이 연구는 부여 NIHM R01 MH091816과 TDG에 R21 MH084043에 의해 지원되었습니다.

1. 자료 1. 서스펜션 상자 꼬리 - 서스펜션 테스트 (TST)는 자신의 꼬리로 지상 정지 쥐를을 포함한다. 가장 기본적인 수준에서 프로 시저는 서스펜션 바 또는 진열 선반, 그리고 테이프가 필요합니다. 그러나 실험자 최적의 명암을 제공하는 배경의 사용을 고려해야합니다. 또한, 그것은 테스트중인 다른 동물을 관찰에서 마우스를 방지하기 위해 조치를 취할 신중한 있습니다. 저희 연구실에서는, 우리는 크기 (55 X 높이 60 X 폭 11.5 cm 깊이)과 플라스틱으로 만들어진 특별히 제조 꼬리 서스펜션 상자 (4 시간 일, 볼티모어 MD)를 사용합니다. 서로를 관찰하거나 상호 작용하는 동물을 방지하기 위해, 각각의 마우스는 자체적으로 세 벽으로 둘러싸인 직사각형 구획 (55 X 높이 15 X 폭 11.5 cm 깊이) 내에 일시 중지되었습니다. 마우스가이 구역의 중간에 중단하고 너비와 깊이 마우스 공동 안 수 있도록 충분히 크기뿐입니다벽 ntact. 이 설정에서 마우스의 코 및 장치 층 사이의 대략적인 거리는 20~25cm 있습니다. 우리는 한 번에 4 마우스를 테스트 수 있도록 장치에서 네번이나 같은 동일한 구획이있다. 각 마우스의 꼬리를 중단하는 데 사용되는 알루미늄 서스펜션 바 (1cm. 높이 X 1cm. 너비 X 60cm. 길이), 상자의 상단에 위치합니다. 우리 연구실에서 사용하는 크기는 일반적인 기준으로 간주되어야합니다. 예를 들어, 꼬리 - 중지 상자의 각 구획의 크기가 큰 outbred 마우스 변형이 (예 : CD - 1)를 사용하는 경우 증가 수 있습니다. 각 구역의 하단에서 우리는 동물의 대변 또는 소변을 수집 분리형 알루미늄 트레이를 놓습니다. 우리는 흰둥이 동물 어두운 회색 상자 및 기타 코트 색상의 마우스를위한 크림 색상 상자를 사용합니다. 이 협정은 우리에게 더 나은 명암과 시험 그러므로 더욱 안정적인 행동 점수를 제공합니다. 2. 테이프 <p class= &quot;jove_content&quot;&gt; 테이프가 마우스의 꼬리와 정지 표시줄에 모두 안전하게 준수하고, 마우스 (예 : TimeMed 라벨링 시스템, Inc의 버 리지 일리노이, 1.9 cm 폭) 테스트중인의 무게를 가지고 충분히 강해 져야한다. 그것이 꼬리에서 제거 될 세션이 끝날 때 이후 그러나 테이프는 지나치게 끈적해서는 안됩니다. 우리는 테이프 17cm 조각을 잘라 한쪽 끝을 자국이 2cm를 놓으십시오. 나머지 15cm는 마우스의 정지에 사용되는 동안이 2cm 부분은 꼬리에 테이프를 부착 사용되었다. 3. 타이머 4. 비디오 녹화 장치 비디오 카메라와 삼각대 (또는 기타 지원 구조) 필요합니다. 이 검사는 일반적으로 동시에 테스트하고 여러 동물과 관련된 때문에, 라이브 점수는 어려울 것이며, 권고하지 않습니다. 비디오 카메라는 하이에 기록한다행동 채점을 위해 나중에 사용됩니다 품질의 사진을 렌더링하기 위해 GH 충분한 해상도. 항상 시험을 시작하기 전에 카메라의 충분한 기록 메모리가있다는 것을 확신합니다. 우리는 비디오 전송을위한 간단한 수 있도록 물리적인 매체 (즉, 비디오 카세트)를 사용하지 않고 디지털로 기록하는 비디오 카메라를 사용합니다. 5. 화이트 노이즈 생성기 소음 발생기는 간헐 환경 소리를 마스크한다. 소음 발생기의 사용은 특히 갑자기 큰 소리가 잠재적으로 쥐를 놀라게한다고 들었 수 실험실 환경에서 권장합니다. 우리의 실험 공간에서 주위 소음 수준 (작동 백색 잡음 발생기 제외) 60dB 주변입니다. TST가 실시되는 위치에 활성화된 백색 잡음 발생기와 함께 전체 사운드 수준은 70-72dB 있습니다. 그러나 이러한 수치는 예를 들어 전용으로 제공하는 것을인지해야하고, 각 연구실을 선택합니다그들의 독특한 환경과 상황에 따라 바로 소음. 6. 물품을 세척 서스펜션 상자는 살균 용액 (예 : 메가바이트 - 10, 경구 연구소 주식 회사, 윌밍턴, DE, 또는 이와 유사한 것) 각 세션 후에는 철저하게 닦아해야합니다. 7. Climbstoppers (옵션 : 변형에 의존 사용) 이러한 C57BL / 6와 같은 배경의 마우스는 시험 일 동안 자신의 꼬리를 올라갈 수 있습니다. 폴리 카보 네이트 튜브에서 사cm 길이 (FourHourDay Inc의 볼티모어 MD에 의해) (# 8585K41, McMaster - 카, 산타페 스프링스 버렸어요 지우기 중공 실린더 (4cm 길이, 직경 외부 1.6 cm, 직경 내부 1.3 cm, 1.5 g) , CA)는 동작 2,3를 등반과 같은 꼬리를 방지하기 위해 생쥐의 꼬리 주위에 배치됩니다. 이러한 장치는 일반적인 도구와 자료가있는 모든 실험실에서 만들 수 있습니다. 2. 행동 절차 <p class="jove_content"&gt; 전반적인 실험 설계는 실험에 특정 변수 사이의 적절한 counterbalancing을 반영해야합니다. 예를 들어, 실험에서 우리는 동등하게 모든 TST 세션 (즉, 넷 치료 그룹이있다면, 각 각 세션에 표시됩니다)에서 각 그룹을 대표하려고합니다. 또한, 마우스의 위치가 각 치료 그룹에서 마우스 각 세션에서 다른 위치에 배치하는 등의 방법으로 회전하고 있습니다. <ol><li> 위치에 카메라를 배치합니다. 카메라는 동물의 가능한 가장 높은 해상도를 얻기 위해서는 최대한하여야한다. </li><li> 세션 중에 사용됩니다 테이프 조각은 절단 표시, 세션에 대한 준비를해야합니다. </li><li> 사용중인 경우에는 생쥐가 테스트 룸으로 도입되기 전에, 백색 잡음 발전기를 시작합니다. 백색 소음의 수준은 외부 소음을 마스크로 충분합니다. 높은 볼륨을 방지하고 백색 잡음 같은 수준의 모든 동물에 사용됩니다 있는지 확인하십시오. </li><li> 가져와테스트 룸에 imals. 동물이있는 룸과 테스팅 룸 비슷한 주변 조건에 서로 인접해있는 경우에는 acclimation 기간이 필요하지 않을 수 있습니다. 그렇지 않으면, acclimation의 기간 (일반적으로 최소한 1 시간)에 대한 테스트 룸에 동물을 배치. 같은 방에 배치 다른 동물들이 후각과 초음파 단서를 느낄 수있다는 점에 유의하십시오. </li><li> 이러한 C57BL6 / J로 자신의 꼬리를 등반 알려진 변형은 테이프를 적용하기 전에 꼬리 주변 장소 Climbstoppers를 사용중인 경우. </li><li> 생쥐의 꼬리에 테이프를 준수합니다. 테이프의 끝을 표시를 사용하여 테이프가 꼬리 다시 자체에 막대기 있는지 확인하십시오. 테이프는 테이프 이외의 나머지 꼬리 2-3mm와 꼬리의 끝까지 적용해야합니다. </li><li> 일단 테이프의 각 조각은 새장의 내부 벽에 테이프의 중간 부분을 스틱 마우스 꼬리에 첨부되어 있습니다. 이것은 서로 테이프 조각 일의 방지 도움이 될 것입니다. 참고 C이 방식으로 onfinement은 스트레스의 원인과 가능한 한 빨리 각 동물에 테이​​프를 신청 절차를 완료하는 것이 중요합니다 것이 있습니다. </li><li> 모든 테이프가 적용되면, 녹음을 시작하고 생쥐가 중단되기 전에 세션을 식별합니다. </li><li> 치료 그룹 사이에 counterbalanced하는 순서로 중지 표시줄이나 선반에있는 테이프의 무료 끝에 배치하여 동물을 일시 중지합니다. 전체 TST 세션이 점수와 카메라가 그 시간 동안 행동을 평가하기 위해 무능력으로 이어질 것입니다 방해되기 때문에 카메라보기를 방해하지 않는 방식으로 마우스를 일시 중지합니다. 모든 테이프 끝을 각 마우스 게으름과 비슷한 길이로 정지 표시줄이나 선반에 평행하게 걸려 있는지 확인합니다. </li><li> 세션 (어떤은 일반적으로 육분이다)의 끝 부분에, 그들의 homecage으로 동물을 반환하고 조심스럽게 부드럽게 밀어하여 각 꼬리에서 테이프를 제거합니다. 이렇게하면 마이크에 통증을 일으킬 수 있으므로 꼬리에서 테이프를 벗겨하지 마십시오E. </li><li> 그들의 식민지 실에 생쥐를 반환 후 컬렉션 트레이에서 배설물 boli과 소변을 버리고 살균 솔루션 기기를 닦아냅니다. </li></ol> 3. 행동 분석 <ol><li> 일반적으로, TST는 길이 6 분 처음부터 끝까지됩니다. 다른 널리 사용되는 약은 효능 절차와는 달리, 강제 수영 시험은 전체 세션이 채점됩니다. 이것은 생쥐 이전 TST에 매니 페스트 부동하는 경향이있다 면요 일반 때문입니다. </li><li> 저희 연구실에서는 카메라에서 분석이 실시하는 PC에 직접 동영상 파일을 업로드하십시오. </li><li> 휴대가 측정 각 마우스가 지출되는 시간이 행동 분석하는 동안. 그것이 직접 부동 시간을 측정 가능하지만, 우리는 쉽게 오히려 그러한 움직임의 부족보다 적극적인 움직임을 감지하고 측정 발견했다. </li><li> TST 행동 분석의 가장 중요한 부분은 운동의 일관성을 확인합니다타고난 이동성으로 기록됩니다의. 특히 세션의 시작 부분에서 마우스,, 명백히 탈출과 관련된 매니 페스트 동작. 이것은 장치의 벽과 서스펜션 바, 신체의 강한 흔들림, 그리고 실행 유사한 사지의 움직임에 도달하기 위해 노력하고 있습니다. 이러한 움직임이 명확하게 이동성을 구성합니다. 그리고 이러한 행동 가시고이 subtler된다. 앞 다리에 국한되지만 뒷다리의 참여없이 이동성으로 계산되지 않습니다 연구실 작은 움직임에서. 또한, 추진력에 의한 아르 그네처럼 oscillations과 진자가 이전 이동성 관찰하는 동안 얻은 또한 이동성으로 계산되지 않습니다. </li><li> 저희 연구실에서는 시간 측정을위한 화면 스톱워치 소프트웨어 (Xnote 스톱워치, dnSoft 연구 그룹)을 사용합니다. 두 개의 스톱워치는 화면에 사용됩니다. 때 행동 분석 기간이 끝나는 첫 번째 스톱워치가 다운 360초 및 경고에서 관찰자로 계산됩니다. 두 번째 sto시간이 모바일 보낸 관찰자 - 조치하여 pwatch 제어. 특정 스톱워치 소프트웨어는 화면에 키보드 스톱워치를 제어할 수 있도록 기능을 시작하고 중지 키를 할당할 수있는 능력이 있습니다. 대신 일반 키보드의, 우리는 일반적으로 스톱워치를 제어하는​​ &#39;gamepad&#39;로 알려진 입력 장치를 사용합니다. </li><li> 화면에 테스트와 현재 하나 이상의 마우스가있다면 그것은 그들의 움직임은 관찰자주의를 분산되지 않도록하는 다른 동물을 커버하는 것이 좋습니다. 이것은 다른 프로그램 윈도우를 사용하거나 물리적으로 종이로 화면에 다른 생쥐를 덮고하여 수행할 수 있습니다. </li><li> 특정 마우스에 대한 경과 이동성 시간의 총 금액이 사전에 분석 세션의 완성을 볼 수있다면 현상 바이어스가있을 수 있습니다. 화면에 스톱워치를 사용하는 경우, 우리 모두가지만, 스톱워치의 밀리초 소수 커버하는 것이 좋습니다. 스톱워치를 덮고함으로써 관찰자는 스톱워치가 있는지 여부를 알고하지만 켜거나 어떤 시점에서 총 시간이 어떤 편견에 의해 경과 따라서 영향을받을 수 없습니다 몰라요. 이 방법에게 관찰자를 사용하여 동물의 그룹 과제에 장님이 동안, 각 동물의 이동성의 수준에 대한 일반적인 생각을 가지고 있지 않을거야. </li><li> 시험 동물에서 데이터를 수집하기 시작하기 전에 interobserver 신뢰성 시험은 모든 새 관찰자에 대해 실시한다. 그 또는 그녀가 채점하는 동안 저희 연구실에서는 각각의 새로운 관찰자 먼저 경험 관찰자을 감시합니다. 새로운 관측은 부동의 이동성을 차별화하는 데 충분한 자신감을 얻을 수 후에, 그들은 다음 경험 관찰자가 관찰하고 실수를 지적과 함께 실시간으로 점수. 이 단계가 성공적으로 완료되면, 새로운 관측은 우리가 훈련을 위해 저희 연구실에서 관리하는 TST 동영상의 특정 집합을 분석합니다. interobserver 상관의 높은 수준은 경험이 풍부한 관찰자로 얻은 후에만 조사는 실제에서 TST 동영상을 분석 않습니다실험. 우리는 보관이 훈련 분석의 데이터는 실험실에 대한 내부 기준을 구성합니다. 우리는 그들 (그리고 부동) 동작을 이동성을 표현하고, 남녀 사이의 부동 시간을 의미있는 방식으로 변종 사이의 차이를 관찰했습니다. 새로운 변형, 성별, 또는 유전자 조작 마우스 모델 실험실에서 테스트하는 경우는 다시 신뢰성 분석의 유형을 실시하는 것이 필요합니다. </li></ol> 4. 대표 결과 우리는 다양한 마우스 종자의 리튬 치료 (그림 1) 3 약은 같은 반응을 평가할 수있는 TST를 사용했습니다. 본 실험의 실험 자세한 내용은 수 외. 2011 년 3 출판하고 있습니다. <img src="/files/ftp_upload/3769/3769fig1.jpg" alt="그림 1" /> 그림 1. 오 근친 마우스 종자의 만성 리튬 관리 후 꼬리 정지 테스트에서 부동 시간. 쥐 그룹 집에 있었​​다D, 케이지 당 4 개의 쥐. 리튬 치료 그룹의 마우스는 리튬 차우 세 주 4g / kg LiCl을 포함 받았습니다. 컨트롤 동물은 염화 리튬없이 동일한 음식을 받았다. ** : P &lt;0.01, *** : P &lt;0.001이 중요한, unpaired t - 테스트를 상징. 데이터는 ± SEM 의미로 표현됩니다. 각 변형에 대한 그룹당 n은 :10 - 12 동물. (그림 3에서 재현). 이 예제에서는 음식 배달 만성 리튬의 상당한 치료 효과는 C57BL/6J과 DBA/2J 종자에서 관찰됩니다. 다른 세 변종에서 부동 시간에 통계적으로 의미있는 감소는 관찰되지 않았습니다. 이 데이터는 또한 다른 약은 의약품 4-8로 관찰되어 같은 만성 리튬 치료 약은 같은 반응에 의존 변형임을 나타냅니다.

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L. e. a. r. y., F, O., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+tests+for+measuring+the+effects+of+antidepressants+in+mice.">Automated tests for measuring the effects of antidepressants in mice.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 78, 269-274 (2004).</li><li>Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+AMPA+receptors+in+the+antidepressant-like+effects+of+lithium+in+the+mouse+tail+suspension+test+and+forced+swim+test.">Involvement of AMPA receptors in the antidepressant-like effects of lithium in the mouse tail suspension test and forced swim test.</a> Neuropharmacology. 54, 577-587 (2008).</li><li>Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 42, (2009).</li></ol>

저자 관심에 대한 갈등을 선언하지 않습니다.

Steru 외 의해 TST의 개발. 9 이전에 개발된 강제 수영 시험 10-12 영향을 받았습니다. TST 생쥐의 강제 수영 테스트와 마찬가지로이 피할 수 있지만 적당히 스트레스 상황에 배치됩니다. 탈출과 관련된 행동의 부족은 부동 간주됩니다. 강제 수영 시험과 마찬가지로, TST는 최고의 마약 약은 효능 평가를위한 검증 시험입니다,뿐만 아니라 환경, 신경 생물학 및 유전자 조작 <...

<ul><li> 테이프 </li><li> 타이머 </li><li> 비디오 카메라 </li><li> 화이트 노이즈 생성기 (옵션) </li><li> Climbstoppers (옵션, 변형이 사용에 따라) </li></ul>

the tail suspension test

꼬리 - 서스펜션 테스트는 잠재적인 약은 약물 검사에 유용 마우스 동작 테스트하고, 우울증과 관련된 행동에 영향을 미칠 것으로 예상되는 다른 조작의 평가. 생쥐가 탈출하거나 가까운 표면에 물을 수 없습니다 것과 같은 위치에, 테이프 자신의 꼬리에 의해 중지됩니다. 이 테스트가 진행되는 동안, 일반적으로 기간이 여섯 분, 결과 지향적인 탈출 동작 계량입니다. 꼬리 - 서스펜션 테스트 예비 약은 화합물의 높은 처리량 검사를위한 약물 발견에 유용한 도구입니다. 여기, 우리가 발생할 수 있으며이를 방지하는 방법 잠재적인 문제에 대한 자세한 중심으로이 테스트의 구현에 필요한 세부 정보를 설명합니다. 우리는 또한 널리 사용되는 C57BL / 6로 꼬리 등산 문제에 대한 해결책, 일부 마우스 변종이 테스트 쓸모없는 렌더링 일반적인 문제를 제공합니다. 특히, 우리는 작은 플라스틱을 통해 마우스 꼬리를 통과하여 꼬리 등반 행위를 방지이전 중지 실린더. 마지막으로, 우리는 자세히 어떻게 수동으로 테스트에 나타나신있는 동작을 점수.

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The Tail Suspension Test

꼬리 - 서스펜션 시험은 마우스에서 약물 치료의 약은 효능을 평가하기위한 실험 절차로 검증됩니다. 생쥐 6 분 동안 자신의 꼬리에 의해 중단되고 탈출 관련 동작이 평가됩니다. 우리는 꼬리 정지 테스트를 수행에 사용되는 절차를 설명합니다.

꼬리 서스펜션 테스트

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

78.5K 조회수.  University of Maryland School of Medicine. 꼬리 - 서스펜션 시험은 마우스에서 약물 치료의 약은 효능을 평가하기위한 실험 절차로 검증됩니다. 생쥐 6 분 동안 자신의 꼬리에 의해 중단되고 탈출 관련 동작이 평가됩니다. 우리는 꼬리 정지 테스트를 수행에 사용되는 절차를 설명합니다.

비디오: The Tail Suspension Test

One Dimensional Turing-Like Handshake Test for Motor Intelligence

In the Turing test, a computer model is deemed to "think intelligently" if it can generate answers that are not distinguishable from those of a human. However, this test is limited to the linguistic aspects of machine intelligence. A salient function of the brain is the control of movement, and the movement of the human hand is a sophisticated demonstration of this function. Therefore, we propose a Turing-like handshake test, for machine motor intelligence. We administer the test through a telerobotic system in which the interrogator is engaged in a task of holding a robotic stylus and interacting with another party (human or artificial). Instead of asking the interrogator whether the other party is a person or a computer program, we employ a two-alternative forced choice method and ask which of two systems is more human-like. We extract a quantitative grade for each model according to its resemblance to the human handshake motion and name it "Model Human-Likeness Grade" (MHLG). We present three methods to estimate the MHLG. (i) By calculating the proportion of subjects' answers that the model is more human-like than the human; (ii) By comparing two weighted sums of human and model handshakes we fit a psychometric curve and extract the point of subjective equality (PSE); (iii) By comparing a given model with a weighted sum of human and random signal, we fit a psychometric curve to the answers of the interrogator and extract the PSE for the weight of the human in the weighted sum. Altogether, we provide a protocol to test computational models of the human handshake. We believe that building a model is a necessary step in understanding any phenomenon and, in this case, in understanding the neural mechanisms responsible for the generation of the human handshake.

We present a Turing-like Handshake test administered through a telerobotic system in which the interrogator is holding a robotic stylus and interacting with another party (human or artificial). We use a forced choice method, and extract a measure for the similarity of the artificial model to a human handshake.

자동차 인텔리 전스에 대한 1 차원 튜링 - 마찬가지로 악수 시험

In the Turing test, a computer model is deemed to "think intelligently" if it can generate answers that are not distinguishable from those of a human.  ...

연구

신경과학

The Mouse Forced Swim Test

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental manipulations that are aimed at rendering or preventing depressive-like states. Mice are placed in an inescapable transparent tank that is filled with water and their escape related mobility behavior is measured. The forced swim test is straightforward to conduct reliably and it requires minimal specialized equipment. Successful implementation of the forced swim test requires adherence to certain procedural details and minimization of unwarranted stress to the mice. In the protocol description and the accompanying video, we explain how to conduct the mouse version of this test with emphasis on potential pitfalls that may be detrimental to interpretation of results and how to avoid them. Additionally, we explain how the behaviors manifested in the test are assessed.

The forced swim test is validated as an experimental approach to assess potential antidepressant efficacy in rodents. Experimental animals are placed in a tank of water and escape-related mobility behavior is quantified. The common procedures for the mouse version of this test are described.

마우스 강제 수영 시험

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental ...

The Fibular Nerve Injury Method: A Reliable Assay to Identify and Test Factors That Repair Neuromuscular Junctions

The neuromuscular junction (NMJ) undergoes deleterious structural and functional changes as a result of aging, injury and disease. Thus, it is imperative to understand the cellular and molecular changes involved in maintaining and repairing NMJs. For this purpose, we have developed a method to reliably and consistently examine regenerating NMJs in mice. This nerve injury method involves crushing the common fibular nerve as it passes over the lateral head of the gastrocnemius muscle tendon near the knee. Using 70 day old female mice, we demonstrate that motor axons begin to reinnervate previous postsynaptic targets within 7 days post-crush. They completely reoccupy their previous synaptic areas by 12 days. To determine the reliability of this injury method, we compared reinnervation rates between individual 70 day old female mice. We found that the number of reinnervated postsynaptic sites was similar between mice at 7, 9, and 12 days post-crush. To determine if this injury assay can also be used to compare molecular changes in muscles, we examined levels of the gamma-subunit of the muscle nicotinic receptor (gamma-AChR) and the muscle-specific kinase (MuSK). The gamma-AChR subunit and MuSK to are highly upregulated following denervation and return to normal levels following reinnervation of NMJs. We found a close relationship between transcript levels for these genes and innervation status of muscles. We believe that this method will accelerate our understanding of the cellular and molecular changes involved in repairing the NMJ and other synapses.

We have developed a nerve injury method to reliably examine muscle reinnervation, and thus regeneration of neuromuscular junctions in mice. This technique involves injuring the common fibular nerve via a simple and highly reproducible surgery. Muscle reinnervation in then assessed by whole-mounting the extensor digitorum longus muscle.

비골 신경 손상 방법 : 신뢰할 수있는 분석은 확인하고 테스트 즉, 수리 신경 근육 학 접합 요인

The neuromuscular junction (NMJ) undergoes deleterious structural and functional changes as a result of aging, injury and disease. Thus, it is imperative ...

Diffuse Reflectance Spectroscopy: Getting the Capillary Refill Test Under One's Thumb

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill should occur within 2 s after releasing 5 s of firm pressure (e.g., by the physician&#39;s finger) in the normal healthy supine patient. A slower refill time indicates poor skin perfusion, which can be caused by conditions including sepsis, blood loss, hypoperfusion, and hypothermia. Since its introduction, the clinical usefulness of the test has been debated. Advocates point out its feasibility and simplicity and claim that it can indicate changes in vascular status earlier than changes in vital signs such as heart rate. Critics, on the other hand, stress that the lack of standardization in how the test is performed and the highly subjective nature of the naked eye assessment, as well as the test&#39;s susceptibility to ambient factors, markedly lowers the clinical value. The aim of the present work is to describe in detail the course of the refill event and to suggest potentially more objective and exact endpoint values for the capillary refill test using diffuse polarization spectroscopy.

This protocol describes how the use of diffuse polarization spectroscopy can improve the clinical usefulness of the capillary refill test. We suggest a more detailed analysis of the course of the capillary refill in healthy volunteers using diffuse reflectance spectroscopy videos and new informatic endpoints.

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill ...

Frequent Tail-tip Blood Sampling in Mice for the Assessment of Pulsatile Luteinizing Hormone Secretion

In many endocrine systems, circulating factors or hormones are not released continuously, but are secreted as a discrete pulse in response to a releasing factor. Single-point sampling measures are inadequate to fully understand the biological significance of the secretory pattern of pulsatile hormones either under normal physiologic conditions or during conditions of dysregulation. Luteinizing hormone (LH) is synthesized by the anterior pituitary gonadotrope&#160;cells and secreted in a pulsatile pattern which requires frequent collection of blood samples for pulse assessment. This has not been possible in mice until recently, due to the development of a high-sensitivity LH assay and advancement in a technique for frequent low-volume sample collection, initially described by Steyn and colleagues.1 Here we describe a protocol for the frequent peripheral blood sample collection from mice with sufficient handling acclimatization to detect pulsatile secretion of LH. The current protocol details an expanded acclimatization period that allows assessment of robust and continuous pulses of LH over multiple hours. In this protocol, the tip of the tail is clipped&#160;and blood is collected from the tail using a hand-held pipette. For assessment of pulsatile LH in gonadectomized mice, serial samples are collected every 5-6 min for 90-180 min. Importantly, the collection of blood and measurement of robust pulses of LH can be accomplished in awake, freely behaving mice, given adequate handling acclimatization and effort to minimize environmental stressors. Sufficient acclimatization can be achieved within 4-5 weeks prior to blood collection. This protocol highlights advances in the methodology to ensure collection of whole blood samples for assessment of pulsatile LH secretion patterns over multiple hours in the mouse, a powerful animal model for neuroendocrine research.

Here we present a tail-tip blood sampling protocol for frequent sample collection in unrestrained mice. This method is useful for assessing patterns of pulsatile luteinizing hormone secretion and could be adapted for analysis of other circulating factors.

타악기 황 호르몬 분 비의 평가 대 한 쥐에서 꼬리 팁 혈액 샘플링을 자주

In many endocrine systems, circulating factors or hormones are not released continuously, but are secreted as a discrete pulse in response to a releasing ...

A Metric Test for Assessing Spatial Working Memory in Adult Rats Following Traumatic Brain Injury

Impairments to sensory, short-term, and long-term memory are common side effects after traumatic brain injury (TBI). Due to the ethical limitations of human studies, animal models provide suitable alternatives to test treatment methods, and to study the mechanisms and related complications of the condition. Experimental rodent models have historically been the most widely used due to their accessibility, low cost, reproducibility, and validated approaches. A metric test, which tests the ability to recall the placement of two objects at various distances and angles from one another, is a technique to study impairment in spatial working memory (SWM) after TBI. The significant advantages of metric tasks include the possibility of dynamic observation, low cost, reproducibility, relative ease of implementation, and low stress environment. Here, we present a metric test protocol to measure impairment of SWM in adult rats after TBI. This test provides a feasible way to evaluate physiology and pathophysiology of brain function more effectively.

Traumatic brain injury (TBI) is commonly associated with memory impairment. Here, we present a protocol to assess spatial working memory after TBI via a metric task. A metric test is a useful tool to study spatial working memory impairment after TBI.

외상성 뇌 손상 다음 성인 쥐에서 공간 작업 메모리를 평가 하기 위한 메트릭 테스트

Impairments to sensory, short-term, and long-term memory are common side effects after traumatic brain injury (TBI). Due to the ethical limitations of ...

Concurrent EEG Recording을 통한 쥐의 Cerebrospinal Fluid and Blood Withdrawal from Rats with Concurrent EEG Recording(동시 EEG 기록이 있는 쥐의 뇌척수액 및 혈액 철수)

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure molecules of interest, such as hormones, growth factors, proteins, or small non-coding RNAs. A specific example is the sampling of biological liquids in the research of biomarkers for epilepsy. In these studies, it is desirable to compare the levels of molecules in cerebrospinal fluid (CSF) and in plasma, by withdrawing CSF and plasma in parallel and considering the time distance of the sampling from and to seizures. The combined CSF and plasma sampling, coupled with video-EEG monitoring in epileptic animals, is a promising approach for the validation of putative diagnostic and prognostic biomarkers. Here, a procedure of combined CSF withdrawal from cisterna magna and blood sampling from the lateral tail vein in epileptic rats that are continuously video-EEG monitored is described. This procedure offers significant advantages over other commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, and reduced time of anesthesia. Additionally, it can be used to obtain CSF and plasma samples in both tethered and telemetry EEG recorded rats, and it may be used repeatedly across multiple days of experiment. By minimizing the stress due to sampling by shortening isoflurane anesthesia, measures are expected to reflect more accurately the true levels of investigated molecules in biofluids. Depending on the availability of an appropriate analytical assay, this technique may be used to measure the levels of multiple, different molecules while performing EEG recording at the same time.

저자 스포트라이트: Obtaining High-quality CSF and Blood Samples for Epilepsy Biomarker Discovery(간질 바이오마커 발견을 위한 고품질 뇌척수액 및 혈액 샘플 획득) 

The protocol shows repeated cerebrospinal fluid and blood collections from epileptic rats performed in parallel with continuous video-electroencephalogram (EEG) monitoring. These are instrumental for exploring possible links between changes in various body fluid molecules and seizure activity.

EEG 기록 중 쥐의 측면 꼬리 정맥에서 뇌척수액 및 혈액 샘플링

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...

Drosophila Nervous System에서 유전자의 Poly(A) 길이를 정량화합니다.

Measurement of Poly A Tail Length from Drosophila Larva Brain and Cell Line

Polyadenylation is a crucial posttranscriptional modification that adds poly(A) tails to the 3' end of mRNA molecules. The length of the poly(A) tail is tightly regulated by cellular processes. Dysregulation of mRNA polyadenylation has been associated with abnormal gene expression and various diseases, including cancer, neurological disorders, and developmental abnormalities. Therefore, comprehending the dynamics of polyadenylation is vital for unraveling the complexities of mRNA processing and posttranscriptional gene regulation. 
This paper presents a method for measuring poly(A) tail lengths in RNA samples isolated from Drosophila larval brains and Drosophila Schneider S2 cells. We employed the guanosine/inosine (G/I) tailing approach, which involves the enzymatic addition of G/I residues at the 3' end of mRNA using yeast poly(A) polymerase. This modification protects the RNA's 3' end from enzymatic degradation. The protected full-length poly(A) tails are then reverse-transcribed using a universal antisense primer. Subsequently, PCR amplification is performed using a gene-specific oligo that targets the gene of interest, along with a universal sequence oligo used for reverse transcription. 
This generates PCR products encompassing the poly(A) tails of the gene of interest. Since polyadenylation is not a uniform modification and results in tails of varying lengths, the PCR products display a range of sizes, leading to a smear pattern on agarose gel. Finally, the PCR products are subjected to high-resolution capillary gel electrophoresis, followed by quantification using the sizes of the poly(A) PCR products and the gene-specific PCR product. This technique offers a straightforward and reliable tool for analyzing poly(A) tail lengths, enabling us to gain deeper insights into the intricate mechanisms governing mRNA regulation.

저자 스포트라이트: Poly A Tail Analysis Techniques를 통한 mRNA 연구의 지평 개척

The protocol describes an efficient and reliable method for quantifying the poly(A) length of the gene of interest from the Drosophila nervous system, which can be easily adapted to tissues or cell types from other species.

Drosophila Larva Brain and Cell Line의 Poly A 꼬리 길이 측정

Polyadenylation is a crucial posttranscriptional modification that adds poly(A) tails to the 3' end of mRNA molecules. The length of the poly(A) tail is ...