החקירה של אינטראקציות צמח ברשתות Mycorrhizal נפוצות באמצעות ליבות מסובב

Summary

רוב הצמחים בתוך קהילות סביר מחוברים על ידי arbuscular mycorrhizal (AM) פטריות, אך גישור של אינטראקציות צמח על ידם נחקר בעיקר על ידי גידול צמחים עם לעומת ללא mycorrhizas. אנו מציגים שיטה לתמרן רשתות mycorrhizal נפוץ בין צמחים mycorrhizal לחקור את ההשלכות שלהם עבור אינטראקציות צמח.

Abstract

פטריות Arbuscular mycorrhizal (AM) להשפיע על ספיגת התזונתי מינרלים צמח וצמיחה, לפיכך, יש להם את הפוטנציאל להשפיע על אינטראקציות צמח. עוצמת השפעתם של תפטיר extraradical להתפשט מעבר המחסור התזונתי אזורי נמצא סמוך שורשים כדי בסופו של דבר חברור יחידים בתוך רשת mycorrhizal נפוצות (CMN). רוב הניסויים, עם זאת, חקרו את תפקידה של פטריות AM באינטראקציות הצמח על ידי גידול צמחים עם לעומת בלי פטריות mycorrhizal, שיטה שבה התייחסת לשאלה במפורש את התפקיד של CMNs. כאן, אנו מציעים שיטה שמפעילים את CMNs לחקור את התפקיד שלהם באינטראקציות הצמח. השיטה שלנו משתמש ששונה מכולות עם ישבנים חרוט עם רשת ניילון ו/או חומר הידרופובי מכסה פתחים המחורץ, דשן ¹⁵N וחול אינטרסטיציאליות מזין עלוב. CMNs נשארו גם ללא פגע בין יחידים אינטראקציה, שנותקה על ידי סיבוב של מכולות, או מנעו ויוצרים על ידי מחסום מוצק. הממצאים שלנו מראים כי סיבוב מכולות מספיקה לשבש CMNs ולמנוע והשפעותיהם על אינטראקציות צמח מעבר CMNs. הגישה שלנו היא יתרון כי היא מחקה היבטים של הטבע, כגון שתילים הקשה לתוך CMNs כבר הקים ושימוש חבילת פטריות AM מספקות יתרונות מגוונים. הניסוי שלנו אמנם מוגבל ל חוקר צמחים בשלב שתיל, אינטראקציות צמח מעבר CMNs ניתן להבחין בגישה שלנו אשר ולכן יכול להיות מיושם לחקור שאלות ביולוגי על תפקודו של CMNs של מערכות אקולוגיות.

Introduction

פטריות Arbuscular mycorrhizal (AM) סייע צמחים הקולוניזציה של קרקע 460 מיליון שנה¹ ועד היום, הם בכל מקום אנחנו חיים איתם בסמביוזה של רוב הצמחים², שסיפק להם חומרים מזינים מינרלים חיוניים לצמיחה. Hyphae דק, חוט כמו של פטריות AM לחפש חומרים מזינים מינרלים מעבר מאזורי המחסור התזונתי שורשים, לעתים קרובות נתקלים, להמדינות מערכות השורשים של השכנה צמחים "ברשת mycorrhizal משותף" (CMN). רשתות mycorrhizal נפוצים גם עלולה להיווצר כאשר הצירוף germlings פטרייתי הקים רשתות³, או כאשר אני hyphae נתיך (anastomose) עם conspecific hyphae^4,5,6,7. היקף אלה hyphae extraradical בקרקע הוא עצום, עם hyphae extraradical, המהווים 20% עד 30% של ביומסה מיקרוביאלית הכולל אדמה בערבה, מספוא קרקעות⁸ ואת המשתרעת על m·cm 111^-3 ב גראסלאנד ללא הפרעה⁹ .

רשתות mycorrhizal נפוצות למחיצות מזינים מינרלים בין מחוברים שכנות צמחים^10,11,12,13. צמחים עשוי לקבל עד 80% זרחן שלהם בשיעור של 25% מהדרישות שלהם חנקן מן ופטריות AM, תוך מתן עד 20% מכלל שלהם קבוע פחמן כדי הפטריות ב להחזיר¹⁴. שורש במבחנה איברים תרבות עבודה מצא כי CMNs מעדיפים להחליף חומרים מזינים מינרלי עם שורשים מארח המספקים פחמן רוב כדי פטריות^11,12. יתר על כן, מינים שונים של פטריות AM עשויים להיות שונים באיכות שלהם כשותפים סימביוטית, עם כמה פטריות החלפת יותר זרחן פחות פחמן יותר מאחרים¹⁵. למרות שורש איבר תרבויות מודלים מועיל לימוד סימביוזה AM מכיוון שהן מציגות בסביבות מבוקרות בקפידה ואת היכולת לצפות ישירות שהתחייב hyphal, הם אינם כוללים נצרי עובר פוטוסינטזה המשפיעים תהליכים פיזיולוגיים חשובים כגון פוטוסינתזה, דיות ושינויים תפקודים רבם נוספים, באותה מידה כמו קונסטיטוטיבי מזין פחמן ומינרל כיורים.

בטבע, שתילים סביר הקש לתוך CMNs כבר הוקמה. עד לאחרונה, עם זאת, מדענים רק בחנו את ההשפעה של פטריות AM על הזנת הצמח על ידי גידול צמחים עם או בלי פטריות AM, לעיתים קרובות עם זן אחד של פטריה AM. אמנם זה היה מאוד אינפורמטיבי להבנת arbuscular mycorrhizas, שיטה זו יש להתעלם את תפקיד שעשוי להיות קריטי CMNs שעשויה להיות באינטראקציה בין צמחים פונדקאים מחוברים. בפרט, צמחים הם תלויים במידה רבה AM פטריות לצמיחה אינטראקציה מינימלית ללא AM פטריות^16,17, אולי משתנה מתערב לפרשנות של AM פטריה בתיווך אינטראקציות כאשר הוא משמש "שולטת" על בסיס הפניה.

אנו מציעים גישה ליבות מסובב לחקירה התפקיד של CMNs בתוך אינטראקציות צמח ובהבנייתה האוכלוסייה. הגישה שלנו מחקה רכיבים של סימביוזה AM בטבע כי כל הצמחים הצירוף נוסדה ש-cmns, כל הצמחים גדלים עם פטריות AM. על-ידי הסרת הבסיס אינטראקציות, המתודולוגיה שלנו מתמקד במיוחד אינטראקציות מתווכת על ידי פטריות AM בזמן גם מעקב אחר תנועה מזין המינרלים בתוך CMNs. הגישה שלנו מתבסס על העבודות הקודמות ששימשה ליבות שסובבו הן בשדה והן בחממה להבין אני מתפקדת באופן מעשי.

שיטת הליבה שסובבו הוקם בספרות כשיטה לטיפול extraradical hyphae^18,19,20,21, עבר מספר גלגולים בהתאם למטרה. בעשרים השנים האחרונות. בתחילה, רשת שינוי שקיות או מחסומים ומאפשר בצמיחה של hyphae שימשו כדי לספק ללא שורש תאים כדי לכמת את כמות arbuscular hyphae mycorrhizal^22,אדמת²³. לאחר מכן, גלילי ליבות של אדמה בתוך צינורות מים נוקשה או פלסטיק צינורות עם חריצי מכוסה רשת ניילון נחדרת hyphae, אבל לא שורשים, פותחו. אלה יכול בקלות ניתן לסובב לשבש תפטיר extraradical^18,24,25. הליבות שסובבו הוצבו בין צמחים, אדמה אורכים hyphal לגרם של אדמת¹⁸, ¹³C פלקסים תפטיר extraradical²⁴, או ספיגת זרחן של ליבות ללא הצמח היו כימות¹⁸. שימוש אחר של ליבות כזה היה לגדל צמחים בתוך אותם בשדה כדי להפחית קולוניזציה של שורשים על ידי פטריות AM באמצעות שיבוש hyphal תכופים כחלופה עיקור או היישום של קוטלי פטריות, אשר שניהם יש השפעות עקיפות על קרקע אורגני עניין, חיידקים אחרים¹⁸.

הגישה מכשול רשת hyphal שימש לחקור למחיצות מזין ולשתול אינטראקציות על פני CMNs, אבל microcosms מלבני ולא עם ליבות מסובב. ולדר ואח²⁶ חקר אינטראקציות בין Linum usitatissimum (פלקס) bicolor דורה (סורגום) ע י איתור מזין מינרלים להחלפה פחמן באמצעות איזוטופים מעבר CMNs של כל אחד הפטריות AM Rhizophagus irregularis או Funneliformis mosseae²⁶. Microcosms בתאים צמחים שלהם המחקר כללה המופרדות על-ידי רשת מחסומים נגיש רק כדי mycorrhizal hyphae hyphal תאים, התאים hyphal שכותרתו שהכיל איזוטופים רדיואקטיביים ויציב. כפקדי, המחקר נעשה שימוש טיפולי ללא פטריות mycorrhizal. השיר et al.²⁷ להשתמש בגישה דומה כדי למצוא את הצמח הזה אותות יכולים להיות מועברים רק בין הוקמה CMNs של mosseae פ כאשר צמח אחד היה נגוע על ידי חיידקים ופטריות. בדומה לולדר ואח²⁶, Merrild et al.²⁸ גדל צמחים בתאים בודדים מופרדים באמצעות שיצבע לחקור צמח ביצועים של שתילים lycopersicum סולנום (עגבניות) מקושרת על-ידי CMNs גדול Cucumis sativus צמח (מלפפון) שייצג את מקור הפחמן בשפע. הם גם השתמשו טיפולים ללא פטריות mycorrhizal במקום ניתוק CMNs²⁸. בניסוי השני, קשורים, פחמן זרחן חילופי נבדקה באמצעות שקיות רשת המסומנת ³²עמ' Microcosms רשת hyphal מחסומים ו CMN ניתוק כטיפול היו בשימוש על ידי יאנוש ואח²⁹, אשר חקר תחרותי אינטראקציות בין שתילים של עץ אקליפטוס tetrodonta הסוואנה השתלות של העץ יער הגשם, Litsea דביקה. באותו מחקר, יאנוש ואח²⁹ הרים תאים המכילים שתילים כמה סנטימטרים, הזזה שכבות של רשת אחד נגד השני לשבור שהתחייב hyphal²⁹.

השלב האחרון בהתפתחות השיטה הליבה שסובבו היה לגדל צמחים בתוך ליבות הנמצאים במרחק^20,של סירים או microcosms-³⁰. Wyss³⁰ פעם ליבות מסובבות כדי לברר אם תפטיר AM extraradical יכול ליישב שתילים אורן elliottii בזמן הפצת התורם או מצמח פונדקאי 'אחות' AM, Tamarindus indica, תפטיר איך extraradical של ectomycorrhizal פטריות השפעות שתיל ביצועים. גורמים מכילים שתיל צינורי מסחרי גדול (טבלה של חומרים) microcosms או פלסטיק מוצק (אין CMNs) או מחוררת, מכוסה קרום הידרופובי. שתיל המחורץ מכולות היו גם לא מסובב (CMNs תקין) או מסובב לנתק את ליבות CMNs. מסובב הוקמה עם מחסום רשת שונים הגדלים שימשו Babikova et al.²⁰ לחקור הוחזק איתות באמצעות CMNs בין בקיה faba צמחים (שעועית). במחקר שלהם, צמח התורם המרכזי ב- 30 ס מ קוטר mesocosms היה בינהם שורשים ו- hyphae (אין מכשול) או רק באמצעות CMNs הוקמה דרך רשת 40 μm. צמחים המרכזי היו ושראשיהם אינטראקציות עם צמחים שכנות באמצעות סיבוב של הליבות אידנו רשת, או CMNs היו למניעה על ידי רשת 0.5 μm קנס תוחמת את הליבה.

כאן, אנו מציגים שיטה המשלבת היבטים של גישות מוקדמת ליבות לסובב כדי לבחון את השפעת CMNs על אינטראקציות צמח ישירה בשילוב עם עקיבה איזוטופ יציב. השיטה שלנו משתמשת בגישה 'היעד צמח', שבו המפעל המרכזי של עניין מוקף צמחים שכנים. צמחים גדלים במכלים שתיל rotatable מחוררת, מכוסה רשת משי צילומיים ניילון, ממברנות הידרופוביות, או פלסטיק מוצקים הלא-השתנה. רשתות mycorrhizal נפוצים הם ניתקה פעם בשבוע או שמרה תמים, איזוטופים יציבים ¹⁵N לעקוב אחר התנועה של חנקן מן ליבות השכנים שסובבו למפעל כיעד מרכזי. על ידי השוואת גודל צמח עם ספיגת מינרלים איזוטופ מזין ויציב, אנחנו להעריך אילו צמחים עשוי להפיק תועלת או סובלים CMNs של אינטראקציות בין צמחים פונדקאים.

Protocol

1. בנייה והרכבה של ליבות rotatable

1. לשנות מכולות מסחרי שתיל צינורי (המכונה "מיכלי"; טבלה של חומרים) יש 19 מ מ רוחב 48 ס"מ אורך פתחים.
   1. באמצעות מכבש-תרגיל עם חור 19 מ מ ראה ללא מקדחה טוויסט המרכזי, טייס, חותכים שני חורים, אחד מעל השני, בדפנות מיכל (קוטר 2.5 ס מ x 12.1 ס מ אורך) כך החורים הם במרחק של-1 ס מ אחד מהשני. להחזיק את המיכל נגד גדר על העיתונות קודח ויש עצירה עם פין קצר שייכנסו בתוך המיכל לעזור שיצמיד אותו למקום בזמן קידוח. השתמש מיכל מפלסטיק גמיש למניעת סדיקה.
   2. לחתוך את הפיסה האחרונה דק פלסטיק בין החורים עם מספריים, חוט קאטר או מספריי (עבור פלסטיק נוקשה להשתמש סייבר-המסור) לעשות אחד מאורך פתיחה בערך 2 ס מ ו 5 ס מ באורך.
   3. חזור על שלבים 1.1.1 – 1.1.2 בצד השני של המיכל.
2. מכסים את החריצים עם רשת ניילון ו/או ממברנות הידרופוביות (איור 1 א').
   1. חותכים רשת ניילון עם נקבוביות μm 40 לחתיכות 9.5 ס"מ 8.5 ס"מ. חותכים כמה חתיכות כמו ישנם מכולות.
   2. הדבק את רשת ניילון חיצונית על המכולות כדי לכסות את שני הפתחים עם חפיפה קלה הבד באמצעות דבק חם גבוהה-כוח, תעשייתי.
   3. אם מניעת תנועת המים יש צורך, כגון בעת שימוש ההזנה המומסים או איזוטופים יציבים, לכסות את שכבת רשת ניילון עם מסך ממברנות הידרופוביות^31,32 (טבלה של חומרים) המאפשר אני פטריה hyphae כדי מעבר, אבל רק את התנועה של אדי מים ומים לא נוזלי.
   4. הניחו דבק חם סביב הפתחים על המכולה ואת לאורך קצות ארוך רשת ניילון. לגלגל את המיכל אל הבד כדי למנוע שריפת אצבעות. הוסף שכבה של דבק לאורך הקצה בד שבו רשת השינוי בקצוות חפיפה. לחץ על הקצה על גבי קרטון לאטום אותו בחוזקה. תמיד לגלגל באופן עקבי בכיוון אחד זה יהיה באותו הכיוון של הרוטציה של המכולות סיים בתוך סירי או microcosms כך לא יהיה דחף לקצה רשת חופף פוטנציאל לחפור המצע.
   5. ברגע הדבק יש מקורר, להדביק את הקצוות העליונים והתחתונים של הבד לגורם כדי למנוע קצוות רופפים, העתקה באמצעות קלטת גמיש, כגון-טייפ במסקינג.
3. באמצעות הקלטת אותו כמו שלב 1.2.5, לכסות את חורים קטנים בצידי חרוט סוף (לא החור בקצה התחתון) לכל מכולה כדי למנוע צמיחה השורש מתוך המכולה לתוך שאר המיקרוקוסמוס/הסיר.
4. כדי למנוע אובדן קרקע תוך מתן ניקוז, במקום גולה זכוכית לתוך החלק התחתון של כל מיכל.
5. לשימוש טיפול בקרה שלא מצריכה אפשריות עבור CMN לטופס בין הצמחים, מכולות מוצק, שלא שונתה (איור 1 א').

2. הרכבה של סירים או microcosms כדי להתאים את הקצוות חרוט של המכולות

1. כדי להבטיח מכולות יזדקרו בעמדה קבועה יש ניקוז, להתהפך סיר כך התחתון פונה. לחתוך את החלק התחתון של הסיר, עוזב lip קטנים לקבלת תמיכה, באמצעות מסור סייבר.
2. הכנת פוליסטירן מוקצף
   1. חותכים פוליסטירן מוקצף, כ 36 מ מ עבה, עד לקוטר אותו כמו החלק התחתון של הסיר בעזרת חבל מאד, מסור ג'יג מעגל חיתוך.
   2. לקדוח חורים לתוך הקצף בעזרת חור העיתונות קודח ו- 19 מ מ ראה (ללא מקדחה טוויסט המרכזית) התבנית שבה במכולות ימוקמו.
   3. עבור ניסוי צמח היעד, לקדוח חור מרכזי עם חורים במרווחים באותה מידה השכנה יחידים המקיפים אותו. על סיר בקוטר 15.5 ס"מ, שטח 6 חורים בנפרד סביב היקף עיגול בקוטר 11 ס מ (איור 1B) 12 מ"מ.
   4. לפרוס את החורים hexagonally או במערך מרובע (איור 1C, D) עבור ניסוי המיקרוקוסמוס.

3. מילוי של מכולות, סירים עם תערובות אדמה וחול

1. בחר באפשרות תערובת אדמה הרצוי והוסף אני פטריות שדה-שנאסף או תרבותי סיר inoculum אל הקרקע על ידי ערבוב בצורה אחידה קצוץ חתיכות שורש (1-2 ס"מ) ביסודיות עם הקרקע. מערבבים האדמה הרצוי עם סיליקה עקרה חרוזים חול או זכוכית כדי להקטין את הריכוז של חומרים מזינים מינרליים זמין לצמחים.
2. מקם את המכולות מלא בתחתית קצף או מיקרוקוסמוס מסועף, למלא את החלל אינטרסטיציאליות המצע עקרה.
3. למלא את החלל interstitial בין מכולות עם תערובת חול סיליקה מסכן התזונתי באמצעות משפך לסייע במילוי חללים קטנים. כדי להבטיח ניקוז נאותה לחקות את המרקם של הקרקע, מערבבים בינונית בגודל החלקיקים חול, כגון ציון 6-20, עם חול גודל החלקיקים קטנים, כגון ציון 30-65, במערבל בטון.

4. הקמת CMNs ברחבי סירים/microcosms

1. לשתול צמחים pretreatment 'אחות' של המין הרצוי לתוך לכל מכולה לקיים AM פטריות, כך שהם יכולים להתפשט בין המכולות להקים CMNs.
2. כאשר כל הגורמים המכילים המשמשים הקמנו שתילים, להסיר יורה על ידי מסיכה כדי שאדם, רק אחד נשאר לכל מכולה.
3. אפשר 2-3 חודשים על צימוח והקמת CMN.

5. הקמת צמחים ניסיוני וטיפולים

1. לזרוע צמחים ניסיוני על ידי זריעה או משתילים לתוך מיכלים. אם זריעה, המתן עד מכולות כל שתיל מונבטים לפני הסרת צמחים אחות טיפול קדם מאת מסיכה נצרי שלהם. אם משתילים, קליפ כל קדם טיהור שפכים לפני משתילים ניסיוני השתילים כדי למנוע תופעות תחרותי לא מכוונות.
2. צור CMN טיפולים על-ידי או עוזב את המכולות לא עבר לתקופת הניסוי (ללא פגע CMNs) או סיבוב שלהם שבועי לנתק פיזית את hyphae הרחבת בין המכולות ששונתה (קטועה CMNs; איור 1 א'). בעת ניתוק CMNs, לסובב לכל מכולה באמצעות סיבוב שלם אחד כדי להימנע במתכוון לשנות אינטראקציות מעל פני הקרקע, במיוחד עבור צמחים heliotropic.
3. בכבדות מים כל אורח/ים ילד/סירים או microcosms מיד לאחר הסיבוב כדי לחדש. את הקשר בין המצע interstitial צדי מכולות.

6. מעקב אחר תנועת מזין מינרלים על-פני CMNs

1. לדשן צמחים שכנים עם 0.5% ¹⁵N מועשר יודע₃ ו- NH₄Cl.
2. לדשן הפרט היעד עם דשן ¹⁴N של ריכוז שווה.

7. ניטור ותחזוקה של הניסוי

1. באופן קבוע (ב פחות פעם בחודש) אקראי מחדש את העמדות של סירים או microcosms במהלך הניסוי.
2. מדי שבוע למדוד צמיחה, כמו גובה או הארוך ביותר העלה אורך (עבור עשבים) לעקוב כאשר הצמיחה מתחיל להאט, כי זה חשוב לקצור לפני הצמחים להיות לשורש מאוגד.

8. הקציר של הניסוי

1. קליפ כל רקמה מעל פני הקרקע, למקם צמחים בודדים מעטפות עם תוויות המזהות שלהם וטיפול, חשיש או מיקרוקוסמוס, מיקום.
2. רקמות מעל פני הקרקע יבש ב 60 מעלות צלזיוס על משקל קבוע. מודדים את משקל יבש של כל רקמת הצמח.
3. לאפשר לאדמה להתייבש לפני חילוץ המכולות קצירת השורשים.
4. מברשת בעדינות כמו אדמה הרבה ככל האפשר מתוך מערכות השורשים ולשטוף אותם במחבת מים או תחת זרם עדין של מים על גבי מסננת של גודל הנקבוביות 250 מיקרון.
5. לאפשר שורשים כדי מילה נהדרת ולשקול את כל המערכת שורש.
6. קליפ מערכת השורשים ועתיקים ולאחסן השברים שורש ב- 50% אתנול. לאחר שהם מוכתמים³³, להשתמש אלה קטעים על כימות של קולוניזציה השורש באמצעות את שיטת חיתוך קווי רשת³⁴.
7. לשקול מחדש את מערכת השורשים הנותרים ואחסן אותו בתוך מעטפה עם תוויות נייר יבש ב 60 מעלות צלזיוס להערכת משקל יבש. להשתמש במשוואה הבאה כדי לחשב את המשקל של כל מערכת השורשים:

9. מינרלים איזוטופ מזין ויציב ניתוחים

1. לקבץ את השתילים מאת ביומסה 'לעשירונים"או קבוצות 10,"octiles"או 8 קבוצות,"רביעונים"או ארבע קבוצות, וכו ' לאחר דרגה-הזמנת אותם לפי משקל אם הכמות רקמות נמוכה מדי עבור דרישות המינימום לעיכול לקבוע מזין מינרלי ריכוזים.
2. שלח בריסוס דגימות למעבדה מכווצים עבור ניתוחים איזוטופ מזין ויציב מינרלי (טבלה של חומרים).
   1. מתארים שפע איזוטרופי שימוש מקובל הביטוי הבא:
      
      כאשר R מייצג ה ¹⁵N /¹⁴N יחס של מדגם או של תקן אשר ש אטמוספרי
   2. שימוש ללא-שינוי, מיכל מוצק טיפול כדי לשמש פקד על רקע יחסי ¹⁵N במשוואה איזון המוני הבאים כאשר לכימות כמות ¹⁵N נלקח על ידי צמח היעד ב הכרות או טיפולים CMN שלם:
      
      איפה אלפא¹⁵N מייצג שפע איזוטרופי מטרות, שכנים, וצמחים המטרה בטיפול CMN אין ו- x מייצג (כשבר עשרוני) את החנקן אחוז מתקבל על ידי הצמח היעד מ מכולות השכן שאליו נוספה תווית. הערכים עבור אלפא¹⁵N_השכנים מתקבלים עבור השכנים ללא הפרדות הצבע של כל צמח היעד.

תוצאות

כדי לקבוע כיצד CMNs עשויים להשפיע צמח ביצועים באמצעות חלוקת מזון, גדלנו זקניים gerardii ויטמן, דשא ערבה דומיננטי, בניסוי צמח היעד עם השכנים המרווחות באופן שווה 6 ללא פגע, קטוע, או לא CMNs. מצאנו כי ניתוק או מניעת CMNs פחתה משקולות יעדים יבשה מעל פני הקרקע (איור 2), ?...

Discussion

התוצאות שלנו מאשרים כי שיטת הליבה המסובב שלנו יכול להתמקד בחדות התפקיד של CMNs באינטראקציות צמח הוחזק. ישנם מספר שלבים קריטיים בפרוטוקול, עם זאת, אם השתנה, יש פוטנציאל להשפיע על היכולת לזהות CMN אפקטים. . זה קריטי כדי למלא המכולות שמסביב לאזור interstitial מדיום מזין עלוב בניסוי המפעל שלנו לא מוצלח, ?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Commercial tubular seedlings container (called 'containers' in the manuscript)	Stuewe and Sons, Inc	Ray Leach Cone-tainer ™	RLC3U
Course glass beads	Industrial Supply, Inc.	12/20 sieve	Size #1
Course silica sand	Florida Silica Sand	6/20 50lb bags	None
Fine glass beads	Black Beauty	Black Beauty FINE Crushed Glass Abrasive (50 lbs)	BB-Glass-Fine
Hydrophobic membrane	Gore-tex	None	None
Large commercial tubular seedling containers	Stuewe and Sons, Inc.	Deepot ™	D16L
Medium silica sand	Florida Silica Sand	30/65 50 lb bags	None
Nylon mesh	Tube Lite Company, Inc.	Silk screen	LE7-380-34d PW YEL 60/62 SEFAR LE PECAP POLYESTER
Soil and foliar nutrient analysis facility	Kansas State University Soil Testing Lab	None	None
Stable isotope core facility	University of Miami	None	None