מ"ל/ק"ג של לידוקאין 1% לתוך aponeurosis שריר הבטן rectus.

4. לאחר הניתוח טיפול

  1. לבצע זריקה תוך שרירית של 20,000 יחידות/ק"ג. פניצילין G...
  2. לבצע זריקה תת עורית של 10 מ"ל אשלגן פתרון polyionic מול (2 g של אשלגן כלורי/L, 4 g של NaCl/L ו- 50 גר' גלוקוז/L). זו זריקה, זה ניתן לערבב עם משככי כאבים מתאימים כגון הבופרנורפין (0.1 מ"ג/ק"ג), meloxicam (2 מ ג/ק ג).
  3. מניחים את החולדות בכלובים בודדים להתחמם על ידי מנורה, עד שהם ער לגמרי.
  4. לעתים קרובות לבדוק את בעלי החיים על מנת לנהל טיפול לאחר הניתוח עם שיכוך כאבים מתאימים הידרציה (polyionic מול פתרון).
  5. להזריק כאבים מתאימים, הבופרנורפין (0.1 מ"ג/ק"ג), meloxicam (2 מ"ג/ק"ג), subcutaneously מן בטווח המיידי לאחר הניתוח נקודה עד יום 4, כל 12 שעות.
  6. שמור את החולדות עם גישה חופשית למים במהלך יום 1. ביום 2/3, אתן אותם חינם גישה לתזונה נוזלית. יום 4, נותן להם ad libitum גישה דיאטה רגילה.

תוצאות

פרוטוקול זה לשחזור, מחקה OAGB שנלמדה על בני אדם. הבטיחות של פרוטוקול זה נתמך עם נתונים שפורסמו23,,24 , עם שיעור תמותה נמוך בין 12% ל- 25%. מנתחים שונים צוות המחקר עם שיעור התמותה דומה תרגלו פרוטוקול זה.

למרות זאת, נית?...

Discussion

פרוטוקול זה יש את היתרון של מחקה OAGB התאמן באופן שגרתי אצל בני אדם. הפארמצבטית בחולדות ובטיחות שלו הוכחו קלינית וחילוף תוצאות.

ההשקה של פרוטוקול זה מהווה קושי טכני, השלב הקריטי הראשי. בשביל זה, יש צורך להשתמש בכלים המיקרוכירורגית ספציפיים, כגון בעל מחט למיקרו או זכוכית מגדלת. ...

Disclosures

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgements

המחברים רוצה להודות ז'אן פייר Marmuse שלו קבוע בעזרה ותמיכה; Voitellier אגלנטין, ז'אן-בפטיסט Cavin ו Houneyda Jindi El להגדרת הדגמים ואיורים; ז'ארי גונן שגב, Andreia Goncalves על עזרתם עם קטעי וידאו; שרה ג'יי Zaat עבור עריכת הטקסט באנגלית. מתיו א באמת לארה ריבירו-Parenti היו מקבלי חסויות של Fondation למזוג לה מצועצע médicale (עקרות), את האגודה פרנסז דה chirurgie (AFC).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
High-Fat Diet, 45 % fat Genestil, Royaucourt, FranceC 1090-45http://www.genestil.com/
Metzenbaum ScissorsWorld Precision instrument, Sarasota, US501739https://www.wpi-europe.com
Dumont TweezersWorld Precision instrument, Sarasota, US14098https://www.wpi-europe.com
Iris ForcepsWorld Precision instrument, Sarasota, US15915https://www.wpi-europe.com
Iris Scissors 10cmWorld Precision instrument, Sarasota, US14218https://www.wpi-europe.com
Needle HolderWorld Precision instrument, Sarasota, US14110https://www.wpi-europe.com
Alm Self Retaining RetractorWorld Precision instrument, Sarasota, US14240https://www.wpi-europe.com
Baby Mixter Hemostatic Forceps,  Right AngleWorld Precision instrument, Sarasota, US501240https://www.wpi-europe.com
Non woven sterile swabsLCH Medical Products, Paris, FranceSN40-0755www.lch-medical.com
Galilean Binocular Loupe 2.5xWorld Precision instrument, Sarasota, US504056https://www.wpi-europe.com
Digestive thread: Isotactic polypropylene, monofil Prolene 7-0 Ethicon, Issy les  Moulineaux, FranceEH7813Ewww.ethicon.com
Parietal thread : Coated Braided Polyester Ti-Cron 2-0Covidien, Mannsfield, MA, USA3003-52www.covidien.com
Cutaneous thread : Polyglactin, VICRYL RAPIDE 4-0 Ethicon, Issy les  Moulineaux, FranceVR3100www.ethicon.com
ETS-Flex 35- mm staple gunEthicon, Issy les  Moulineaux, FranceATS45www.ethicon.com
Proximate Reloadable StaplersEthicon, Issy les  Moulineaux, FranceXR30Vwww.ethicon.com
TA-DST 30mm-3.5mmEthicon, Issy les  Moulineaux, FranceTX30Bwww.ethicon.com
Alcoholic 5% BetadineMEDA Pharma, Merignac, France41085www.medapharma.fr
LIDOCAINE AGUETTANT 20 mg/mlLABORATOIRE AGUETTANT, Lyon, France3400940000000.0https://www.aguettant.fr
Penicillin G 5MUIPanpharma, Luitre, France3.40E+12https://www.panpharma.eu/fr
Bionolyte G5 ; Sodium chloride 0.4%, glucose 5%, potassium chloride 0.2%)Baxter, Maurepas, France
Liquid dietGenestil, Royaucourt, FranceC-0200Thttp://www.genestil.com/
Isoflurane 100%Centravet, Plancoet, FranceISO007http://cooperative.centravet.net

References

  1. Ogden, C. L., et al. Prevalence of overweight and obesity in the United States, 1999-2004. Journal of American Medical Association. 295, 1549-1555 (2006).
  2. Buchwald, H. Consensus Conference Panel. Consensus conference statement bariatric surgery for morbid obesity: health implications for patients, health professionals, and third-party payers. Surgery for Obesity and Related Disease. 1, 371-381 (2005).
  3. Mingrone, G., et al. Bariatric-metabolic surgery versus conventional medical treatment in obese patients with type 2 diabetes: 5 year follow-up of an open-label, single-centre, randomised controlled trial. Lancet. 386, 964-973 (2015).
  4. Nguyen, N. T., Varela, J. E. Bariatric surgery for obesity and metabolic disorders: state of the art. Nature Reviews. Gastroenterology & Hepatology. 14, 160-169 (2017).
  5. Rutledge, R. The mini-gastric bypass: experience with the first 1,274 cases. Obesity Surgery. 11, 276-280 (2001).
  6. Lee, W. J., et al. Laparoscopic Roux-en-Y vs. mini-gastric bypass for the treatment of morbid obesity: a 10-year experience. Obesity Surgery. 22, 1827-1834 (2012).
  7. Victorzon, M. Single-anastomosis gastric bypass: better, faster, and safer?. Scandinavia Journal of Surgery. 104, 48-53 (2015).
  8. Magouliotis, D. E., Tasiopoulou, V. S., Tzovaras, G. One anastomosis gastric bypass versus Roux-en-Y gastric bypass for morbid obesity: a meta-analysis. Clinical Obesity. 8, 159-169 (2018).
  9. Seyfried, F., le Roux, C. W., Bueter, M. Lessons learned from gastric bypass operations in rats. Obesity Facts. 4 Suppl 1, 3-12 (2011).
  10. Wang, F. G., Yu, Z. P., Yan, W. M., Yan, M., Song, M. M. Comparison of safety and effectiveness between laparoscopic mini-gastric bypass and laparoscopic sleeve gastrectomy: A meta-analysis and systematic review. Medicine (Baltimore). 96, e8924 (2017).
  11. Hong, J., Park, S., Menzo, E. L., Rosenthal, R. Midterm outcomes of laparoscopic sleeve gastrectomy as a stand-alone procedure in super-obese patients. Surgery for Obesity and Related Disease. 14 (3), 297-303 (2017).
  12. Abellan, I., et al. The influence of the percentage of the common limb in weight loss and nutritional alterations after laparoscopic gastric bypass. Surgery for Obesity Related Disease. 10, 829-833 (2014).
  13. Nora, M., Morais, T., Almeida, R., Guimarães, M., Monteiro, M. P. Should Roux-en-Y gastric bypass biliopancreatic limb length be tailored to achieve improved diabetes outcomes?. Medicine (Baltimore). 96, e8859 (2017).
  14. Madan, A. K., Harper, J. L., Tichansky, D. S. Techniques of laparoscopic gastric bypass: on-line survey of American Society for Bariatric Surgery practicing surgeons. Surgery for Obesity and Related Disease. 4, 166-173 (2008).
  15. Himpens, J. M., Vilallonga, R., Cadière, G. B., Leman, G. Metabolic consequences of the incorporation of a Roux limb in an omega loop (mini) gastric bypass: evaluation by a glucose tolerance test at mid-term follow-up. Surgical Endoscopy. 30, 2935-2945 (2016).
  16. Parmar, C. D., et al. Mini Gastric Bypass: first report of 125 consecutive cases from United Kingdom. Clinical Obesity. 6, 61-67 (2016).
  17. Chevallier, J. M., et al. One thousand single anastomosis (omega loop) gastric bypasses to treat morbid obesity in a 7-year period: outcomes show few complications and good efficacy. Obesity Surgery. 25, 951-958 (2015).
  18. Kular, K. S., Manchanda, N., Rutledge, R. A 6-year experience with 1,054 mini-gastric bypasses-first study from Indian subcontinent. Obesity Surgery. 24, 1430-1435 (2014).
  19. Tacchino, R. M. Bowel length: measurement, predictors, and impact on bariatric and metabolic surgery. Surgery for Obesity Related Disease. 11, 328-334 (2015).
  20. Bruinsma, B. G., Uygun, K., Yarmush, M. L., Saeidi, N. Surgical models of Roux-en-Y gastric bypass surgery and sleeve gastrectomy in rats and mice. Nature Protocols. 10, 495-507 (2015).
  21. Jeppsson, B., Mangell, P., Thorlacius, H. Use of probiotics as prophylaxis for postoperative infections. Nutrients. 3, 604-612 (2011).
  22. Cavin, J. B., et al. Differences in Alimentary Glucose Absorption and Intestinal Disposal of Blood Glucose After Roux-en-Y Gastric Bypass vs Sleeve Gastrectomy. Gastroenterology. 150, 454-464 (2016).
  23. Bruzzi, M., et al. Long-Term Evaluation of Biliary Reflux After Experimental One-Anastomosis Gastric Bypass in Rats. Obesity Surgery. 27, 1119-1122 (2017).
  24. Cavin, J. B., et al. Malabsorption and intestinal adaptation after one anastomosis gastric bypass compared with Roux-en-Y gastric bypass in rats. American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 311, G492-G500 (2016).
  25. Jacob, P. S., et al. Isocaloric intake of a high-fat diet promotes insulin resistance and inflammation in Wistar rats. Cell Biochemistry and Function. 31, 244-253 (2013).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

141

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved