JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

פציעה צרובה חולפת (65 °C (65 °C (65 °C ( 65 °C ( 65 °C (65 ° C ± 0 .5 °C (0 °C (5 °F, 3 °F) של כף רגל אחורית אחת מקטין את הסף (ז) לגירוי חוט פון פריי של הצד ipsilateral ומשנה את דפוס ההליכה. חוץ מזה, פציעת כוויות גורמת להתנהגות דמוית דיכאון במבחן השחייה הכפוי.

Abstract

מים רותחים הם הגורם הנפוץ ביותר לפגיעה בכוויות הן באוכלוסיות קשישים והן באוכלוסיות צעירות. זהו אחד האתגרים הקליניים העיקריים בגלל התמותה הגבוהה וההמשך במדינות בעלות הכנסה נמוכה ובינונית. כוויות לעתים קרובות לגרום לכאב ספונטני אינטנסיבי אלודיניה מתמשכת, כמו גם בעיה מסכנת חיים. חשוב מכך, כאב מוגזם מלווה לעתים קרובות בדיכאון, אשר עשוי להפחית באופן משמעותי את איכות החיים. מאמר זה מראה כיצד לפתח מודל בעלי חיים לחקר כאב כתוצאה מכוויות והתנהגות דמוית דיכאון. לאחר הרדמה, פציעת כוויות נגרמה על ידי טבילת כף אחורית אחת של העכבר לתוך מים חמים (65 °C (65 °C (65 °F ± 0.5 °F) עבור 3 s. בדיקת פון פריי וניתוח ההליכה האוטומטי בוצעו כל יומיים לאחר פציעת כוויות. בנוסף, נבדקה התנהגות דמוית דיכאון באמצעות מבחן השחייה הכפוי, ובדיקת מוט הרוטציה בוצעה כדי להבדיל בין התפקוד המוטורי החריג לאחר פציעת כוויות. המטרה העיקרית של מחקר זה היא לתאר את הפיתוח של מודל בעלי חיים לחקר כאב שנגרם על ידי כוויות והתנהגות דמוית דיכאון בעכברים.

Introduction

נזק לרקמות, כגון כוויות וטראומה, קשור בדרך כלל עם התרחשות משותפת של כאב חריף. פציעות כוויות ותסמינים הקשורים לטראומה הם כ -1,80,000 מקרי מוות מדי שנה נגרמים על ידי כוויות - הרוב המכריע מתרחשים במדינות בעלות הכנסה נמוכה ובינונית מסוגים שונים של כוויות1. על פי דו"ח עולמי, כוויות שכיחות בילדים ומהוות כ-40%-60% מהחולים המאושפזים 2,3. פציעות ספציפיות אלה חמורות עוד יותר כפי שהן יכולות להתרחש בחיי היומיום, כגון מים רותחים או רחצה 4,5. למרות כאב חריף ניתן לפתור באופן ספונטני לאחר התאוששות מנזק לרקמות ברוב המקרים, ייתכן שניתן יהיה להיות כרוני עקב שינויים חריגים במערכת העצבים 6,7.

לאחרונה, הוצע כי כאב חריף יכול לגרום למצב רוח מדוכא, וכאב כרוני יכול לגרום חרדה ודיכאון 8,9,10,11. הדו-קיום של כאב ודיכאון מקשה על הטיפול בחולה. דיכאון גם נוטה להגביר את הרגישות לכאב, אשר עשוי לגרום לדיכאון אינטנסיבי יותר וכאב12. סיבוכים של כאב ודיכאון מוצגים במודלים של בעלי חיים של דלקת היקפית 13,14,15,16. המנגנונים המפורטים שבבסיס הדיכאון שנגרם מכאב אינם ידועים עד כה17. לכן, יש צורך לפתח טיפולים יעילים יותר עבור כוויות כדי להקל על תופעות הלוואי והתסמינים.

לפיכך, המחקר הנוכחי נועד לפתח מודל של בעלי חיים כדי לחקור כאב חריף שנגרם מפציעות כוויות והתנהגות דמוית דיכאון בעכברים. לשם כך נמדדו רגישות מוחשית חריגה הקשורה לפציעות כוויות, דפוס הליכה שונה והתנהגות דמוית דיכאון. בנוסף, מחקר זה מנסה לאמת את המודל באמצעות NSAIDs.

Protocol

כל הפרוטוקולים הניסיוניים נבדקו ואושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול בבעלי חיים ושימוש באוניברסיטה הלאומית צ'ונגנאם בדרום קוריאה, ולאחר מכן נערכו על סמך ההנחיות האתיות של האגודה הבינלאומית לחקר הכאב18.

1. אינדוקציה של פציעת כוויות צורבות על כף הרגל האחורית

  1. בית עכברי ICR זכר במשקל 20-25 גרם בחדר אור ומבוקר טמפרטורה (12/12 שעות מחזור כהה בהיר, 22°C (22 °C (5 °F) ± 2.5 °C (5 °F) עם לחות של 40%-60%.
    הערה: ניתן להשתמש בעכברים זכרים ונקבות עבור פרוטוקול זה.
  2. אפשרו לבעל החיים גישה חופשית למזון ומים, והתאקלמו לפחות שבוע לפני תחילת הניסוי.
    הערה: כל בעלי החיים שוכנו בקבוצה כדי לא לכלול משתנים כגון מתח בידוד.
  3. הקצה את העכברים באופן אקראי לקבוצת הניסוי או הבקרה וערוך ניסויים עיוורים באמצעות מספרי בעלי חיים כקודים.
  4. ביום של אינדוקציה לשרוף, להרדים את העכבר על ידי הזרקת intraperitoneal (i.p.) של 300 μL של אלפקסלון במינון של 100 מ"ג/ק"ג. ללבוש שמלה כירורגית, כפפות, ומסכה בעת ביצוע אינדוקציה כוויות.
  5. לאחר מרדים עמוקות את העכבר, לחטא סביב הכף האחורית הימנית עם 70% אתנול.
    הערה: בדוק את חוסר התגובה לגירוי צביטה להחיל על הבהונות האחוריות או הזנב כדי לאשר את מצב של הרדמה עמוקה.
  6. החל משחה עיניים על העיניים כדי למנוע ייבוש הקרנית לאחר אינדוקציה של הרדמה.
  7. טבול את הכף האחורית הימנית של העכבר מורדם עמוק במים חמים ב 65 °C (65 °F) ± 0.5 °C (5 °F) עבור 3 שניות. להטביע חותם על הקרסול של כל עכבר לפני טבילת כף היד האחורית במים חמים כדי לשמור על עקביות באזור השרוף.
  8. לאחר אינדוקציה של כוויות, להביא את העכברים בכלוב ביתי נקי ולהניח אותם על כרית חימום עד בעלי החיים להתאושש מהרדמה.
    הערה: חומר משכך כאבים, פרצטמול (200 מ"ג/ק"ג), היה מנוהל תוך-אפריטוני פעם ביום במשך 7 ימים החל מיום פציעת כוויות (רק לשרוף + קבוצת Acetaminophen). קבוצת הכוויות טופלה בתמיסת מלח כבקרה לרכב. הניסוי בוצע על פי השיטה המתוארת במחקר קודם4.

2. מדידת אלודיניה מכנית

  1. הביאו את העכברים לחדר הבדיקות ההתנהגותיות ותנו להם להתאקלם לפחות 30 דקות לפני הבדיקה. יש ללבוש שמלה כירורגית, כפפות ומסכה בעת ביצוע הבדיקה.
  2. מניחים את העכברים בתוך תיבה מרובעת (קוטר: 13 ס"מ, גובה: 12 ס"מ) על רצפת רשת מתכת (גודל רשת: 0.7 ס"מ x 0.7 ס"מ) ולתת להם להתאקלם לפחות 30 דקות.
  3. להעריך את הסף המכני של כף היד האחורית באמצעות שיטת הגירוי העולה19,20.
  4. בעדינות לתקוע סדרה של חוטי פון פריי עם מרווחי 5-8 s כדי לעורר את plantar האחורי. השג את הערכים הבסיסיים ביום שלפני אינדוקציה צריבה.
    הערה: 0.16-1.2 גרם חוטי פון פריי שימשו במבחן כדי למדוד את סף גמילה הכפות בכל בעלי החיים, בהתאמה. מבחן התגובה לגמילה מכפות הרגליים החל עם כוח הכיפוף הנמוך ביותר של חוט פון פריי (0.16 גרם בפרוטוקול זה). אם לא הייתה תגובה, אז חוט עם כוח הכיפוף הבא הופעל.
  5. בצע חמישה ניסויים כדי להעריך סף מכני עבור כל כף אחורית ipsilateral (פצועה).
    הערה: כוח הכיפוף של חוט פון פריי המייצר תגובה יותר משלוש פעמים מתוך חמשת הניסויים בכל בעל חיים התבטא סף נסיגת כפה (PWT, g). סף מכני נמדד יום לפני וב 1, 3, 5, ו 7 ימים לאחר פציעת כוויות. אפקט משכך כאבים הוערך 1 שעות לאחר מתן האצטומופן בחיה.

3. ניתוח הליכה אוטומטי

  1. התאקלם את העכברים במערכת ניתוח ההליכה פעם ביום במשך 10-15 דקות מ 5 ימים לפני פציעת הכוויה. יש ללבוש שמלה כירורגית, כפפות ומסכה בעת ביצוע ניתוח ההליכה.
  2. ביום הבחינה, להביא את העכברים לחדר הבדיקה ההתנהגותית ולהתאקלם לפחות 30 דקות לפני הבדיקה.
    הערה: בצע בדיקות התאקלמות וניתוח הליכה בסביבה חשוכה. הגדר את התנאים של תפריט התוכנית באופן הבא.
    1. לאחר הפעלת התוכנית, לחץ על תפריט צור ניסוי חדש כדי לייעד את התיקיה לשמירת הנתונים.
    2. לאחר הייעוד, הגדר את זמן הריצה המרבי ל- 5 s ואת וריאציות המהירות המרביות המותרות ל- 50%.
    3. בחר מצלמה רשומה והגדר את אורך המסלול ל- 30 ס"מ בכרטיסיה התקנה של התוכנית.
    4. בכרטיסיה רכישה של תפריט התוכנית, בחר פתח רכישה.
    5. בהתבסס על הודעות המצב, לחץ על לחצן הצמד רקע כדי לקבל תמונת רקע של שביל ריק.
  3. לחץ על לחצן התחל רכישה ולאחר מכן מקם את העכבר בכניסה לשביל החצייה השמאלי-ימינה. ההקלטה תתחיל באופן אוטומטי בעקבות התנועה החופשית של העכבר.
    הערה: אם ההליכה של החיה נרשמה בהצלחה וכל הצעדים זוהו, היא תסומן כ-Compliant Run עם סמל ירוק. אם התוכנה אינה מזהה צעדים כלשהם, מוצג סמל אדום, ובמקרה זה מומלץ לבצע את ההקלטה שוב. המחברים ממליצים לאסוף ולנתח לפחות חמש ריצות תואמות מוצלחות המבוצעות במהירויות ריצה דומות.
  4. בכרטיסיה רכישה של תפריט התוכנית, בחר סיווג הפעלות.
    הערה: לאחר בחירת הנתונים שהושגו מהתאימות המוצלחת למעלה, עבור אל מסך ניתוח הווידאו שבו נרשמו דפוסי ההליכה של העכברים.
  5. בחר את הריצה שיש לנתח ולחץ על לחצן סיווג אוטומטי .
  6. לאחר ביצוע סיווג אוטומטי, הסר אף, זיהוי איברי מין וזיהוי שגוי של כפות רגליים לנתוני זבל בכל ריצה ולאחר מכן נתח את הנתונים.
    הערה: כל הפרמטרים הסטטיסטיים מנותחים ונשמרים באופן אוטומטי בתוכנית, וניתן למצוא ערכי נתונים גולמיים בתפריט הניתוח של הנסיין. ניתוח הליכה אוטומטי בוצע לפני וב 1, 3, 5, ו 7 ימים לאחר פציעת כוויות. ההערכה בוצעה 30 דקות לאחר ניהול פרצטמול בקבוצת Burn + Acetaminophen ו 30 דקות לאחר טיפול מלוחים בקבוצת כוויות. ניסוי זה בוצע על פי השיטה המתוארת במחקרים הקודמים 4,21,22.

4. מדידה של התנהגות דמוית דיכאון

הערה: התנהגות מבוססת ייאוש, זמן חוסר תנועה במים נמדד על ידי מבחן השחייה הכפוי.

  1. הביאו את העכברים לחדר הבדיקות ההתנהגותי והתאקלמו לפחות 30 דקות לפני הבדיקה. יש ללבוש שמלה כירורגית, כפפות ומסכה בעת ביצוע מבחן השחייה הכפוי.
  2. שים את העכבר לתוך גליל זכוכית פלסטית ברורה (10 ס"מ x 25 ס"מ) המכיל 15 ס"מ של מים (25 °C (25 °C (25 °C (25 °C (25 °C (25 °C (25 °C (25 °C (25 °C (25 °C ± 0.5 °C (0.5 °F) במשך 15 דקות.
  3. לאחר 24 שעות, לשים את העכבר לתוך הגליל של אותם תנאים ולמדוד את זמן חוסר התנועה.
    הערה: זמן חוסר תנועה נמדד במשך 5 דקות של זמן בדיקה, והזמן בכל פעם שעכברים הפסיקו לטפס או לשחות ופשוט צף כדי לשמור על ראשם מעל פני המים נרשם. מבחן השחייה הכפוי בוצע ביום השביעי לאחר פציעת הכוויות. ההערכה בוצעה 1 שעות לאחר ניהול פרצטמול בקבוצת Burn + Acetaminophen, ו 1 שעות לאחר טיפול מלוחים בקבוצת כוויות. הניסוי בוצע על פי השיטה המתוארת במחקרים קודמים23,24.

5. מדידה של תפקוד מוטורי רגיל

הערה: בדיקת מוט הרוטציה בוצעה כדי להבדיל בין התפקוד המוטורי החריג לאחר פציעת כוויות.

  1. הביאו את העכברים לחדר הבדיקות ההתנהגותי והתאקלמו לפחות 30 דקות לפני הבדיקה. יש ללבוש שמלה כירורגית, כפפות ומסכה בעת ביצוע מבחן השחייה הכפוי.
  2. מניחים את החיות על פלטפורמה גלילית מתגלגלת (רוחב 5.7 ס"מ; קוטר 3 ס"מ) תלוי 16 ס"מ מעל החלק התחתון של המנגנון.
  3. אפשר לכל בעל חיים להתאמן פעם ביום על מוט רוטציה לפחות 5 ימים לפני אינדוקציה של פגיעת כוויות.
  4. בצע את בדיקת מוט הרוטציה כל 20 דקות במשך 2 שעות לאחר מתן התרופה. הגדר את זמן הניתוק ל -2 דקות.
  5. מדוד את משך הזמן שהעכבר פועל על מוט מסתובב במהירות קבועה של 15 סיבובים לדקה מבלי ליפול.
    הערה: בדיקת מוט הרוטציה בוצעה 7 ימים לאחר אינדוקציה של פציעת כוויות. ההערכה בוצעה מיד לאחר ניהול פרצטמול בקבוצת Burn + Acetaminophen ולאחר טיפול מלוחים בקבוצת Burn. Alfaxalone שימשה שליטה חיובית עבור תרופות שטופלו באופן ניסיוני בבדיקה זו. במהלך מבחן הרוטרוד, נמדד משך הזמן שבו העכבר פועל על המוט המסתובב מבלי ליפול. הניסוי בוצע על פי השיטה המתוארת במחקרים קודמים22,25.

תוצאות

על מנת למזער את סבלם של בעלי החיים ולהפחית את מספר בעלי החיים המשמשים לפי הנחיות שלושת הר' (החלפה, צמצום ועידון), מחקר זה תוכנן עם המספר המינימלי של בעלי חיים לאיסוף נתונים משמעותיים שנקבעו באמצעות ניסוי ראשוני. במחקר זה, ניסויים התנהגותיים נערכו באופן עצמאי פעמיים כדלקמן. ניתוח ההליכה, אלו?...

Discussion

הכווייה הלוהטת היא סוג של כווייה תרמית הנגרמת על ידי נוזלים מחוממים. זה כבר הציע כי כוויות מדרגה ראשונה או שנייה להתרחש ברוב המקרים, אבל מגע ארוך טווח עם מקורות חום יכול לגרום לכוויות מדרגה שלישית26. במחקר הנוכחי, פציעת כוויות נגרמה על ידי חשיפת הכף האחורית הימנית של עכברים לתו?...

Disclosures

למחברים אין מה לחשוף.

Acknowledgements

מחקר זה נתמך על ידי האוניברסיטה הלאומית צ'ונגנאם ומענק קרן המחקר הלאומית של קוריאה (NRF) במימון ממשלת קוריאה (NRF-2019R1A6A301093963 ו- NRF-2021R1F1A1062509).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
1 mL syringeBD307809
1.5 mL tubeAxygenMCT-150-C
50 mL tubeSPL50050
Acetaminophen BioXtra, ≥99.0%Sigma-AldrichA7085-100GThis analgesic agent is used as a positive control.
Alfaxan multidose (Alfaxalone)JUROX Pty.LimitedIn this experiment, this material was used for animal anesthesia, and was used as a positive control for experimentally treated drugs in the rota-rod test.
CatWalk automated gait analysis systemNoldusCatWalk XTGait analysis in freely walking rodents is used to study the changes in limb movement and positioning in models with sensory-motor dysfunction
OPTISHIELD (Cyclosporin ophthalmic ointment)Ashish Life ScienceThis material was used for an ointment to prevent corneal drying after induction of anesthesia.
Plexiglass cylinderSCITECH KOREAcustom made productsUsed in forced swimming test
Rota-rod systemSCITECH KOREAAccelerating rota rodUsed in the measurement of Normal Motor Function
von Frey filamentsNorth Coast MedicalNC12775Used in the measurement of Mechanical Allodynia
WaterbathCHANGSHIN SCIENCEC-WBEUsed in the burn injury induction

References

  1. Peck, M. D. Epidemiology of burns throughout the World. Part II: intentional burns in adults. Burns. 38 (5), 630-637 (2012).
  2. Tracy, L. M., Cleland, H. Pain assessment following burn injury in Australia and New Zealand: Variation in practice and its association on in-hospital outcomes. Australasian Emergency Care. 24 (1), 73-79 (2021).
  3. Montgomery, R. K. Pain management in burn injury. Critical Care Nursing Clinics of North America. 16 (1), 39-49 (2004).
  4. Kang, D. W., Choi, J. G. Bee venom reduces burn-induced pain via the suppression of peripheral and central substance P expression in mice. Journal of Veterinary Science. 22 (1), 9 (2021).
  5. Abdi, S., Zhou, Y. Management of pain after burn injury. Current Opinion in Anaesthesiology. 15 (5), 563-567 (2002).
  6. Ullrich, P. M., Askay, S. W. Pain, depression, and physical functioning following burn injury. Rehabilitation Psychology. 54 (2), 211-216 (2009).
  7. Patwa, S., Benson, C. A. Spinal cord motor neuron plasticity accompanies second-degree burn injury and chronic pain. Physiological Reports. 7 (23), 14288 (2019).
  8. Michaelides, A., Zis, P. Depression, anxiety and acute pain: links and management challenges. Postgraduate Medicine. 131 (7), 438-444 (2019).
  9. Doan, L., Manders, T., Wang, J. Neuroplasticity underlying the comorbidity of pain and depression. Neural Plasticity. 2015, 504691 (2015).
  10. Vachon-Presseau, E., Centeno, M. V. The emotional brain as a predictor and amplifier of chronic pain. Journal of Dental Research. 95 (6), 605-612 (2016).
  11. Apkarian, A. V., Baliki, M. N. Predicting transition to chronic pain. Current Opinion in Neurology. 26 (4), 360-367 (2013).
  12. Yin, W., Mei, L. A Central amygdala-ventrolateral periaqueductal gray matter pathway for pain in a mouse model of depression-like behavior. Anesthesiology. 132 (5), 1175-1196 (2020).
  13. Deng, Y. T., Zhao, M. G., Xu, T. J. Gentiopicroside abrogates lipopolysaccharide-induced depressive-like behavior in mice through tryptophan-degrading pathway. Metabolic Brain Disease. 33 (5), 1413-1420 (2018).
  14. Zhang, G. F., Wang, J. Acute single dose of ketamine relieves mechanical allodynia and consequent depression-like behaviors in a rat model. Neuroscience Letters. 631, 7-12 (2016).
  15. Edwards, R. R., Smith, M. T. Symptoms of depression and anxiety as unique predictors of pain-related outcomes following burn injury. Annals of Behavioral Medicine. 34 (3), 313-322 (2007).
  16. Pincus, T., Vlaeyen, J. W. Cognitive-behavioral therapy and psychosocial factors in low back pain: directions for the future. Spine. 27 (5), 133-138 (2002).
  17. Laumet, G., Edralin, J. D. CD3(+) T cells are critical for the resolution of comorbid inflammatory pain and depression-like behavior. Neurobiology of Pain. 7, 100043 (2020).
  18. Zimmermann, M. Ethical guidelines for investigations of experimental pain in conscious animals. Pain. 16 (2), 109-110 (1983).
  19. Deuis, J. R., Dvorakova, L. S. Methods used to evaluate pain behaviors in rodents. Frontiers in Molecular Neuroscience. 10, 284 (2017).
  20. Scholz, J., Broom, D. C. Blocking caspase activity prevents transsynaptic neuronal apoptosis and the loss of inhibition in lamina II of the dorsal horn after peripheral nerve injury. The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 25 (32), 7317-7323 (2005).
  21. Kang, D. W., Choi, J. G. Automated gait analysis in mice with chronic constriction injury. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (128), e56402 (2017).
  22. Kang, D. W., Moon, J. Y. Antinociceptive profile of levo-tetrahydropalmatine in acute and chronic pain mice models: Role of spinal sigma-1 receptor. Scientific Reports. 6, 37850 (2016).
  23. Huang, W., Chen, Z. Piperine potentiates the antidepressant-like effect of trans-resveratrol: involvement of monoaminergic system. Metabolic Brain Disease. 28 (4), 585-595 (2013).
  24. Can, A., Dao, D. T. The mouse forced swim test. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (59), e3638 (2012).
  25. Choi, J. G., Kang, S. Y. Antinociceptive effect of Cyperi rhizoma and Corydalis tuber extracts on neuropathic pain in rats. Korean Journal of Physiology & Pharmacology. 16 (6), 387-392 (2012).
  26. Mosby's. . Mosby's Dictionary of Medicine, Nursing & Health Professions - Seventh edition, Nursing Standard. 20 (22), 36 (2006).
  27. Vandeputte, C., Taymans, J. M. Automated quantitative gait analysis in animal models of movement disorders. BMC Neuroscience. 11, 92 (2010).
  28. Isvoranu, G., Manole, E. Gait analysis using animal models of peripheral nerve and spinal cord injuries. Biomedicines. 9 (8), 1050 (2021).
  29. Yankelevitch-Yahav, R., Franko, M. The forced swim test as a model of depressive-like behavior. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (97), e52587 (2015).
  30. Yan, H. C., Cao, X. Behavioral animal models of depression. Neuroscience Bulletin. 26 (4), 327-337 (2010).
  31. Papp, M., Willner, P. An animal model of anhedonia: attenuation of sucrose consumption and place preference conditioning by chronic unpredictable mild stress. Psychopharmacology. 104 (2), 255-259 (1991).
  32. Seminowicz, D. A., Laferriere, A. L. MRI structural brain changes associated with sensory and emotional function in a rat model of long-term neuropathic pain. Neuroimage. 47 (3), 1007-1014 (2009).
  33. Yalcin, I., Barthas, F. Emotional consequences of neuropathic pain: insight from preclinical studies. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 47, 154-164 (2014).
  34. Choi, J. W., Kang, S. Y. Analgesic effect of electroacupuncture on paclitaxel-induced neuropathic pain via spinal opioidergic and adrenergic mechanisms in mice. American Journal of Chinese Medicine. 43 (1), 57-70 (2015).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

175

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved