המחברים מודים כריסטיאן Pahrmann (Lab Manager).

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זכר Balb / C עכברים (8-12 שבועות) נרכשים מבית מעבדות צ&#39;רלס ריבר (Sulzfeld, גרמניה). העכברים הם שוכנו בתנאים רגילים, נמאס מזון רגיל עכברים כרצונך מים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Isofluran 2% משמש הרדמה. </li></ol> תורמים הכנה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את שיער הבטן לחטא את האזור באמצעות betaisodona. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת נוף מיקרוסקופי, לבצע חתך צוואר הרחם קו האמצע מהרמה של הגרון אל עצם החזה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסרת שומן תת עורי ושרירי הרצועה כדי לקבל תצוגה ברורה של קנה הנשימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מנתחים את קנה הנשימה מכל הרקמות הסובבות, כמו הוושט, עצבים, עורקים, ורקמות החיבור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל קנה הנשימה (מתוך הגרון אל הסתעפות). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פלאש ההשתלה עם מי מלח קרים בחנות שתל ב 4 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> התורם הוא מורדמים על ידי נקע בצוואר הרחם לאחר הקציר של קנה הנשימה. </li></ol> נמען: השתלת HETEROTOPIC <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את השיער בטן בהפרש גדול סביב האתר חתך ולחטא את האזור שלוש פעמים באמצעות betaisodona (בבטאדין) ואחריו אלכוהול. עיניים צריכים להיות משומנים עם מוצר משחה עיניים כדי למנוע את קרניות מהתייבשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצע laparotomy החציוני והמקום המעי לתוך כפפה, סטרילי moistured. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מורחים את omentum יותר בזהירות. מניחים את השתל לתוך המרכז לקבע אותו עם תפר יחיד באמצעות 8-0 (Prolene, Ethicon, גרמניה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לכסות באופן מלא את ההשתלה עם omentum יותר לתקן את השתל עם תפר אחד 8-0 (Prolene, Ethicon, גרמניה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקמו מחדש את המעיים בחזרה לתוך הבטן מיושר עם מלוחים, חמימים סטרילי לפני הסגר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקריב ב 2 שכבות - דופן הבטן ואת שכבת העור עם דפוס מתמשך באמצעות 7-0 Prolene עבור השריר ואת 7-0 Vicryl לעור. </li></ol> נמען: השתלת orthotopic <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את השיער בטן בהפרש גדול סביב האתר חתך ולחטא את האזור שלוש פעמים באמצעות betaisodona (בבטאדין) ואחריו אלכוהול. עיניים צריכים להיות משומנים עם מוצר משחה עיניים כדי למנוע את קרניות מהתייבשות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלקים את רצועת שרירים כדי להמחיש את מורכבות laryngotracheal כולו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לנתח את קנה הנשימה של הרקמות הסובבות, לדאוג לשמר את העצבים חוזרות בגרון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מחלקים את קנה הנשימה שלוש טבעות הזנב בין cricoid. חיה שומרת הנשימה הפיזיולוגי באמצעות צינורית הנשימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ודא נקי קצוות קנה הנשימה של הנמען, כמו גם השתל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתל הוא התערב בין הפגמים הנמען קנה הנשימה ואת חוקיים כדי לשמור על קוטביות אנטומיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שימוש 8-0 (Prolene, Ethicon, גרמניה) anastomose את השתל מתורם עם דיסטלי (mediastinal) קנה הנשימה. ההיבט האחורי של השקה מתבצע באופן רציף ריצה. ההיבט הקדמי הושלם ולאחר מכן באמצעות תפרים קטע. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את כל הפרשות דרכי הנשימה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השקה הפרוקסימלי הושלמה אז באותו אופן כמו אחד דיסטלי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להבטיח שלמות של דרכי האוויר והנשימה נאותה, ספונטנית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקמו מחדש את השרירים רצועת ולסגור את הרקמה התת עורית ועל שכבת העור באמצעות 6-0 תפרים (Vicryl, Ethicon, גרמניה) עם דפוס מתמשך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתמש הרדמה זריקה של הנמען, ולכן החיה ישמרו הנשימה הפיזיולוגית דרך קנה הנשימה. שילוב של 75/1/0.2 מ&quot;ג / ק&quot;ג של propofol, medetomidine ו פנטניל, בהתאמה, משמש הרדמה ip בעכברים. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig1.jpg" alt="איור 1" /> איור 1: תורמים קנה הנשימה. 1A: תורמים קנה הנשימה באתרו לאחר הכנה. 1B: קנה הנשימה התורם נכרת. 1C: תורמים קנה הנשימה לאחר explantation. <img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig2.jpg" alt="איור 2" /> איור 2: דגם Heterotopic. 2A: השתל ממוקם במרכז של omentum יותר. 2B: שתל קבוע בשני הקצוות עם תפר אחד. 2C: שתל הוא עטוף לתוך omentum יותר קבוע עם תפר אחד. <img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig3.jpg" alt="איור 3" /> איור 3: דגם orthotopic. 3A: שתל הוא התערב בין הפגמים הנמען קנה הנשימה לבין הקיר האחורי הוא anastomosed באופן ריצה רציפה. 3B: הקיר הקדמי הושלם באמצעות תפר אחד. <img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig4.jpg" alt="איור 4" /> איור 4: היסטולוגיה. 4A: ששוחזרו קנה הנשימה להשתיל heterotopic לאחר 28 ימים + H E staining (15x). שים לב הכחדה luminal 100%. 4B: ששוחזרו קנה הנשימה להשתיל orthotopic לאחר 60 ימים של H + E מכתים (15x). מקסימלי הכחדה luminal השיגה כ 45%. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td></td><td> Heterotopic השתלת קנה הנשימה דגם </td><td> Orthotopic השתלת קנה הנשימה דגם </td></tr><tr><td> יתרונות </td><td> + קל לבצע + הכחדה לומינל עם חסימה בדרכי האוויר מלא לאחר 28 ימים + אין חיבה פיזית של בעלי חיים על ידי OAD </td><td> + אוורור פיזי של השתל + והתרופות בשאיפה אפשרי + התגובות החיסוניות חזקות כגון ייצור נוגדנים IgM alloreactive + המילייה החזי פיזיולוגיים + קנה הנשימה קנה הנשימה, השקה מחקה את ההגדרה הקלינית </td></tr><tr><td> חסרונות </td><td> - אין אוורור של קנה הנשימה להשתיל - אין הערכה של פתוגנים בשאיפה אפשרי - עיכוב של פינוי mucociliary וההפרשות שמר - Microenvironment פריטוניאלית במקום המילייה החזי </td><td> - הכשרה כירורגית הכרחי - הכחדה לומינל המונה חסימה luminal. 45% לאחר 60 ימים - בעלי חיים עלולים לפתח תסמינים של OAD </td></tr></tbody></table> טבלה 1: יתרונות וחסרונות של השתלת קנה הנשימה Heterotopic ו orthotopic.

<ol>
	<li>Adams, B., Berry, G., Huang, X., Shorthouse, R., Brazelton, T., Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunosuppressive+therapies+for+the+prevention+and+treatment+of+obliterative+airway+disease+in+heterotopic+rat+trachea+allografts.">Immunosuppressive therapies for the prevention and treatment of obliterative airway disease in heterotopic rat trachea allografts.</a> Transplantation. 69, 2260-2266 .</li><li>Adams, B., Brazelton, T., Berry, G., Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+respiratory+epithelium+in+a+rat+model+of+obliterative+airway+disease.">The role of respiratory epithelium in a rat model of obliterative airway disease.</a> Transplantation. 69, 661-665 .</li><li>Deuse, T., Schrepfer, S., Reichenspurner, H., Hoyt, G., Fischbein, M., Robbins, R., Pelletier, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+experimental+heterotopic+and+orthotopic+tracheal+transplantations+&amp;#x2013;+when+to+use+which+model;+Transplant+Immunology+17.">Techniques for experimental heterotopic and orthotopic tracheal transplantations &amp;#x2013; when to use which model; Transplant Immunology 17.</a> , 255-261 (2007).</li><li>Hele, D., Yacoub, M., Belvisi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+heterotopic+tracheal+allograft+as+an+animal+model+of+obliterative+bronchiolitis.">The heterotopic tracheal allograft as an animal model of obliterative bronchiolitis.</a> Respiratory Research. 2, 169-183 .</li><li>Hertz, M., Jessurun, J., King, M., Savic, S., Murray, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproduction+of+the+obliterative+bronchiolitis+lesion+after+heterotopic+transplantation+of+mouse+airways.">Reproduction of the obliterative bronchiolitis lesion after heterotopic transplantation of mouse airways.</a> American Journal of Pathology. 142, (1993).</li><li>McDyer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+and+murine+obliterative+bronchiolitis+in+transplant.">Human and murine obliterative bronchiolitis in transplant.</a> Proceedings of the American Thoracic Society. 4, 37-43 .</li><li>Schrepfer, S., Deuse, T., Hoyt, G., Sheikh, A., Hoffmann, J., Reichenspurner, H., Robbins, R., Pelletier, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+orthotopic+tracheal+transplantation:+the+stanford+technique.">Experimental orthotopic tracheal transplantation: the stanford technique.</a> Microsurgery. 27, 187-189 (2007).</li></ol>

סוניה Schrepfer קיבל מענק מחקר של דויטשה Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992/3-1).] כל החיות קיבלו טיפול אנושי מתיישב עם עקרונות של טיפול בבעלי חיים מעבדה, ניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות והתקנות שנקבעו על ידי האגודה הלאומית למחקר רפואי המדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה שפורסם על ידי המכונים הלאומיים לבריאות (National Institutes of Health פרסום 85-23, מתוקנת 1985). כל החיות התקבלו צ&#39;ארלס ריבר מעבדות (Sulzfeld, גרמניה) נשמרו על מרכזים בעלי חיים של החולים האוניברסיטאי בהמבורג Eppendorf. החיות קיבלו תקן ושולחת כרצונך מים המודעה.

עכברים זמינים transgeneic שונים מודל בנוקאאוט, ומתאים אפוא ללמוד מכניסטית שאלות הקשורות OAD (4). שני הדגמים של השתלת קנה הנשימה המוצג בסרטון זה יכול לשמש כמודל אמין לחקר התפתחות OAD. עם זאת, מודל זה מדגים את יתרונות ומגבלות. השת?...

heterotopic and orthotopic tracheal transplantation in mice used as models to study the development of  obliterative airway disease

סותם דרכי הנשימה מחלות (OAD) היא הסיבוך העיקרי לאחר השתלות ריאות שמגבילה ההישרדות לטווח ארוך (1-7). כדי לחקור את פתופיזיולוגיה, טיפול ומניעה של מודלים שונים של בעלי חיים OAD השתלת קנה הנשימה במכרסמים פותחו (1-7). כאן, אנו משתמשים בשני דגמים הוקמה של השתלת קנה הנשימה, את המודל heterotopic ו orthotopic ולהפגין יתרונות ומגבלות. עבור המודל heterotopic, התורם הוא עטוף לתוך קנה הנשימה omentum גדולה יותר של הנמען, ואילו התורם קנה הנשימה הוא anastomosed ידי השקה end-to-end במודל orthotopic. בשני המודלים, התפתחות נגעים סותם היסטולוגית דומה OAD קליניים הוכח (1-7). וידאו זה מראה כיצד לבצע את שניהם, heterotopic כמו גם את הטכניקה orthotopic השתלת קנה הנשימה אצל עכברים, ומשווה את מהלך הזמן של התפתחות OAD בשני מודלים באמצעות היסטולוגיה.

Watch this Scientific Journal Video about Heterotopic and Orthotopic Tracheal Transplantation in Mice used as Models to Study the Development of  Obliterative Airway Disease at JoVE.com

Heterotopic and Orthotopic Tracheal Transplantation in Mice used as Models to Study the Development of  Obliterative Airway Disease

וידאו זה מציג ומשווה שני דגמים ניסיוניים ללמוד על התפתחות המחלה בדרכי הנשימה סותם (OAD) בעכברים, במודל heterotopic ו orthotopic השתלת קנה הנשימה.

השתלת קנה הנשימה Heterotopic ו orthotopic ב עכברים משמשים מודלים לחקר התפתחות המחלה Airway סותם

Obliterative airway disease (OAD) is the major complication after lung transplantations that limits long term survival (1-7).
To study the ...

heterotopic-orthotopic-tracheal-transplantation-mice-used-as-models

Research

JoVE Journal

Biology

13.8K Views.  University Heart Center Hamburg. וידאו זה מציג ומשווה שני דגמים ניסיוניים ללמוד על התפתחות המחלה בדרכי הנשימה סותם (OAD) בעכברים, במודל heterotopic ו orthotopic השתלת קנה הנשימה.

Video: Heterotopic and Orthotopic Tracheal Transplantation in Mice used as Models to Study the Development of  Obliterative Airway Disease

Testing Visual Sensitivity to the Speed and Direction of Motion in Lizards

Testing visual sensitivity in any species provides basic information regarding behaviour, evolution, and ecology. However, testing specific features of the visual system provide more empirical evidence for functional applications. Investigation into the sensory system provides information about the sensory capacity, learning and memory ability, and establishes known baseline behaviour in which to gauge deviations (Burghardt, 1977). However, unlike mammalian or avian systems, testing for learning and memory in a reptile species is difficult. Furthermore, using an operant paradigm as a psychophysical measure of sensory ability is likewise as difficult. Historically, reptilian species have responded poorly to conditioning trials because of issues related to motivation, physiology, metabolism, and basic biological characteristics. Here, I demonstrate an operant paradigm used a novel model lizard species, the Jacky dragon (Amphibolurus muricatus) and describe how to test peripheral sensitivity to salient speed and motion characteristics. This method uses an innovative approach to assessing learning and sensory capacity in lizards. I employ the use of random-dot kinematograms (RDKs) to measure sensitivity to speed, and manipulate the level of signal strength by changing the proportion of dots moving in a coherent direction. RDKs do not represent a biologically meaningful stimulus, engages the visual system, and is a classic psychophysical tool used to measure sensitivity in humans and other animals. Here, RDKs are displayed to lizards using three video playback systems. Lizards are to select the direction (left or right) in which they perceive dots to be moving. Selection of the appropriate direction is reinforced by biologically important prey stimuli, simulated by computer-animated invertebrates.

Testing visual sensitivity in lizards using an operant conditioning paradigm that employs video playback of random-dot kinematograms and computer-generated invertebrates.

בדיקת רגישות חזותית על מהירות ועל כיוון התנועה של לטאות

Testing visual sensitivity in any species provides basic information regarding behaviour, evolution, and ecology. However, testing specific features of ...

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and standardized not only for the study of allo-rejection but also between syngeneic strains for examining mechanisms of ischemia-reperfusion injury after lung transplantation. Although the application of the rat and other large animal model 2 contributed significantly to the elucidation of these studies, the scope of those investigations is limited by the scarcity of knockout and transgenic rats. Due to no effective therapies for obliterative bronchiolitis, the leading cause of death in lung transplant patients, there has been an intensive search for pre-clinical models that replicate obliterative bronchiolitis. The tracheal allograft model is the most widely used and may reproduce some of the histopathologic features of obliterative bronchiolitis 3. However, the lack of an intact vasculature with no connection to the recipient's conducting airways, and incomplete pathologic features of obliterative bronchiolitis limit the utility of this model 4. Unlike transplantation of other solid organs, vascularized mouse lung transplants have only recently been reported by Okazaki and colleagues for the first time in 2007 5. Applying the basic principles of the rat lung transplant, our lab initiated the obliterative bronchiolitis model using minor histoincompatible antigen murine orthotopic single-left lung transplants which allows the further study of obliterative bronchiolitis immunopathogenesis6.

Obliterative bronchiolitis is the key impediment to the long-term survival of lung transplant recipients and the lack of a robust preclinical model precludes examining obliterative bronchiolitis immunopathogenesis. Unlike other solid organ transplants, vascularized mouse lung transplantation has only recently been developed. Here we show our independently developed obliterative bronchiolitis model after murine orthotopic single-lung transplantation.

פיתוח Bronchiolitis סותם במודל Murine של השתלת ריאות Orthotopic

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Medicine

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

Mice, both wildtype and transgenic, are the principal mammalian model in biomedical research currently. Intubation and mechanical ventilation are necessary for whole animal experiments that require surgery under deep anesthesia or measurements of lung function. Tracheostomy has been the standard for intubating the airway in these mice to allow mechanical ventilation. Orotracheal intubation has been reported but has not been successfully used in many studies because of the substantial technical difficulty or a requirement for highly specialized and expensive equipment. Here we report a technique of direct laryngoscopy using an otoscope fitted with a 2.0 mm speculum and using a 20 G&#160;intravenous catheter as an endotracheal tube. We have used this technique extensively and reliably to intubate and conduct accurate assessments of lung function in mice. This technique has proven safe, with essentially no animal loss in experienced hands. Moreover, this technique can be used for repeated studies of mice in chronic models.

Endotracheal Intubation in Mice via Direct Laryngoscopy Using an Otoscope

We have developed a simple, reliable, and relatively inexpensive method for endotracheal intubation in mice via direct laryngoscopy using an otoscope with a 2.0 mm speculum. This technique is atraumatic and can be used for repeated measurements in chronic experiments. We find it superior to tracheostomy or previously reported nonsurgical techniques.

Endotracheal אינטובציה בעכברים<em&gt; דרך</em&gt; ישיר laryngoscopy באמצעות אוטוסקופ

Mice, both wildtype and transgenic, are the principal mammalian model in biomedical research currently. Intubation and mechanical ventilation are ...

Transuterine Fetal Tracheal Occlusion Model in Mice

Fetal tracheal occlusion (TO), an established treatment modality, promotes fetal lung growth and survival in severe congenital diaphragmatic hernia (CDH). Following TO, retention of the secreted epithelial fluid increases luminal pressure and induces lung growth. Various animal models have been defined to understand the pathophysiology of CDH and TO. All have their own advantages and disadvantages such as the difficulty of the technique, the size of the animal, cost, high mortality rates, and the availability of genetic tools. Herein, a novel transuterine model of murine fetal TO is described. Pregnant mice were anesthetized, and the uterus exposed via a midline laparotomy. The trachea of selected fetuses were ligated with a single transuterine suture placed behind the trachea, one carotid artery, and one jugular vein. The dam was closed and allowed to recover. Fetuses were collected just before parturition. Lung to body weight ratio in TO fetuses was higher than that in control fetuses. This model provides researchers with a new tool to study the impact of both TO and increased luminal pressure on lung development.

Various animal models of congenital diaphragmatic hernia and fetal tracheal occlusion present advantages and disadvantages regarding ethical issues, cost, surgical difficulty, size, survival rates, and availability of genetic tools. This model provides a new tool to study the impact of both tracheal occlusion and increased luminal pressure on lung development.

מודל חסימת קנה הנשימה העוברי הטרנס-רחמי בעכברים

Fetal tracheal occlusion (TO), an established treatment modality, promotes fetal lung growth and survival in severe congenital diaphragmatic hernia (CDH). ...

Developmental Biology

A Novel Microsurgical Model for Heterotopic, En Bloc Chest Wall, Thymus, and Heart Transplantation in Mice

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression must be pursued. Employing vascularized bone marrow transplantation and co-transplantation of the thymus have shown promise in this regard in various animal models.1-11 Vascularized bone marrow transplantation allows for the uninterrupted transfer of donor bone marrow cells within the preserved donor microenvironment, and the incorporation of thymus tissue with vascularized bone marrow transplantation has shown to increase T-cell chimerism ultimately playing a supportive role in the induction of immune regulation. The combination of solid organ and vascularized composite allotransplantation can uniquely combine these strategies in the form of a novel transplant model. Murine models serve as an excellent paradigm to explore the mechanisms of acute and chronic rejection, chimerism, and tolerance induction, thus providing the foundation to propagate superior allograft survival strategies for larger animal models and future clinical application. Herein, we developed a novel heterotopic en bloc chest wall, thymus, and heart transplant model in mice using a cervical non-suture cuff technique. The experience in syngeneic and allogeneic transplant settings is described for future broader immunological investigations via an instructional manuscript and video supplement.

To study combined solid organ and vascularized composite allotransplantation, we describe a novel heterotopic en bloc chest wall, thymus, and heart transplant model in mice using a cervical non-suture cuff technique.

Microsurgical דגם חדשני לHeterotopic, כמקשה אחת בחזה קיר, קורנית, ולב השתלה בעכברים

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression ...

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity is a commonly used model to study both acute lung injury and fibrosis, and multiple methods have been developed for administering bleomycin (and other toxic agents) into the lungs. However, many of these approaches, such as transtracheal instillation, have inherent drawbacks, including the need for strong anesthetics and survival surgery. This paper reports a quick, reproducible method of intratracheal intubation that involves mild inhaled anesthesia, visualization of the trachea, and the use of a surrogate spirometer to confirm exposure. As a proof of concept, 8-12 week old C57BL/6 mice were administered either 2.0 U/kg of bleomycin or an equivalent volume of PBS, and both damage and fibrotic endpoints were measured post-exposure. This procedure allows researchers to treat a large cohort of mice in a relatively short period with little expense and minimal post-procedure care.

This article presents a rapid and simple method for administering bleomycin directly into the mouse trachea via intubation. Key advantages of this method are that it is highly reproducible, easy to master, and does not require specialized equipment or lengthy recovery times.

שיטה משופרת עבור אינטובציה מהירה של קנה הנשימה של עכברים

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

Seeding and Implantation of a Biosynthetic Tissue-engineered Tracheal Graft in a Mouse Model

Treatment options for congenital or secondary long segment tracheal defects have historically been limited due to an inability to replace functional tissue. Tissue engineering holds great promise as a potential solution with its ability to integrate cells and signaling molecules into a 3-dimensional scaffold. Recent work with tissue engineered tracheal grafts (TETGs) has seen some success but their translation has been limited by graft stenosis, graft collapse, and delayed epithelialization. In order to investigate the mechanisms driving these issues, we have developed a mouse model for tissue engineered tracheal graft implantation. TETGs were constructed using electrospun polymers polyethylene terephthalate (PET) and polyurethane (PU) in a mixture of PET and PU (20:80 percent weight). Scaffolds were then seeded using bone marrow mononuclear cells isolated from 6-8 week-old C57BL/6 mice by gradient centrifugation. Ten million cells per graft were seeded onto the lumen of the scaffold and allowed to incubate overnight before implantation between the third and seventh tracheal rings. These grafts were able to recapitulate the findings of stenosis and delayed epithelialization as demonstrated by histological analysis and lack of Keratin 5 and Keratin 14 basal epithelial cells on immunofluorescence. This model will serve as a tool for investigating cellular and molecular mechanisms involved in host remodeling.

Graft stenosis poses a critical obstacle in tissue engineered airway replacement. To investigate cellular mechanisms underlying stenosis, we utilize a murine model of tissue engineered tracheal replacement with seeded bone marrow mononuclear cells (BM-MNC). Here, we detail our protocol, including scaffold manufacturing, BM-MNC isolation, graft seeding, and implantation.

Seeding, השרשת biosynthetic הוחלף נגזר רקמות מהונדסים בקנה הנשימה השתלה במודל של עכברים

Treatment options for congenital or secondary long segment tracheal defects have historically been limited due to an inability to replace functional ...

Bioengineering

A Heterotopic Mouse Model for Studying Laryngeal Transplantation

Laryngeal heterotopic transplantation, although a technically challenging procedure, offers more scientific analysis and cost benefits compared to other animal models. Although first described by Shipchandler et al. in 2009, this technique is not widely used, possibly due to the difficulties in learning the microsurgical technique and time required to master it. This paper describes the surgical steps in detail, as well as potential pitfalls to avoid, in order to encourage effective use of this technique.
In this model, the bilateral carotid arteries of the donor larynx are anastomosed to the recipient carotid artery and external jugular vein, allowing for blood flow through the graft. Blood flow can be confirmed intraoperatively by the visualization of blood filling in the graft bilateral carotid arteries, reddening of the thyroid glands of the graft, and bleeding from micro vessels in the graft. The crucial elements for success include delicate preservation of the graft vessels, making the correct size arteriotomy and venotomy, and using the appropriate number of sutures on the arterial-arterial and arterial-venous anastomoses to secure vessels without leakage and prevent occlusion. 
Anyone can become proficient in this model with sufficient training and perform the procedure in approximately 3 h. If performed successfully, this model allows for immunologic studies to be performed with ease and at low cost.

The aim of this manuscript is to describe the microsurgical steps required to perform a heterotopic laryngeal transplant in mice. The advantages of this mouse model compared to other animal models of laryngeal transplantation are its cost-effectiveness and the availability of immunologic assays and data.

מודל עכבר הטרוטופי לחקר השתלת גרון

Laryngeal heterotopic transplantation, although a technically challenging procedure, offers more scientific analysis and cost benefits compared to other ...

חקר מחלת דרכי הנשימה בהשתלות ריאה

Murine Intrapulmonary Tracheal Transplantation: A Model for Investigating Obliterative Airway Disease After Lung Transplantation

Murine intrapulmonary tracheal transplantation (IPTT) is used as a model of obliterative airway disease (OAD) following lung transplantation. Initially reported by our team, this model has gained use in the study of OAD due to its high technical reproducibility and suitability for investigating immunological behaviors and therapeutic interventions.
In the IPTT model, a rodent tracheal graft is directly inserted into the recipient's lung through the pleura. This model is distinct from the heterotopic tracheal transplantation (HTT) model, wherein grafts are transplanted into subcutaneous or omental sites, and from the orthotopic tracheal transplantation (OTT) model in which the donor trachea replaces the recipient's trachea. 
Successful implementation of the IPTT model requires advanced anesthetic and surgical skills. Anesthetic skills include endotracheal intubation of the recipient, setting appropriate ventilatory parameters, and appropriately timed extubation after recovery from anesthesia. Surgical skills are essential for precise graft placement within the lung and for ensuring effective sealing of the visceral pleura to prevent air leakage and bleeding. In general, the learning process takes approximately 2 months.
In contrast to the HTT and OTT models, in the IPTT model, the allograft airway develops airway obliteration in the relevant lung microenvironment. This allows investigators to study lung-specific immunological and angiogenic processes involved in airway obliteration after lung transplantation. Furthermore, this model is also unique in that it exhibits tertiary lymphoid organs (TLOs), which are also seen in human lung allografts. TLOs are comprised of T and B cell populations and characterized by the presence of high endothelial venules that direct immune cell recruitment; therefore, they are likely to play a crucial role in graft acceptance and rejection. We conclude that the IPTT model is a useful tool for studying intrapulmonary immune and profibrotic pathways involved in the development of airway obliteration in the lung transplant allograft.

מחבר זרקור: חקירת הגורמים העיקריים של ברונכיוליטיס אובליטרטיבי לאחר השתלת ריאות

The murine intrapulmonary tracheal transplantation (IPTT) model is valuable for studying obliterative airway disease (OAD) after lung transplantation. It offers insights into lung-specific immunological and angiogenic behavior in airway obliteration after allotransplantation with high reproducibility. Here, we describe the IPTT procedure and its expected results.

השתלת קנה נשימה תוך ריאתי: מודל לחקר מחלת דרכי הנשימה לאחר השתלת ריאות

Murine intrapulmonary tracheal transplantation (IPTT) is used as a model of obliterative airway disease (OAD) following lung transplantation. Initially ...

השתלת קנה הנשימה Heterotopic ו orthotopic ב עכברים משמשים מודלים לחקר התפתחות המחלה Airway סותם

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

בדיקת רגישות חזותית על מהירות ועל כיוון התנועה של לטאות

פיתוח Bronchiolitis סותם במודל Murine של השתלת ריאות Orthotopic

Endotracheal אינטובציה בעכברים

מודל חסימת קנה הנשימה העוברי הטרנס-רחמי בעכברים

Microsurgical דגם חדשני לHeterotopic, כמקשה אחת בחזה קיר, קורנית, ולב השתלה בעכברים

שיטה משופרת עבור אינטובציה מהירה של קנה הנשימה של עכברים

Seeding, השרשת biosynthetic הוחלף נגזר רקמות מהונדסים בקנה הנשימה השתלה במודל של עכברים

מודל עכבר הטרוטופי לחקר השתלת גרון

השתלת קנה נשימה תוך ריאתי: מודל לחקר מחלת דרכי הנשימה לאחר השתלת ריאות

השתלת קנה נשימה תוך ריאתי: מודל לחקר מחלת דרכי הנשימה לאחר השתלת ריאות