A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • תוצאות
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

במאמר זה אנו מתארים פרוטוקול סטנדרטי לכימות הרפלקס האופטוקינטי. הוא משלב גירוי תוף וירטואלי ווידאו-אוקולוגרפיה, ובכך מאפשר הערכה מדויקת של סלקטיביות התכונה של ההתנהגות והפלסטיות האדפטיבית שלה.

Abstract

הרפלקס האופטוקינטי (OKR) הוא תנועת עיניים מולדת חיונית המופעלת על ידי התנועה הגלובלית של הסביבה החזותית ומשמשת לייצוב תמונות רשתית. בשל חשיבותו וחוסנו, ה-OKR שימש לחקר למידה חזותית-מוטורית ולהערכת תפקודי הראייה של עכברים בעלי רקע גנטי שונה, גילאים שונים וטיפולים תרופתיים. כאן, אנו מציגים הליך להערכת תגובות OKR של עכברים קבועים ראש עם דיוק גבוה. קיבוע ראש יכול לשלול את תרומת הגירוי הווסטיבולרי על תנועות העיניים, מה שמאפשר למדוד תנועות עיניים המופעלות רק על ידי תנועה חזותית. ה-OKR מופעל על ידי מערכת תופים וירטואלית, שבה סורג אנכי המוצג על שלושה צגי מחשב נסחף אופקית באופן תנודתי או חד-כיווני במהירות קבועה. באמצעות מערכת מציאות מדומה זו, אנו יכולים לשנות באופן שיטתי פרמטרים חזותיים כמו תדר מרחבי, תדר טמפורלי/תנודה, ניגודיות, בהיקות וכיוון הגרגים, ולכמת עקומות כוונון של סלקטיביות תכונות חזותיות. וידאו-אוקוקולוגרפיה אינפרא אדום במהירות גבוהה מבטיחה מדידה מדויקת של מסלול תנועות העיניים. עיניהם של עכברים בודדים מכוילים כדי לספק הזדמנויות להשוות את ה-OKR בין בעלי חיים בגילאים, מינים שונים ומרקעים גנטיים שונים. כוחה הכמותי של טכניקה זו מאפשר לה לזהות שינויים ב- OKR כאשר התנהגות זו מסתגלת באופן פלסטי עקב הזדקנות, חוויה חושית או למידה מוטורית; לפיכך, היא הופכת טכניקה זו לתוספת רבת ערך לרפרטואר הכלים המשמשים לחקר הפלסטיות של התנהגויות עיניות.

Introduction

בתגובה לגירויים חזותיים בסביבה, העיניים שלנו נעות כדי להסיט את מבטנו, לייצב תמונות רשתית, לעקוב אחר מטרות נעות, או ליישר את הגומות של שתי עיניים עם מטרות הממוקמות במרחקים שונים מהצופה, שהן חיוניות לראייה תקינה 1,2. התנהגויות אוקולומוטוריות שימשו באופן נרחב כמודלים אטרקטיביים של אינטגרציה סנסומוטורית להבנת המעגלים העצביים בבריאות ובחולי, לפחות חלקית בגלל הפשטות של המערכת האוקולומוטורית3. נשלטת על ידי שלושה זוגות של שרירים חוץ-עיניים, העין מסתובבת בשקע בעיקר סביב שלושה צירים תואמים: הגבהה ודיכאון לאורך הציר הרוחבי, חטיפה וחטיפה לאורך הציר האנכי, וחדירה ושחול לאורך הציר הקדמי

Protocol

כל ההליכים הניסיוניים שבוצעו במחקר זה אושרו על ידי הוועדה המקומית לטיפול בבעלי חיים של מדעי הביולוגיה, בהתאם להנחיות שנקבעו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים באוניברסיטת טורונטו והמועצה הקנדית לטיפול בבעלי חיים.

1. השתלת מוט ראש על גבי הגולגולת

הערה: כדי למנוע את התרומה של התנהגות VOR לתנועות העיניים, ראש העכבר משותק במהלך מבחן OKR. לכן, מוט ראש מושתל בניתוח על גבי הגולגולת.

  1. מרדימים עכבר (נקבה בת 2-5 חודשים וזכר C57BL/6) על ידי תערובת של 4% איזופלורן (v/v) ו-O2 בתא גזים. מעבירים את העכבר לפלטפורמת ניתוח מותאמת אישית ומפחיתים את ריכוז האיזופלורן ל-1.5%-2%. עקוב אחר עומק ההרדמה ע....

תוצאות

עם ההליך המפורט לעיל, הערכנו את התלות של OKR במספר תכונות חזותיות. העקבות לדוגמה המוצגות כאן נגזרו באמצעות קודי הניתוח שסופקו בקובץ קידוד משלים 1, ואת קובץ העקבות הגולמי לדוגמה ניתן למצוא בקובץ קידוד משלים 2. כאשר סורג התוף נסחף במסלול סינוסואידלי (0.4 הרץ), עינו של בעל החיים ?.......

Discussion

השיטה של הבדיקה ההתנהגותית OKR המוצגת כאן מספקת מספר יתרונות. ראשית, גירוי חזותי שנוצר על ידי מחשב פותר את הבעיות המהותיות של תופים פיזיים. בהתמודדות עם הבעיה שתופים פיזיים אינם תומכים בבחינה שיטתית של תדר, כיוון או כוונון ניגודיות מרחבית8, התוף הווירטואלי מאפשר לשנות פרמטרים ח.......

Disclosures

המחברים מצהירים כי אין אינטרסים מתחרים.

Acknowledgements

אנו מודים ליינגטיאן הא על שיתוף נתוני כוונון הכיוון. עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהקרן הקנדית לחדשנות וקרן המחקר של אונטריו (פרויקט CFI/ORF מס' 37597), NSERC (RGPIN-2019-06479), CIHR (Project Grant 437007) ופרסי Connaught New Research.

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
2D translational stageThorlabsXYT1
Acrylic resinLang DentalB1356For fixing headplate on skull and protecting skull
BupivacaineSTERIMAXST-BX223Bupivacaine Injection BP 0.5%. Local anesthesia
CarprofenRIMADYL8507-14-1Analgesia
Compressed airDust-Off
Eye ointmentAlconSystaneFor maintaining moisture of eyes
Graphic cardNVIDIAGeforce GTX 1650 or Quadro P620.For generating single screen among three monitors
Heating padKent ScientificHTP-1500For maintaining body temperature
High-speed infrared (IR) cameraTeledyne DalsaG3-GM12-M0640For recording eye rotation
IR LEDDigikeyPDI-E803-NDFor CR reference and the illumination of the eye
IR mirrorEdmund optics64-471For reflecting image of eye
IsofluraneFRESENIUS KABICP0406V2
LabviewNational instrumentsversion 2014eye tracking
Lactated ringerBAXTERJB2324Water and energy supply
Lidocaine and epinephrine mixDentsply Sirona82215-1XYLOCAINE. Local anesthesia
Luminance MeterKonica MinoltaLS-150for calibration of monitors
MatlabMathWorksversion xxxanalysis of eye movements
Meyhoefer CuretteWorld Precision Instruments501773For scraping skull and removing fascia
Microscope calibration slideAmscopeMR095to measure the magnification of video-oculography
MonitorsAcer B247WVisual stimulation
Neutral density filterLee filters299to generate scotopic visual stimulation
Nigh vision goggleAlpha opticsAO-3277for scotopic OKR
PhotodiodeDigikeyTSL254-R-LF-NDto synchronize visual stimulation and video-oculography
Pilocarpine hydrochlorideSigma-AldrichP6503
PostThorlabsTR1.5
Post holderThorlabsPH1
PsychoPyopen source softwareversion xxxvisual stimulation toolkit
ScissorRWDS12003-09For skin removal
SuperglueKrazy GlueType: All purpose. For adhering headplate on the skull

References

  1. Gerhard, D. Neuroscience. 5th Edition. Yale Journal of Biology and Medicine. , (2013).
  2. Distler, C., Hoffmann, K. P. . The Oxford Handbook of Eye Movement. , 65-83 (2011).
  3. Sereno, A. B., Bolding, M. S.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved