Os autores agradecem Christiane Pahrmann (Lab Manager).

<ol><li> Masculino Balb / C camundongos (8-12 semanas) são adquiridos a partir de Charles River Laboratories (Sulzfeld, Alemanha). Os ratos estão alojados em condições convencionais, standard alimentados com alimentos ratos e água ad libitum. </li><li> Isofluran 2% é usado para anestesia. </li></ol> PREPARAÇÃO DOS DOADORES <ol><li> Raspar o cabelo abdominal e desinfectar a área usando betaisodona. </li><li> Sob visão microscópica, realizar uma incisão mediana cervical a partir do nível da laringe ao esterno. </li><li> Retire a gordura subcutânea e os músculos correia para obter uma visão clara da traquéia. </li><li> Dissecar a traquéia de qualquer tecidos circundantes, como o esôfago, nervos, artérias e tecido conjuntivo. </li><li> Remover a traquéia todo (da laringe até a bifurcação). </li><li> Lave o transplante com solução salina fria e guardar o enxerto, a 4 ° C. </li><li> O doador é sacrificado por deslocamento cervical após a colheita da traquéia. </li></ol> BENEFICIÁRIO: transplante heterotópico <ol><li> Raspar o cabelo abdominal em uma ampla margem ao redor do local da incisão e desinfectar a área três vezes com betaisodona (betadine), seguido pelo álcool. Os olhos devem ser lubrificados com um produto de pomada oftálmica para evitar as córneas de secar. </li><li> Executar uma laparotomia mediana e coloque o intestino para uma luva, esterilizada moistured. </li><li> Espalhe o omento maior cuidado. Coloque o enxerto para o centro e fixar-lo com uma sutura única 8-0 (Prolene, Ethicon, Alemanha). </li><li> Cobrir integralmente o transplante com o omento maior e corrigir o enxerto com uma única sutura 8-0 (Prolene, Ethicon, Alemanha). </li><li> Realocar os intestinos de volta para o abdômen e lavar com soro fisiológico morno, estéril antes do seu encerramento. </li><li> Close up em 2 camadas - camada de parede abdominal e pele com padrão contínuo usando Prolene 7-0 para o músculo e 7-0 Vicryl para a pele. </li></ol> BENEFICIÁRIO: transplante ortotópico <ol><li> Raspar o cabelo abdominal em uma ampla margem ao redor do local da incisão e desinfectar a área três vezes com betaisodona (betadine), seguido pelo álcool. Os olhos devem ser lubrificados com um produto de pomada oftálmica para evitar as córneas de secar. </li><li> Divide os músculos cinta para visualizar todo o complexo laringotraqueal. </li><li> Dissecar cuidadosamente a traquéia dos tecidos circundantes, ter o cuidado de preservar os nervos laríngeos recorrentes. </li><li> Divida a três anéis da traquéia caudal da cricóide. O animal mantém a respiração fisiológica através da traqueostomia. </li><li> Garantir limpa bordas traqueal no receptor, assim como no enxerto. </li><li> O enxerto se interpõe entre os defeitos destinatário traqueal e orientada para manter a polaridade anatômica. </li><li> Usando 8-0 (Prolene, Ethicon, Alemanha), anastomose do enxerto de doador com a distal (mediastino) traquéia. O aspecto posterior da anastomose é realizada de forma contínua em execução. A face anterior é então completada com pontos interrompidos. </li><li> Remova qualquer secreções das vias aéreas. </li><li> A anastomose proximal é, então, completou da mesma forma como o distal. </li><li> Garantir a integridade das vias aéreas e respiração adequada e espontânea. </li><li> Mudar o local da alça muscular e fechar o camada de tecido subcutâneo e pele usando 6-0 (Vicryl, Ethicon, Alemanha) com padrão contínuo. </li><li> Uso de anestesia de injeção para o destinatário, pois o animal irá reter a respiração fisiológica através da traquéia. Uma combinação de 75/1/0.2 mg / kg de propofol, fentanil e medetomidina, respectivamente, é usado para anestesia ip em camundongos. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig1.jpg" alt="Figura 1" /> Figura 1: Doadores traquéia. 1A: Doadores traquéia in situ após a preparação. 1B: traquéia doadora excisadas. 1C: Doadores traquéia após a remoção. <img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig2.jpg" alt="Figura 2" /> Figura 2: Modelo heterotópica. 2A: O enxerto é posicionado no centro do omento maior. 2B: O enxerto é fixado em ambas as extremidades com uma sutura simples. 2C: O enxerto é envolto em omento maior e fixada com uma sutura simples. <img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig3.jpg" alt="Figura 3" /> Figura 3: Modelo ortotópico. 3A: O enxerto se interpõe entre os defeitos destinatário traqueal e da parede posterior é anastomosado na moda funcionamento contínuo. 3B: A parede anterior é completada com uma sutura simples. <img src="/files/ftp_upload/1437/1437Fig4.jpg" alt="Figura 4" /> Figura 4: Histologia. 4A: Recuperado traquéia transplantada heterotópico após 28 dias no H + E staIning (15x). Observe a obliteração luminal 100%. 4B: Recuperado traquéia transplantada ortotópico após 60 dias no H + E coloração (15x). Obliteração luminal máxima alcançada é de aproximadamente 45%. <table border="1"><tbody><tr><td></td><td> Modelo de Transplante heterotópico traqueal </td><td> Modelo de Transplante ortotópico traqueal </td></tr><tr><td> Vantagens </td><td> + Fácil de executar + Obliteração luminal com oclusão completa das vias aéreas após 28 dias + Carinho Sem físicas dos animais pela OAD </td><td> + Ventilação Física do enxerto + A administração da droga inalada possível + Fortes reações imunológicas, como a produção de anticorpos IgM alorreativas + Meio Physiological torácica + Anastomose traqueal-traqueal imita o ambiente clínico </td></tr><tr><td> Desvantagens </td><td> - Sem ventilação da traquéia transplantada - Não há uma avaliação de patógenos inalados possível - Inibição do transporte mucociliar e secreções retidas - Microambiente peritoneal, em vez de meio torácica </td><td> - Formação cirúrgica necessária - Obliteração luminal com app oclusão luminal. 45% após 60 dias - Os animais podem desenvolver sintomas de OAD </td></tr></tbody></table> Tabela 1: Vantagens e Desvantagens da heterotópica e Transplante ortotópico traqueal.

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	<li>Adams, B., Berry, G., Huang, X., Shorthouse, R., Brazelton, T., Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunosuppressive+therapies+for+the+prevention+and+treatment+of+obliterative+airway+disease+in+heterotopic+rat+trachea+allografts.">Immunosuppressive therapies for the prevention and treatment of obliterative airway disease in heterotopic rat trachea allografts.</a> Transplantation. 69, 2260-2266 .</li><li>Adams, B., Brazelton, T., Berry, G., Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+respiratory+epithelium+in+a+rat+model+of+obliterative+airway+disease.">The role of respiratory epithelium in a rat model of obliterative airway disease.</a> Transplantation. 69, 661-665 .</li><li>Deuse, T., Schrepfer, S., Reichenspurner, H., Hoyt, G., Fischbein, M., Robbins, R., Pelletier, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Techniques+for+experimental+heterotopic+and+orthotopic+tracheal+transplantations+&amp;#x2013;+when+to+use+which+model;+Transplant+Immunology+17.">Techniques for experimental heterotopic and orthotopic tracheal transplantations &amp;#x2013; when to use which model; Transplant Immunology 17.</a> , 255-261 (2007).</li><li>Hele, D., Yacoub, M., Belvisi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+heterotopic+tracheal+allograft+as+an+animal+model+of+obliterative+bronchiolitis.">The heterotopic tracheal allograft as an animal model of obliterative bronchiolitis.</a> Respiratory Research. 2, 169-183 .</li><li>Hertz, M., Jessurun, J., King, M., Savic, S., Murray, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproduction+of+the+obliterative+bronchiolitis+lesion+after+heterotopic+transplantation+of+mouse+airways.">Reproduction of the obliterative bronchiolitis lesion after heterotopic transplantation of mouse airways.</a> American Journal of Pathology. 142, (1993).</li><li>McDyer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+and+murine+obliterative+bronchiolitis+in+transplant.">Human and murine obliterative bronchiolitis in transplant.</a> Proceedings of the American Thoracic Society. 4, 37-43 .</li><li>Schrepfer, S., Deuse, T., Hoyt, G., Sheikh, A., Hoffmann, J., Reichenspurner, H., Robbins, R., Pelletier, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+orthotopic+tracheal+transplantation:+the+stanford+technique.">Experimental orthotopic tracheal transplantation: the stanford technique.</a> Microsurgery. 27, 187-189 (2007).</li></ol>

Sonja Schrepfer recebeu uma bolsa de pesquisa do Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992/3-1).] Todos os animais receberam cuidados humanos, em conformidade com os Princípios de Laboratório Animal Care, experimentos em animais foram realizados de acordo com as diretrizes e regulamentos estabelecidos pela Sociedade Nacional de Pesquisa Médica e do Manual sobre Cuidados e Uso de Animais de Laboratório, publicado pela National Institutes of Health (Institutos Nacionais de Saúde publicação 85-23, revisado em 1985). Todos os animais foram obtidos a partir de Charles River Laboratories (Sulzfeld, Alemanha) e foram mantidos no biotério atendimento do Hospital Universitário Hamburg Eppendorf. Os animais receberam ração padrão e água ad libitum.

Mice estão disponíveis em diferentes transgeneic e modelo knockout e, portanto, adequado ao estudo de questões relacionadas com mecanicista OAD (4). Ambos os modelos de transplante de traquéia mostrado neste vídeo podem ser usados ​​como modelos confiáveis ​​para estudar o desenvolvimento OAD. No entanto, cada modelo demonstra vantagens e limitações. O transplante heterotópico de traquéia é de fácil execução e não requer treinamento cirú...

heterotopic and orthotopic tracheal transplantation in mice used as models to study the development of  obliterative airway disease

Obliterante das vias aéreas doença (OAD) é a principal complicação após o transplante de pulmão, que limita a sobrevivência a longo prazo (1-7). Para estudar a fisiopatologia, tratamento e prevenção da OAD, diferentes modelos animais de transplante de traqueia em roedores têm sido desenvolvidos (1-7). Aqui, usamos dois modelos estabelecidos de traquéia transplante, o modelo heterotópico e ortotópico e demonstrar suas vantagens e limitações. Para o modelo heterotópico, o doador traquéia é envolto em omento maior do destinatário, enquanto que o doador é anastomosado traquéia até o final-de-final da anastomose no modelo ortotópico. Em ambos os modelos, o desenvolvimento de lesões histológicas obliterante semelhante a OAD clínica tem sido demonstrada (1-7). Este vídeo mostra como executar ambos, o heterotópico, bem como a técnica de transplante ortotópico traqueal em ratos, e compara a evolução temporal do desenvolvimento OAD em ambos os modelos usando histologia.

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Heterotopic and Orthotopic Tracheal Transplantation in Mice used as Models to Study the Development of  Obliterative Airway Disease

Este vídeo mostra e compara dois modelos experimentais para estudar o desenvolvimento de doenças das vias aéreas obliterante (OAD) em camundongos, o modelo de transplante heterotópico e ortotópico traqueal.

Heterotópico e Transplante ortotópico traqueal em ratos usados ​​como modelos para estudar o desenvolvimento de doenças das vias aéreas obliterante

Obliterative airway disease (OAD) is the major complication after lung transplantations that limits long term survival (1-7).
To study the ...

heterotopic-orthotopic-tracheal-transplantation-mice-used-as-models

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13.8K visualizações.  University Heart Center Hamburg. Este vídeo mostra e compara dois modelos experimentais para estudar o desenvolvimento de doenças das vias aéreas obliterante (OAD) em camundongos, o modelo de transplante heterotópico e ortotópico traqueal.

Heterotópico e Transplante ortotópico traqueal em ratos usados ​​como modelos para estudar o desenvolvimento de doenças das vias aéreas obliterante

Heterotópico e Transplante ortotópico traqueal em ratos usados como modelos para estudar o desenvolvimento de doenças das vias aéreas obliterante