Diese Studie wurde von der Gewährung Nihm R01 und R21 MH091816 MH084043 TDG unterstützt.

1. Materialien 1. Suspension Box Der Schwanz-Suspension-Test (TST) beinhaltet das Suspendieren Mäuse über dem Boden an ihren Schwänzen. Auf der untersten Ebene, das Verfahren erfordert nur eine Suspension bar oder in einem Regal Sims, und Band. Allerdings sollte der Experimentator betrachten den Einsatz von einem Hintergrund, der optimalen Kontrast bietet. Darüber hinaus ist es ratsam, Schritte, um Mäuse aus der Beobachtung anderer Tiere, die getestet werden zu verhindern. In unserem Labor verwenden wir speziell gefertigte Aufhängung Schwanz-Boxen (Vier-Stunden-Tag, Baltimore MD), aus Kunststoff mit den Abmessungen (55 x 60 Höhe Breite x 11,5 cm Tiefe) aus. Um Tiere aus der Beobachtung oder Interaktion untereinander zu vermeiden, wird jeder Maus innerhalb des eigenen drei Wänden rechteckige Kammer (55 Höhe X 15 X 11,5 cm Breite Tiefe) suspendiert. Die Maus ist in der Mitte dieses Fach suspendiert, und die Breite und Tiefe sind ausreichend dimensioniert, so dass die Maus nicht machen coNTACT mit den Wänden. In dieser Einstellung wird die ungefähre Entfernung zwischen der Maus die Nase und die Vorrichtung Boden 20-25 cm. Es gibt vier solcher identischen Fächern in der Apparatur ermöglicht es uns, vier Mäuse in einer Zeit, zu testen. Ein Aluminium-Fahrwerk bar (1 cm. Höhe x 1 cm. Breite x 60 cm. Länge), verwendet werden, um den Schwanz jeder Maus einzustellen, ist auf der Oberseite der Box positioniert. Die Dimensionen, die wir in unserem Labor sollte als allgemeine Referenz angesehen werden. Zum Beispiel kann die Größe der einzelnen Fächer des Schwanzes-Suspension-Box erhöht werden, wenn eine große outbred Mausstamm (z. B. CD-1) verwendet wird. Am unteren Ende jedes Fach legen wir einen abnehmbaren Aluminium-Tablett, Kot oder Urin sammelt von den Tieren. Wir verwenden ein dunkelgraues Kästchen für Albino-Tiere und eine cremefarbene Box für Mäuse von anderen Farbschlägen. Diese Anordnung gibt uns einen besseren Kontrast und damit zuverlässiger Verhaltens-Scoring des Tests. 2. Band <p class= &quot;Jove_content&quot;&gt; Tape sollte sicher halten, um sowohl die Maus den Schwanz und die Suspension bar, und stark genug sein, um das Gewicht der Maus getestet (zB TimeMed Labeling Systems, Inc, Burr Ridge IL, 1,9 cm Breite) zu tragen. Allerdings sollte die Band nicht allzu klebrig da am Ende der Sitzung aus dem Schwanz entfernt werden. Wir schneiden 17 cm Fragmente von Band und setzen Sie ein Zeichen 2 cm von einem Ende. Diese 2 cm Teil wurde für die Befestigung der Band an den Schwanz verwendet, während die restlichen 15 cm für die Aussetzung der Maus verwendet wurde. 3. Timer 4. Video Aufnahmegerät Eine Videokamera und ein Stativ (oder andere Tragstruktur) benötigt. Da dieser Test in der Regel umfasst mehrere Tiere zur gleichen Zeit getestet werden Livescoring schwierig und wird nicht empfohlen. Die Videokamera sollte in hallo Rekordgh genügend Auflösung zu einer Bildqualität, die später für Verhaltens-Scoring verwendet werden rendern. Stets darauf achten, dass genügend Speicherkarten mit der Kamera vor dem Test. Wir verwenden eine Video-Kamera, die digital Datensätze ohne den Einsatz physischer Medien (zB Video-Kassette), so dass für einfache Übertragung von Videos. 5. Weißes Rauschen-Generator Der Rauschgenerator sollten Maske intermittierende Umgebungsgeräusche. Die Verwendung eines Noise-Generator ist besonders in Laborumgebungen, wo plötzliche, laute Geräusche gehört, dass würde möglicherweise erschrecken Mäusen kann empfohlen. In unseren experimentellen Raum Geräuschpegel der Umgebung (ohne das weiße Rauschen-Generator aktiviert) wird um 60 dB. Die Gesamt-Geräuschpegel mit dem weißen Rauschen-Generator an der Stelle, wo die TST durchgeführt wird aktiviert ist 70-72 dB. Allerdings ist darauf hinzuweisen, dass diese Zahlen nur als Beispiel zur Verfügung gestellt werden, und jedes Labor sollte die AuswahlRecht Geräuschpegel entsprechend ihrer einzigartigen Umgebung und Umstände. 6. Reinigungsmittel Die Suspension Box gründlich nach jeder Sitzung gelöscht werden mit einer Sterilisation Lösung (z. B. MB-10, Quip Laboratories Inc., Wilmington, DE, oder ähnliches). 7. Climbstoppers (optional: abhängig von Stamm) Mäuse von einigen Hintergründen, wie zB C57BL / 6, kann ihre Schwänze während der Test 1 zu klettern. Klare Hohlzylinder (4 cm Länge, 1,6 cm Außendurchmesser, 1,3 cm Innendurchmesser, 1,5 Gramm), die zu vier cm Länge (von FourHourDay Inc, Baltimore MD) aus Polycarbonat-Schlauch (# 8585K41, McMaster-Carr, Santa Fe Springs geschnitten werden , CA) sind rund um die Schwänze der Mäuse der Lage, diesen Schwanz Steigverhalten 2,3 verhindern. Diese Geräte können in jedem Labor mit gängigen Werkzeugen und Materialien hergestellt werden. 2. Behavioral Procedures <p class="jove_content"&gt; Die gesamte experimentelle Design widerspiegeln richtigen Ausgleich zwischen Variablen für Ihre Experimente. Zum Beispiel in unseren Experimenten versuchen wir, jede Gruppe gleich in jeden TST-Sitzung (dh, wenn es vier Behandlungsgruppen sind, jeder wird in jeder Sitzung vertreten sein) vertreten. Auch sind die Positionen von Mäusen gedreht in einer Weise, dass Mäuse aus jeder Behandlungsgruppe in eine andere Position in jeder Sitzung gesetzt werden. <ol><li> Legen Sie die Kamera in Position. Die Kamera sollte so nah wie möglich sein, um die höchstmögliche Auflösung der Tiere zu erhalten. </li><li> Tape-Fragmente, die während der Sitzung verwendet werden soll geschnitten, markiert und vorbereitet für die Sitzung. </li><li> Starten Sie das weiße Rauschen, wenn verwendet wird, bevor die Mäuse auf den Prüfraum eingebracht werden. Der Pegel des weißen Rauschens sollte nur genug, um Außengeräusche Maske. Vermeiden Sie eine hohe Lautstärke und stellen Sie sicher, das gleiche Niveau von weißem Rauschen für alle Tiere verwendet wird. </li><li> Bringen Sie den ANimals in den Testraum. Wenn der Raum, wo die Tiere leben und den Prüfraum nebeneinander mit ähnlichen Umgebungsbedingungen sind, kann keine Eingewöhnungszeit erforderlich. Andernfalls setzen Sie die Tiere in den Prüfraum für einen Zeitraum von Akklimatisation (in der Regel mindestens eine Stunde). Seien Sie sich bewusst, dass die anderen Tiere im selben Raum platziert werden können Geruchs-und Ultraschall-Signale Sinn. </li><li> Wenn ein Stamm bekannt, ihre Schwänze, wie C57BL6 / J klettern, wird statt Climbstoppers um die Schwänze verwendet vor dem Aufbringen der Band. </li><li> Halten Sie das Band an die Schwänze der Mäuse. Verwenden Sie das markierte Ende des Bandes und stellen Sie sicher, das Band hält sich an den Schwanz und auf sich selbst zurück. Das Band sollte bis zum Ende des Schwanzes mit 2-3 Millimeter Schwanz noch außerhalb des Bandes aufgebracht werden. </li><li> Nach jedem Stück Klebeband ist eine Maus Schwanz befestigt Stick den mittleren Teil des Bandes an den Innenwänden des Käfigs. Dadurch wird verhindert Kabelgewirr von Band Stücke zueinander. Beachten Sie, dass confinement auf diese Weise kann Stress verursachen und dass es wichtig ist, um den Prozess der Anwendung der Band auf jedes Tier so schnell wie möglich abzuschließen. </li><li> Sobald alle Band angewendet wird, starten Sie die Aufnahme und Identifizierung der Sitzung, bevor die Mäuse ausgesetzt sind. </li><li> Suspend die Tiere, indem das freie Ende des Bandes über die Aussetzung bar oder in einem Regal in eine Ordnung, die zwischen den Behandlungsgruppen ausgeglichen wird. Suspend-Mäuse in einer Weise, dass nicht die Erfüllung der Kamera-Ansicht, weil die gesamte TST-Sitzung werden erzielt werden und behindern die Kamera auf die Unfähigkeit führen zu Verhaltensweisen in dieser Zeit zu bewerten ist. Prüfen Sie, ob alle Band Enden sind parallel hängen, die Aussetzung bar oder in einem Regal mit einer ähnlichen Länge von slack für jeden Maus. </li><li> Am Ende der Sitzung (in der Regel 6 Minuten), Rückkehr der Tiere, ihre homecage und entfernen Sie vorsichtig das Klebeband von jedem Schwanz indem Sie es vorsichtig aus. Nicht rip das Band aus dem Schwanz da dadurch kann es zu Schmerzen an den Mic-Ursachee. </li><li> Nach der Rückkehr der Mäuse, um ihre Kolonie Zimmer verwerfen die fäkale Boli und Urin aus der Auffangwannen und wischen Sie das Gerät mit einer sterilisierenden Lösung. </li></ol> 3. Behavior Analysis <ol><li> Im Allgemeinen ist die TST von Anfang bis 6 Minuten lang zu beenden. Im Gegensatz zu anderen weit verbreiteten antidepressive Wirksamkeit Verfahren, die Forced Swim Test ist die ganze Session gewertet. Dies ist aufgrund der allgemeinen Feststellung, dass Mäuse zu manifestieren Unbeweglichkeit neigen früher in der TST. </li><li> In unserem Labor stellen wir Ihnen die Video-Dateien direkt von der Kamera an einen PC, wo die Analyse durchgeführt wird. </li><li> Während der Verhaltensanalyse der Zeit, dass jede Maus als mobile gemessen verbringt. Während es möglich ist, die Unbeweglichkeit der Zeit direkt zu messen, haben wir festgestellt, es einfacher zu erkennen und zu messen aktiven Bewegungen, anstatt das Fehlen solcher Bewegungen. </li><li> Der wichtigste Aspekt des TST Verhaltensanalyse ist die konsistente Identifikation der Bewegungs, die als bona fide Mobilität erfasst werden. Mäuse, vor allem zu Beginn der Sitzung, manifest Verhaltensweisen, die offen zu entkommen verwandt sind. Dazu zählen versuchen, die Wände des Apparates und die Suspension bar, starkes Schütteln des Körpers, und die Bewegung der Gliedmaßen ähnlich laufen zu erreichen. Diese Bewegungen stellen eindeutig Mobilität. Diese Verhaltensweisen dann nachlassen und sich subtiler. In unserem Labor kleinen Bewegungen, die die Vorderbeine beschränkt sind, jedoch ohne die Beteiligung der Hinterbeine sind nicht als Mobilität gezählt. Zudem sind die Schwingungen und Pendel wie Schaukeln, dass aufgrund der Dynamik während der frühere Beweglichkeit Kämpfe sind auch nicht als Mobilität gezählt. </li><li> In unserem Labor verwenden wir eine On-Screen-Stoppuhr-Software für Zeitmessungen (XNote Stoppuhr, dnSoft Research Group). Zwei getrennte Stoppuhren werden auf dem Bildschirm verwendet. Die erste Stoppuhr zählt von 360 Sekunden und warnt den Betrachter, wenn die Verhaltensanalyse endet. Die zweite stodurch den Beobachter-Maßnahmen die Zeit, mobilen pwatch-gesteuert. Bestimmte Stoppuhr-Software hat die Fähigkeit, Schlüssel zuordnen zu starten und zu stoppen Funktionen, so dass auf dem Bildschirm die Tastatur können Sie die Stoppuhr zu kontrollieren. Statt einer herkömmlichen Tastatur, verwenden wir ein Eingabegerät gemeinhin als &#39;Gamepad&#39;, um den Stoppuhren Steuerung bekannt. </li><li> Wenn es mehr als eine Maus getestet und auf dem Bildschirm ist es eine gute Idee, die anderen Tiere decken, so dass ihre Bewegungen nicht ablenken des Betrachters. Dies kann durch ein anderes Programm-Fenster oder durch physisch für die anderen Mäuse auf dem Bildschirm mit Papier durchgeführt werden. </li><li> Es kann einige Bias auftritt, wenn der Gesamtbetrag der Mobilität der Zeit für eine bestimmte Maus verstrichen ist sichtbar vor Abschluss der Analyse-Sitzung. Wenn ein On-Screen-Stoppuhr verwendet wird, empfehlen wir, alle, aber die Millisekunde Dezimalstellen der Stoppuhr zu decken. Durch die Abdeckung der Stoppuhr der Beobachter nur weiß, ob die Stoppuhrein-oder ausschalten zu jedem Zeitpunkt weiß aber nicht, die insgesamt verstrichene Zeit und kann daher nicht betroffen sein von jeder Voreingenommenheit. Mit diesem Ansatz den Betrachter, während blind für die Gruppenzugehörigkeit der Tiere, wird nicht über eine allgemeine Vorstellung von Maß an Mobilität in jedem Tier. </li><li> Ein Interobserver Zuverlässigkeit Test sollte für jeden neuen Beobachter durchgeführt werden, bevor Daten von Versuchstieren zu sammeln. In unserem Labor jedem neuen Beobachter ersten Uhren ein erfahrener Beobachter, während er oder sie ist Scoring. Nach den neuen Beobachter genug Vertrauen, um die Mobilität von Immobilität unterscheiden zu gewinnen, sie dann Partitur in Echtzeit mit dem erfahrenen Beobachter beobachten und darauf hingewiesen Fehler. Sobald diese Phase erfolgreich abgeschlossen ist, wird die neue Beobachter analysieren eine bestimmte Gruppe von TST Videos, die wir pflegen in unserem Labor für Schulungszwecke. Erst nach ein hohes Maß an Interobserver Korrelation mit dem erfahrenen Beobachter erhalten ist, bedeutet ein Ermittler analysieren TST Videos von den tatsächlichenExperimente. Wir archivieren die Daten aus diesen Trainings-Analysen auf einen internen Standard für das Labor darstellen. Wir haben Unterschiede zwischen den Stämmen in der Art und Weise, in der sie ausdrücken Mobilität (und Unbeweglichkeit) Verhalten und meine Unbeweglichkeit Zeit zwischen den Geschlechtern beobachtet. Wenn ein neuer Stamm, Geschlecht oder genetisch veränderte Maus-Modell im Labor getestet wird, ist es notwendig, wieder verpflichten diese Art der Zuverlässigkeitsanalyse. </li></ol> 4. Repräsentative Ergebnisse Wir haben die TST zur Antidepressiva-ähnliche Reaktionen auf Lithium-Behandlung in verschiedenen Mausstämmen (Abbildung 1) 3 zu bewerten. Experimentelle Einzelheiten dieses Experiments sind in Can et al., 2011 3 veröffentlicht. <img src="/files/ftp_upload/3769/3769fig1.jpg" alt="Abbildung 1" /> Abbildung 1. Immobilitätszeit in den Schwanz Suspensionsversuch nach chronischer Lithium-Verwaltung in fünf Inzucht-Mausstämmen. Die Mäuse wurden Gruppenhausd, vier Mäuse pro Käfig. Mäuse in der Lithium-Behandlung erhielten Lithium-chow mit 4 g / kg LiCl für drei Wochen. Kontrolltiere erhielten identische Lebensmittel ohne Lithiumchlorid. **: P &lt;0,01, ***: p &lt;0,001 bedeuten eine signifikante, ungepaarten t-Test. Die Daten sind als Mittelwert ± SEM ausgedrückt. n :10-12 Tieren pro Gruppe für jeden Stamm. (Bild von 3 wiedergegeben). In diesem Beispiel ist eine signifikante therapeutische Wirkung von chronischer Lithium in Essen geliefert nur in C57BL/6J und DBA/2J Stämme beobachtet. In den anderen drei Stämme, wurde keine statistisch signifikante Abnahme der Unbeweglichkeit der Zeit beobachtet. Diese Daten zeigen, dass eine Antidepressiva-ähnliche Reaktion auf chronische Lithium-Behandlung ist abhängig Belastung als auch mit anderen Antidepressiva 4-8 beobachtet worden.

<ol>
	<li>Mayorga, A. J., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+on+the+use+of+the+C57BL/6+mouse+in+the+tail+suspension+test.">Limitations on the use of the C57BL/6 mouse in the tail suspension test.</a> Psychopharmacology (Berl). 155, 110-112 (2001).</li><li>Dao, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mood+Disorder+Susceptibility+Gene+CACNA1C+Modifies+Mood-Related+Behaviors+in+Mice+and+Interacts+with+Sex+to+Influence+Behavior+in+Mice+and+Diagnosis+in+Humans.">Mood Disorder Susceptibility Gene CACNA1C Modifies Mood-Related Behaviors in Mice and Interacts with Sex to Influence Behavior in Mice and Diagnosis in Humans.</a> Biological Psychiatry. 68, 801-810 (2010).</li><li>Can, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+responses+to+lithium+in+genetically+diverse+mouse+strains.">Antidepressant-like responses to lithium in genetically diverse mouse strains.</a> Genes, Brain and Behavior. 10, 434-443 (2011).</li><li>Bai, F., Li, X., Clay, M., Lindstrom, T., Skolnick, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-+and+interstrain+differences+in+models+of+"behavioral+despair".">Intra- and interstrain differences in models of "behavioral despair".</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 70, 187-192 (2001).</li><li>Cervo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotype-dependent+activity+of+tryptophan+hydroxylase-2+determines+the+response+to+citalopram+in+a+mouse+model+of+depression.">Genotype-dependent activity of tryptophan hydroxylase-2 determines the response to citalopram in a mouse model of depression.</a> J. Neurosci. 25, 8165-8172 (2005).</li><li>David, D. J., Renard, C. E., Jolliet, P., Hascoet, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+forced+swimming+test.">Antidepressant-like effects in various mice strains in the forced swimming test.</a> Psychopharmacology (Berl). 166, 373-382 (2003).</li><li>Dulawa, S. C., Holick, K. A., Gundersen, B., Hen, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+chronic+fluoxetine+in+animal+models+of+anxiety+and+depression.">Effects of chronic fluoxetine in animal models of anxiety and depression.</a> Neuropsychopharmacology. 29, 1321-1330 (2004).</li><li>Lucki, I., Dalvi, A., Mayorga, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitivity+to+the+effects+of+pharmacologically+selective+antidepressants+in+different+strains+of+mice.">Sensitivity to the effects of pharmacologically selective antidepressants in different strains of mice.</a> Psychopharmacology (Berl). 155, 315-322 (2001).</li><li>Steru, L., Chermat, R., Thierry, B., Simon, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tail+suspension+test:+a+new+method+for+screening+antidepressants+in+mice.">The tail suspension test: a new method for screening antidepressants in mice.</a> Psychopharmacology (Berl). 85, 367-370 (1985).</li><li>Can, A., Dao, D. T., Arad, M., Terrillion, C. E., Piantadosi, S. C., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Mouse+Forced+Swim+Test.">The Mouse Forced Swim Test.</a> J. Vis. Exp. 58, 3791-3638 (2012).</li><li>Porsolt, R. D., Bertin, A., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+despair+in+mice:+a+primary+screening+test+for+antidepressants.">Behavioral despair in mice: a primary screening test for antidepressants.</a> Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. 229, 327-336 (1977).</li><li>Porsolt, R. D., Anton, G., Blavet, N., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioural+despair+in+rats:+a+new+model+sensitive+to+antidepressant+treatments.">Behavioural despair in rats: a new model sensitive to antidepressant treatments.</a> Eur. J. Pharmacol. 47, 379-391 (1978).</li><li>Crowley, J. J., Blendy, J. A., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain-dependent+antidepressant-like+effects+of+citalopram+in+the+mouse+tail+suspension+test.">Strain-dependent antidepressant-like effects of citalopram in the mouse tail suspension test.</a> Psychopharmacology (Berl). 183, 257-264 (2005).</li><li>Karolewicz, B., Paul, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Group+housing+of+mice+increases+immobility+and+antidepressant+sensitivity+in+the+forced+swim+and+tail+suspension+tests.">Group housing of mice increases immobility and antidepressant sensitivity in the forced swim and tail suspension tests.</a> European Journal of Pharmacology. 415, 197-201 (2001).</li><li>Lad, H. V., Liu, L., Paya-Cano, J. L., Fernandes, C., Schalkwyk, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+traits+for+the+tail+suspension+test:+automation,+optimization,+and+BXD+RI+mapping.">Quantitative traits for the tail suspension test: automation, optimization, and BXD RI mapping.</a> Mammalian. Genome. 18, 482-491 (2007).</li><li>Liu, X., Gershenfeld, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+differences+in+the+tail-suspension+test+and+its+relationship+to+imipramine+response+among+11+inbred+strains+of+mice.">Genetic differences in the tail-suspension test and its relationship to imipramine response among 11 inbred strains of mice.</a> Biol. Psychiatry. 49, 575-581 (2001).</li><li>Ripoll, N., David, D. J., Dailly, E., Hascoet, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+tail+suspension+test..">Antidepressant-like effects in various mice strains in the tail suspension test..</a> Behav. Brain. Res.. 143, 193-200 (2003).</li><li>Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+unpredictable+chronic+mild+stress+on+anxiety+and+depression-like+behavior+in+mice.">Effects of unpredictable chronic mild stress on anxiety and depression-like behavior in mice.</a> Behav. Brain. Res. 175, 43-50 (2006).</li><li>Thierry, B., Stéru, L., Simon, P., Porsolt, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tail+suspension+test:+Ethical+considerations.">The tail suspension test: Ethical considerations.</a> Psychopharmacology. 90, 284-285 (1986).</li><li>Cryan, J. F., Mombereau, C., Vassout, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tail+suspension+test+as+a+model+for+assessing+antidepressant+activity:+review+of+pharmacological+and+genetic+studies+in+mice.">The tail suspension test as a model for assessing antidepressant activity: review of pharmacological and genetic studies in mice.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 29, 571-625 (2005).</li><li>O'Leary, O. F., Cryan, J. F., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety Related Phenotypes in Mice. 42, 119-137 (2009).</li><li>Detke, M. J., Johnson, J., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+and+Chronic+Antidepressant+Drug+Treatment+in+the+Rat+Forced+Swimming+Test+Model+of+Depression.">Acute and Chronic Antidepressant Drug Treatment in the Rat Forced Swimming Test Model of Depression.</a> Experimental and Clinical Psychopharmacology. 5, 107-112 (1997).</li><li>Rupniak, N. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+depression:+challenges+from+a+drug+development+perspective.">Animal models of depression: challenges from a drug development perspective.</a> Behavioural Pharmacology. 14, 385-390 (2003).</li><li>Strekalova, T., Steinbusch, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 42, 153-176 (2009).</li><li>Bartolomucci, A., Fuchs, E., Koolhaas, J. M., Ohl, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 42, 261-275 (2009).</li><li>Samuels, B. A., Hen, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 63, 107-121 (2011).</li><li>Juszczak, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+usage+of+video+analysis+system+for+detection+of+immobility+in+the+tail+suspension+test+in+mice.">The usage of video analysis system for detection of immobility in the tail suspension test in mice.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 85, 332-338 (2006).</li><li>Crowley, J. J., Jones, O. '. L. e. a. r. y., F, O., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+tests+for+measuring+the+effects+of+antidepressants+in+mice.">Automated tests for measuring the effects of antidepressants in mice.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 78, 269-274 (2004).</li><li>Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+AMPA+receptors+in+the+antidepressant-like+effects+of+lithium+in+the+mouse+tail+suspension+test+and+forced+swim+test.">Involvement of AMPA receptors in the antidepressant-like effects of lithium in the mouse tail suspension test and forced swim test.</a> Neuropharmacology. 54, 577-587 (2008).</li><li>Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 42, (2009).</li></ol>

Autoren erklären, keine Interessenkonflikte.

Die Entwicklung des TST durch Steru et al. 9 wurde durch die bisher entwickelten Forced Swim Test 10-12 beeinflusst. Ähnlich wie bei den Forced Swim Test, in der TST-Mäuse sind in eine unausweichliche, aber mäßig belastenden Situation. Mangelnde entkommen Verhaltensweisen gilt Unbeweglichkeit. Wie die Forced Swim Test ist das TST ein Test am besten für die Bewertung der antidepressiven Wirksamkeit von Medikamenten überprüft, sondern auch verwendet, um die Auswirkungen der Umwelt-, n...

<ul><li> Band </li><li> Timer </li><li> Videokamera </li><li> White Noise Generator (optional) </li><li> Climbstoppers (optional; je nach Stamm) </li></ul>

the tail suspension test

Der Schwanz-Suspension-Test ist eine Maus Verhaltenstest sinnvoll in das Screening von potenziellen Antidepressiva, und die Beurteilung der andere Manipulationen, die voraussichtlich Depression Verhaltensweisen beeinflussen. Mäuse sind durch ihre Schwänze mit Klebeband ausgesetzt, in einer solchen Position, dass es nicht entweichen kann oder halten in der Nähe Oberflächen. Während dieses Tests in der Regel sechs Minuten Dauer werden die daraus resultierenden Flucht orientierte Verhaltensweisen quantifiziert. Der Schwanz-Suspension-Test ist ein wertvolles Werkzeug in der Wirkstoffforschung für das Hochdurchsatz-Screening von potenziellen antidepressiven Verbindungen. Hier beschreiben wir die Einzelheiten der Durchführung dieses Tests mit zusätzlichen Schwerpunkt auf potenzielle Probleme, die auftreten und wie sie vermieden werden müssen. Wir bieten auch eine Lösung für das Heck Klettern Verhalten, ein häufiges Problem, dass dieser Test nutzlos in einigen Mausstämmen macht, wie das weit verbreitete C57BL / 6. Genauer gesagt, verhindern wir tail Klettern Verhalten, indem Mäuseschwänzen durch einen kleinen Kunststoff-Zylinder vor der Aussetzung. Schließlich haben wir ausführlich, wie Sie manuell Gäste die Verhaltensweisen, die in diesem Test manifestiert sind.

Watch this Scientific Journal Video about The Tail Suspension Test at JoVE.com

The Tail Suspension Test

Der Schwanz-Suspension-Test ist als ein experimentelles Verfahren zur antidepressiven Wirksamkeit von medikamentösen Behandlungen bei Mäusen zu bewerten validiert. Mäuse sind an ihren Schwänzen für sechs Minuten unterbrochen und die Flucht Verhaltensweisen bewertet werden. Wir beschreiben die Verfahren bei der Durchführung der Schwanz Suspensionsversuch verwendet.

The Tail Suspension Test-

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

78.8K Aufrufe.  University of Maryland School of Medicine. Der Schwanz-Suspension-Test ist als ein experimentelles Verfahren zur antidepressiven Wirksamkeit von medikamentösen Behandlungen bei Mäusen zu bewerten validiert. Mäuse sind an ihren Schwänzen für sechs Minuten unterbrochen und die Flucht Verhaltensweisen bewertet werden. Wir beschreiben die Verfahren bei der Durchführung der Schwanz Suspensionsversuch verwendet.

Serie: The Tail Suspension Test

One Dimensional Turing-Like Handshake Test for Motor Intelligence

In the Turing test, a computer model is deemed to "think intelligently" if it can generate answers that are not distinguishable from those of a human. However, this test is limited to the linguistic aspects of machine intelligence. A salient function of the brain is the control of movement, and the movement of the human hand is a sophisticated demonstration of this function. Therefore, we propose a Turing-like handshake test, for machine motor intelligence. We administer the test through a telerobotic system in which the interrogator is engaged in a task of holding a robotic stylus and interacting with another party (human or artificial). Instead of asking the interrogator whether the other party is a person or a computer program, we employ a two-alternative forced choice method and ask which of two systems is more human-like. We extract a quantitative grade for each model according to its resemblance to the human handshake motion and name it "Model Human-Likeness Grade" (MHLG). We present three methods to estimate the MHLG. (i) By calculating the proportion of subjects' answers that the model is more human-like than the human; (ii) By comparing two weighted sums of human and model handshakes we fit a psychometric curve and extract the point of subjective equality (PSE); (iii) By comparing a given model with a weighted sum of human and random signal, we fit a psychometric curve to the answers of the interrogator and extract the PSE for the weight of the human in the weighted sum. Altogether, we provide a protocol to test computational models of the human handshake. We believe that building a model is a necessary step in understanding any phenomenon and, in this case, in understanding the neural mechanisms responsible for the generation of the human handshake.

We present a Turing-like Handshake test administered through a telerobotic system in which the interrogator is holding a robotic stylus and interacting with another party (human or artificial). We use a forced choice method, and extract a measure for the similarity of the artificial model to a human handshake.

One Dimensional Turing-Like Handshake-Test für motorische Intelligenz

In the Turing test, a computer model is deemed to "think intelligently" if it can generate answers that are not distinguishable from those of a human.  ...

Forschung

Neurowissenschaften

The Mouse Forced Swim Test

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental manipulations that are aimed at rendering or preventing depressive-like states. Mice are placed in an inescapable transparent tank that is filled with water and their escape related mobility behavior is measured. The forced swim test is straightforward to conduct reliably and it requires minimal specialized equipment. Successful implementation of the forced swim test requires adherence to certain procedural details and minimization of unwarranted stress to the mice. In the protocol description and the accompanying video, we explain how to conduct the mouse version of this test with emphasis on potential pitfalls that may be detrimental to interpretation of results and how to avoid them. Additionally, we explain how the behaviors manifested in the test are assessed.

The forced swim test is validated as an experimental approach to assess potential antidepressant efficacy in rodents. Experimental animals are placed in a tank of water and escape-related mobility behavior is quantified. The common procedures for the mouse version of this test are described.

Die Maus Forced Swim-Test

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental ...

The Fibular Nerve Injury Method: A Reliable Assay to Identify and Test Factors That Repair Neuromuscular Junctions

The neuromuscular junction (NMJ) undergoes deleterious structural and functional changes as a result of aging, injury and disease. Thus, it is imperative to understand the cellular and molecular changes involved in maintaining and repairing NMJs. For this purpose, we have developed a method to reliably and consistently examine regenerating NMJs in mice. This nerve injury method involves crushing the common fibular nerve as it passes over the lateral head of the gastrocnemius muscle tendon near the knee. Using 70 day old female mice, we demonstrate that motor axons begin to reinnervate previous postsynaptic targets within 7 days post-crush. They completely reoccupy their previous synaptic areas by 12 days. To determine the reliability of this injury method, we compared reinnervation rates between individual 70 day old female mice. We found that the number of reinnervated postsynaptic sites was similar between mice at 7, 9, and 12 days post-crush. To determine if this injury assay can also be used to compare molecular changes in muscles, we examined levels of the gamma-subunit of the muscle nicotinic receptor (gamma-AChR) and the muscle-specific kinase (MuSK). The gamma-AChR subunit and MuSK to are highly upregulated following denervation and return to normal levels following reinnervation of NMJs. We found a close relationship between transcript levels for these genes and innervation status of muscles. We believe that this method will accelerate our understanding of the cellular and molecular changes involved in repairing the NMJ and other synapses.

We have developed a nerve injury method to reliably examine muscle reinnervation, and thus regeneration of neuromuscular junctions in mice. This technique involves injuring the common fibular nerve via a simple and highly reproducible surgery. Muscle reinnervation in then assessed by whole-mounting the extensor digitorum longus muscle.

Die Fibula Nervenverletzung Methode: Ein zuverlässiger Test zur Identifizierung und Test Faktoren, die Reparatur neuromuskulären Synapsen

The neuromuscular junction (NMJ) undergoes deleterious structural and functional changes as a result of aging, injury and disease. Thus, it is imperative ...

Diffuse Reflectance Spectroscopy: Getting the Capillary Refill Test Under One's Thumb

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill should occur within 2 s after releasing 5 s of firm pressure (e.g., by the physician&#39;s finger) in the normal healthy supine patient. A slower refill time indicates poor skin perfusion, which can be caused by conditions including sepsis, blood loss, hypoperfusion, and hypothermia. Since its introduction, the clinical usefulness of the test has been debated. Advocates point out its feasibility and simplicity and claim that it can indicate changes in vascular status earlier than changes in vital signs such as heart rate. Critics, on the other hand, stress that the lack of standardization in how the test is performed and the highly subjective nature of the naked eye assessment, as well as the test&#39;s susceptibility to ambient factors, markedly lowers the clinical value. The aim of the present work is to describe in detail the course of the refill event and to suggest potentially more objective and exact endpoint values for the capillary refill test using diffuse polarization spectroscopy.

This protocol describes how the use of diffuse polarization spectroscopy can improve the clinical usefulness of the capillary refill test. We suggest a more detailed analysis of the course of the capillary refill in healthy volunteers using diffuse reflectance spectroscopy videos and new informatic endpoints.

Diffuse Reflexion Spektroskopie: Immer des Rekapillarisierungszeit Tests unter der Fuchtel

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill ...

Frequent Tail-tip Blood Sampling in Mice for the Assessment of Pulsatile Luteinizing Hormone Secretion

In many endocrine systems, circulating factors or hormones are not released continuously, but are secreted as a discrete pulse in response to a releasing factor. Single-point sampling measures are inadequate to fully understand the biological significance of the secretory pattern of pulsatile hormones either under normal physiologic conditions or during conditions of dysregulation. Luteinizing hormone (LH) is synthesized by the anterior pituitary gonadotrope&#160;cells and secreted in a pulsatile pattern which requires frequent collection of blood samples for pulse assessment. This has not been possible in mice until recently, due to the development of a high-sensitivity LH assay and advancement in a technique for frequent low-volume sample collection, initially described by Steyn and colleagues.1 Here we describe a protocol for the frequent peripheral blood sample collection from mice with sufficient handling acclimatization to detect pulsatile secretion of LH. The current protocol details an expanded acclimatization period that allows assessment of robust and continuous pulses of LH over multiple hours. In this protocol, the tip of the tail is clipped&#160;and blood is collected from the tail using a hand-held pipette. For assessment of pulsatile LH in gonadectomized mice, serial samples are collected every 5-6 min for 90-180 min. Importantly, the collection of blood and measurement of robust pulses of LH can be accomplished in awake, freely behaving mice, given adequate handling acclimatization and effort to minimize environmental stressors. Sufficient acclimatization can be achieved within 4-5 weeks prior to blood collection. This protocol highlights advances in the methodology to ensure collection of whole blood samples for assessment of pulsatile LH secretion patterns over multiple hours in the mouse, a powerful animal model for neuroendocrine research.

Here we present a tail-tip blood sampling protocol for frequent sample collection in unrestrained mice. This method is useful for assessing patterns of pulsatile luteinizing hormone secretion and could be adapted for analysis of other circulating factors.

Häufige Schwanzspitze Blutabnahme bei Mäusen zur Beurteilung der pulsierender Luteinisierendes Hormon-Sekretion

In many endocrine systems, circulating factors or hormones are not released continuously, but are secreted as a discrete pulse in response to a releasing ...

A Metric Test for Assessing Spatial Working Memory in Adult Rats Following Traumatic Brain Injury

Impairments to sensory, short-term, and long-term memory are common side effects after traumatic brain injury (TBI). Due to the ethical limitations of human studies, animal models provide suitable alternatives to test treatment methods, and to study the mechanisms and related complications of the condition. Experimental rodent models have historically been the most widely used due to their accessibility, low cost, reproducibility, and validated approaches. A metric test, which tests the ability to recall the placement of two objects at various distances and angles from one another, is a technique to study impairment in spatial working memory (SWM) after TBI. The significant advantages of metric tasks include the possibility of dynamic observation, low cost, reproducibility, relative ease of implementation, and low stress environment. Here, we present a metric test protocol to measure impairment of SWM in adult rats after TBI. This test provides a feasible way to evaluate physiology and pathophysiology of brain function more effectively.

Traumatic brain injury (TBI) is commonly associated with memory impairment. Here, we present a protocol to assess spatial working memory after TBI via a metric task. A metric test is a useful tool to study spatial working memory impairment after TBI.

Ein metrischer Test zur Beurteilung des räumlichen Arbeitsgedächtnisses bei erwachsenen Ratten nach traumatischer Hirnverletzung

Impairments to sensory, short-term, and long-term memory are common side effects after traumatic brain injury (TBI). Due to the ethical limitations of ...

Liquor- und Blutentnahme bei Ratten mit gleichzeitiger EEG-Aufzeichnung

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure molecules of interest, such as hormones, growth factors, proteins, or small non-coding RNAs. A specific example is the sampling of biological liquids in the research of biomarkers for epilepsy. In these studies, it is desirable to compare the levels of molecules in cerebrospinal fluid (CSF) and in plasma, by withdrawing CSF and plasma in parallel and considering the time distance of the sampling from and to seizures. The combined CSF and plasma sampling, coupled with video-EEG monitoring in epileptic animals, is a promising approach for the validation of putative diagnostic and prognostic biomarkers. Here, a procedure of combined CSF withdrawal from cisterna magna and blood sampling from the lateral tail vein in epileptic rats that are continuously video-EEG monitored is described. This procedure offers significant advantages over other commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, and reduced time of anesthesia. Additionally, it can be used to obtain CSF and plasma samples in both tethered and telemetry EEG recorded rats, and it may be used repeatedly across multiple days of experiment. By minimizing the stress due to sampling by shortening isoflurane anesthesia, measures are expected to reflect more accurately the true levels of investigated molecules in biofluids. Depending on the availability of an appropriate analytical assay, this technique may be used to measure the levels of multiple, different molecules while performing EEG recording at the same time.

Autor im Rampenlicht: Gewinnung hochwertiger Liquor- und Blutproben für die Entdeckung von Epilepsie-Biomarkern 

The protocol shows repeated cerebrospinal fluid and blood collections from epileptic rats performed in parallel with continuous video-electroencephalogram (EEG) monitoring. These are instrumental for exploring possible links between changes in various body fluid molecules and seizure activity.

Entnahme von Liquor und Blut aus der seitlichen Schwanzvene bei Ratten während EEG-Aufzeichnungen

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...

Quantifizierung der Poly(A)-Länge von Genen aus dem Drosophila-Nervensystem

Measurement of Poly A Tail Length from Drosophila Larva Brain and Cell Line

Polyadenylation is a crucial posttranscriptional modification that adds poly(A) tails to the 3' end of mRNA molecules. The length of the poly(A) tail is tightly regulated by cellular processes. Dysregulation of mRNA polyadenylation has been associated with abnormal gene expression and various diseases, including cancer, neurological disorders, and developmental abnormalities. Therefore, comprehending the dynamics of polyadenylation is vital for unraveling the complexities of mRNA processing and posttranscriptional gene regulation. 
This paper presents a method for measuring poly(A) tail lengths in RNA samples isolated from Drosophila larval brains and Drosophila Schneider S2 cells. We employed the guanosine/inosine (G/I) tailing approach, which involves the enzymatic addition of G/I residues at the 3' end of mRNA using yeast poly(A) polymerase. This modification protects the RNA's 3' end from enzymatic degradation. The protected full-length poly(A) tails are then reverse-transcribed using a universal antisense primer. Subsequently, PCR amplification is performed using a gene-specific oligo that targets the gene of interest, along with a universal sequence oligo used for reverse transcription. 
This generates PCR products encompassing the poly(A) tails of the gene of interest. Since polyadenylation is not a uniform modification and results in tails of varying lengths, the PCR products display a range of sizes, leading to a smear pattern on agarose gel. Finally, the PCR products are subjected to high-resolution capillary gel electrophoresis, followed by quantification using the sizes of the poly(A) PCR products and the gene-specific PCR product. This technique offers a straightforward and reliable tool for analyzing poly(A) tail lengths, enabling us to gain deeper insights into the intricate mechanisms governing mRNA regulation.

Autor im Rampenlicht: Erkundung der Grenzen der mRNA-Forschung mit Poly-A-Schwanz-Analysetechniken

The protocol describes an efficient and reliable method for quantifying the poly(A) length of the gene of interest from the Drosophila nervous system, which can be easily adapted to tissues or cell types from other species.

Messung der Poly-A-Schwanzlänge aus Drosophila-Larvengehirn und Zelllinien

Polyadenylation is a crucial posttranscriptional modification that adds poly(A) tails to the 3' end of mRNA molecules. The length of the poly(A) tail is ...