쥐에서 한 문 합 위 우회 (OAGB)

요약

이 프로토콜은 쥐에 한 문 합 위 우회 (OAGB)의 성능입니다. 연산자는 길고 관 붙인 위 주머니 뒤에 손으로 수 놓은 문 합을 수행 합니다. 이 모델에 대 한 연산자 재현 biliopancreatic 인간;에 일반적인 다리 사이 동일한 비율 따라서, biliopancreatic 사지 35 cm를 측정 한다.

초록

이 프로토콜의 목표 bariatric 수술과, 더 구체적으로, 비만 쥐에서 OAGB의 전 임상 모델을 설정 하는 것입니다. 이 전 임상 모델을 바탕으로, 경도 연구 수 있습니다 실행 될 인간에서 bariatric 수술 후 본 결과 기본 메커니즘의 향상 된 이해를 제공 하. 이 위해 쥐 isoflurane와 일반적인 마 취하에 개복 술을 통해에 운영 한다. 첫째, 외과 의사는 길고 관 위 주머니 만듭니다: 큰 곡선 hiatal 해 부 후에, nonglandular 위 잘라 및 제거. 다음, 나머지 위 또한 위장의 동굴을 제외 하 고 위 관을 만들 위하여 알아 보. 그 후, 외과 의사 duodenojejunal 각도에서 단일 엔드-투-사이드 gastrojejunostomy 35 cm을 수행합니다. 이 다리 길이 biliopancreatic 사지 (BPL) 및 인간 bariatric 수술에서 일반적인 사지 (CL) 길이 사이 동일한 비율을 재생 하기 위하여 선정 되었습니다. 작업 aponeurotic 및 피부 폐쇄에 의해 종료 됩니다. 수 분을 피하, 근육 예방 항생제 주사, xylocaine, 진통제, 관리 및 다이어트의 진보적인 재 소개의 정수 리 주입 초기 수술 후 관리에 의하여 이루어져 있다.

서문

병 적인 비만 유행¹증가 함께 서방 세계에서 주요 건강 문제입니다. 비만 수술 대 한 병 적인 비만², 비만 관련 comorbidities³에 분명 혜택만 장기 효과적인 치료 남아 있습니다. Roux-en-Y 위장 우회 (RYGB) 남아 황금 표준으로 가장 오래 된 절차 중 하나를 대부분 수행 중 긴 후속⁴전세계. OAGB은 마리아⁵2001에서 처음 설명한 최근 절차 이다. 그것은 RYGB⁶ 효과적인 대 안으로 설명 하 고 몇 가지 장점을. 초기 데이터는 체중 감량과 비만 관련 comorbidities^6,7의 해상도 관하여 RYGB에 유사한 효능을 나타냅니다. 또한, 협 착 증의 위험 또는 RYGB에서 jejunojejunal 문 합의 누설은 피 한다, 그리고 내부 탈 장의 위험 RYGB⁸보다 낮을 수 있습니다.

Bariatric 수술 후 체중 감량을 기본 생리 적 메커니즘 논란이 남아 있고 인간⁹에서 공부 하기가 어려울 수 있습니다. 동물 모델은 어떻게 bariatric 수술을 이해 하는 데 유용 포도 당 대사, 신경 내 분 비 수정, 또는 물림 메커니즘에 영향을 미칠 수 있습니다. 절차 사이 비교 데이터는 부족 하 고 이러한 수술의 장기적인 효과 해야 더 나은 이해¹⁰. 완전히 사전 및 수술 후 임상 치료, 표준화 불가능 하 고 만족 스러운 후속 달성 하기 어려울 수 있습니다: 첫 번째 년¹¹에 대 한 30%로 높은 일부 연구 보고서 손실-에-따라-최대 속도.

위장의 개념은 위 주머니의 생성으로 인해 제한 절차의 조합과 십이지 장과 근 위 공장의 위장 통과에서 제외 목록에서 발생 하는 흡수 장애의 중간 정도. 현재, 다리 길이 bariatric 수술에서 여전히 토론^12,13의 문제 이다. 사용 가능한 데이터 표시 절차와 아무 일치의 높은 다양성 아직 OAGB^,1415에 대 한 최적의 다리 길이에 도달 했습니다. 그럼에도 불구 하 고, 많은 저자는 OAGB^16,,1718에 대 한 표준으로 길이가 200 cm BPL 보고 있다. 작은 창 자의 평균 길이 약 700 c m¹⁹입니다.

RYGB의 몇몇 설치류 모델 전세계²⁰, 주머니 크기, 다리 길이, 그리고 vagal 신경의 보존 측면에서 큰 변화 개발 되었습니다. 하지만 아주 소수의 작가 보고 실험 OAGB;의 모델 이런 이유로, theresearch 팀 bariatric 외과와 공동으로 OAGB의 모델 개발. 모델의 개발 뒤에 있는 근거 인 간에 있는 연습 위장을 모방 했다. 모델 위장의 몸과 동굴의 제외와 위 주머니의 건설을 포함합니다. 그것을 위해, 외과 의사 스테이플링 장치를 사용 하 여 nonglandular 위 절제를 만든다. 이전 프로토콜²⁰에 비해, 팀 당 수술 예방 항생제 치료는 사망률을 줄이기 위해 추가 하기로 위장 문 합에 인간의 수술²¹루틴으로 연결.

이 모델에 사용 되는 쥐 다리 길이 BPL 및 인 간에 있는 CL 사이의 비율을 재현 하도록 선택 했습니다. 예비 측정 90 및 120 cm²²사이 쥐에서 총 작은 창 자 길이 나타났습니다. 따라서, OAGB에 대 한 선택 하는 BPL의 길이 35 cm 이었다. 또한,이 모델은 위 주머니 허 혈을 피하고 어떤 혈관 결 찰 하지 않고 실행 합니다.

프로토콜

모든 동물 사용 유럽 공동체 지침을 준수 하 고 현지 윤리 위원회에 의해 승인 되었다 (위원회 회의 d'éthique en expérimentation animale N ° 121) 등 교육 및 연구 (Ref #02285.03).

1. 동물 및 다이어트

1. 쥐
   1. 사용 하 여 무게 260-320 g, 나이의 7 주에는 높은 지방 다이어트 (HFD)에 시작 하는 남성 Wistar 쥐.
2. 다이어트
   1. 유도 HFD의 적어도 12 수술 주 다이어트 유발 된 비만. 게 쥐 무료 물과는 HFD.
      참고:는 HFD 이루어져 45%를 포함 하는 순화 된 실험실 hypercaloric 설치류 다이어트 지방 ( 재료의 표참조).
   2. 600-800 g 사이의 무게로 수술 시 쥐 비만 인지 확인 합니다.

2입니다. 자료

1. 외과 장비
   1. 압력솥 수술 전에 모든 수술 기구.
   2. 절차에 필요한 모든 수술 기구 배치 ( 재료의 표참조).
   3. 전통과 microsurgical 악기를 사용 하 여 돋보기 안경에서 문 합을 수행 합니다.
   4. 쥐 온도 37 ° C의 고 열 램프 아래에서 지구 온난화 접시에 배치 됩니다 확인 하십시오. 필요에 따라 등온 전기 보드를 배치 합니다.
2. 마 취와 동물 준비
   1. 3% vol isoflurane 설치류 상자에 마 취의 유도 대 한 공기의 흡입으로 쥐 anesthetize
   2. 지구 온난화 접시에 쥐를 전송 하 고 동일한 흐름 율 3%에서 안 면으로 마 취를 유지. anesthetization 동물의 꼬리를 곤란 하 게 하 여 완전 한지 확인 합니다.
   3. 개복 술의 절 개 영역, 3 cm에 해당 앞쪽 모피를 면도-전기 면도기를 사용 하 여 동물 골반에 있는 칼에서 넓은 영역.
   4. 동물, 동물의 목에 중심의 뒷면에 3 cm 넓은 영역을 면도. 이 단계는 monopolar 파워 전도를 촉진 한다.
   5. 작업 사이트를 통해 알코올 살 균 제 솔루션 스프레이.

3입니다. 수술

1. 개복 술
   1. 알코올 기반 로컬 살 균 면도 피부에 적용 됩니다.
   2. 중간 피부 절 개를 칼 과정에서 메스와 길이에서 약 3 ㎝의 복 부를 엽니다. 따라 복 근 막 열고는 교육 알바 monopolar 메스와 함께.
   3. 복 막 구멍 피부 절 개의 전체 길이에 열리는지 확인 합니다.
      자동 견인을 가진 복 막 구멍을 노출 합니다.
2. 큰 커브와 hiatal 해 부
   1. 수술가 위로 복 부 식도의 왼쪽에 선 그리고 nonglandular 위 사이 교차점에서 큰 위 곡선을 해 부.
   2. 점진적으로 완벽 하 게는 그의 위대한 위 곡선을 해방 하기 위해 monopolar 메스와 gastrosplenic 배 응고 각도. 다음 얇은 인 대의 단면에 의해 hiatal 영역을 노출.
   3. 왼쪽된 위 동맥과 수동 것을 사용 하 여 vagal 신경 보존 복 부 식도 해 부.
3. 위 주머니 과자
   1. Nonglandular 위 절제
      1. 35 m m 고정 적용 위 식도 접합부의 왼쪽에 선 그리고 nonglandular 위 사이 교차점에 ( 재료의 표참조) 총. Nonglandular 위는 스테이플러의 오른쪽에 있는지 확인 합니다.
      2. 총을 발사 하 고 절제 nonglandular 위 제거.
   2. 위 주머니
      1. 두 번째 스 테 플 러 (3-3.5 m m) thoraco-복 부 (TA) 장치를 사용 하 여 적용 하는 첫 번째 스테이플링, 위 본문의 일부는 동굴을 제외 gastroesophageal 접속점의 오른쪽에 ( 재료의 표참조), 병렬.
      2. 두 주식 라인의 결과 위 주머니 약 0.5 c m 인지 확인 합니다.
4. OAGB
   1. 작은 창 자 측정
      1. Duodenojejunal 각도를 찾습니다. 근 위 공장 결;의 중간 부분 아래에 있는 작은 창 자 부분입니다. 그것은 비모바일 부분의 쥐에서 작은 창 자입니다.
      2. 5 cm 긴 테이프와 함께 수동으로 duodenojejunal 각도에서 35cm를 측정 합니다. 그런 다음 공장 antimesenteric에 punctiform enterotomy를 수행 합니다.
   2. Gastrojejunal 문 합
      1. 위 주머니의 큰 곡선에 monopolar 메스와 punctiform gastrotomy 수행, 이전의 두 사이 정확 하 게 라인 주식. 위 주머니 되지 않으면 완전히 빈, 빈을 위 주머니에 부드러운 수동 압력을 수행 합니다.
      2. Nontraumatic 집게와 작은 바늘 홀더는 엔드-투-사이드 gastrojejunal 문 합을 수행 합니다.
      3. 7-0 아이 소 택 틱 폴 리 프로필 렌의 2 개의 말단 바늘으로 봉합을 시작 ( 재료의 표참조)는 enterotomy의 사지와는 gastrotomy의 2 개의 말단 봉합.
      4. 다음,와 같은 사용 되는 스레드는 두 개의 말단 바늘,는 문 합의 각 측면에 두 실행 봉합을 수행 합니다. 필요한 경우 작전을 촉진 하기 위하여 문 합을 반환 합니다. 가까이 배치 하 여 문 합의 품질 바늘, 적어도 7 또는 8에서 문 합의 각 측에 확인 하십시오.
      5. 모든 스티치에서 1 m m 와이드 serosa를 가져가 라. 부드럽게 봉합 내부의 장 및 위 점 막 묻어 하려면 어떤 점 막 스티치에 복용 하지 마십시오.
         참고:이 결과 왼쪽에 biliopancreatic 다리와 오른쪽에 영양 (알) /CL terminolateral gastrojejunal 문 합. 문 합 위 주머니에 부드러운 압력으로 침투성 인지 확인 합니다.
5. 폐쇄 및 즉각적인 치료
   1. 0.9 %NaCl 용액으로 복 막 구멍을 씻어 하 고 수동으로 그들의 생리 적인 위치에 복 부 장기를 대체 합니다.
   2. 가까운 복 부 벽의 한 실행 봉합으로 꼰 폴리에스터 봉합 2-0 ( 재료의 표참조) 클래식 바늘 홀더.
   3. Polyglactin 910 4-0 ( 재료의 표참조)에의 한 실행 봉합으로 피부를 닫습니다.
   4. 개복 술의 각 측에 1 %lidocaine 두 정수 리 주사를 수행 합니다. 곧바로 복 부 근육 aponeurosis에 리도 카 인 1%의 1 mL/kg의 총계 복용량을 관리 합니다.

4. 수술 후 관리

1. 20000 단위/kg 페니실린 g.의 근육 주사 수행
2. Isotonic polyionic 솔루션 칼륨 (KCl/L의 2 세대, 4 g의 NaCl/L, 및 50 g 포도 당/l)의 10 mL의 피하 주사를 수행 합니다. 이 주입에 적합 한 진통제 buprenorphine (0.1 mg/kg) 등 meloxicam (2 mg/kg)과 혼합 가능 하다.
3. 그들은 완전히 깨어 때까지 램프에 의해 데워 개별 장에 쥐를 놓습니다.
4. 자주 관리 적당 한 진통 및 수 화 (isotonic polyionic 솔루션)와 수술 후 치료 하려면 동물을 검사 합니다.
5. 적합 한 진통제 주사, buprenorphine (0.1 mg/kg)과 피하에서 즉각적인 meloxicam (2 mg/kg), 수술 후 기간에 하루 4, 모든 12 h까지.
6. 1 일 동안 물에 자유 접근을 쥐를 유지. 하루에 2/3, 게 그들 액체 다이어트에 대 한 액세스를 무료. 4 일에 액세스할 그들 광고 libitum 정상적인 규정식에.

결과

이 프로토콜 재현할 수 이며 인 간에 연습 OAGB를 싫어 하지. 이 프로토콜의 안전 게시 된 데이터^23,24 12%와 25% 사이 낮은 사망률과 지원 됩니다. 유사한 사망률과 연구 팀에 다른 외과이 프로토콜을 연습 했습니다.

그럼에도 불구 하 고, 학습 설치류 수술은 복잡 한, 그리고 돋보기 안경...

토론

이 프로토콜 OAGB 인간에서 정기적으로 연습을 흉내 낸의 이점이 있다. 그것의 안전 및 쥐에 재현성 임상 및 신진 대사 결과에서 증명 되었습니다.

이 프로토콜에서 문 합 기술적인 어려움을 야기 하 고 주요 중요 한 단계입니다. 이 위해, 그것은 미세 바늘 홀더 돋보기 안경 등 특정 microsurgical 도구를 사용 하는 데 필요한입니다. 어떤 협 없이 연금술 문 합을 실현 하기 위해 그?...

자료

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Fat Diet, 45 % fat	Genestil, Royaucourt, France	C 1090-45	http://www.genestil.com/
Metzenbaum Scissors	World Precision instrument, Sarasota, US	501739	https://www.wpi-europe.com
Dumont Tweezers	World Precision instrument, Sarasota, US	14098	https://www.wpi-europe.com
Iris Forceps	World Precision instrument, Sarasota, US	15915	https://www.wpi-europe.com
Iris Scissors 10cm	World Precision instrument, Sarasota, US	14218	https://www.wpi-europe.com
Needle Holder	World Precision instrument, Sarasota, US	14110	https://www.wpi-europe.com
Alm Self Retaining Retractor	World Precision instrument, Sarasota, US	14240	https://www.wpi-europe.com
Baby Mixter Hemostatic Forceps,  Right Angle	World Precision instrument, Sarasota, US	501240	https://www.wpi-europe.com
Non woven sterile swabs	LCH Medical Products, Paris, France	SN40-0755	www.lch-medical.com
Galilean Binocular Loupe 2.5x	World Precision instrument, Sarasota, US	504056	https://www.wpi-europe.com
Digestive thread: Isotactic polypropylene, monofil Prolene 7-0	Ethicon, Issy les  Moulineaux, France	EH7813E	www.ethicon.com
Parietal thread : Coated Braided Polyester Ti-Cron 2-0	Covidien, Mannsfield, MA, USA	3003-52	www.covidien.com
Cutaneous thread : Polyglactin, VICRYL RAPIDE 4-0	Ethicon, Issy les  Moulineaux, France	VR3100	www.ethicon.com
ETS-Flex 35- mm staple gun	Ethicon, Issy les  Moulineaux, France	ATS45	www.ethicon.com
Proximate Reloadable Staplers	Ethicon, Issy les  Moulineaux, France	XR30V	www.ethicon.com
TA-DST 30mm-3.5mm	Ethicon, Issy les  Moulineaux, France	TX30B	www.ethicon.com
Alcoholic 5% Betadine	MEDA Pharma, Merignac, France	41085	www.medapharma.fr
LIDOCAINE AGUETTANT 20 mg/ml	LABORATOIRE AGUETTANT, Lyon, France	3400940000000.0	https://www.aguettant.fr
Penicillin G 5MUI	Panpharma, Luitre, France	3.40E+12	https://www.panpharma.eu/fr
Bionolyte G5 ; Sodium chloride 0.4%, glucose 5%, potassium chloride 0.2%)	Baxter, Maurepas, France
Liquid diet	Genestil, Royaucourt, France	C-0200T	http://www.genestil.com/
Isoflurane 100%	Centravet, Plancoet, France	ISO007	http://cooperative.centravet.net