Bu çalışmada, hibe NIHM, R01 MH091816 ve R21 MH084043 TDG için tarafından desteklenen olmuştur.

1. Malzemeler 1. Süspansiyon Kutusu Kuyruk süspansiyon testi (TST), fareler onların kuyrukları tarafından yerden askıya içerir. En temel düzeyde, yordam, yalnızca bir süspansiyon çubuğu veya raf çıkıntı ve bant gerektirir. Ancak, deneyci optimum kontrast sağlayan bir arka plan göz önünde bulundurmalıdır. Buna ek olarak, test edilmekte olan diğer hayvanlar gözlemleyerek fareler önlemek için adımlar atması için ihtiyatlı olduğunu. Laboratuarımızda, biz plastik boyutları (yükseklik 55 X 60 genişlik X 11.5 cm derinliğinde) ile özel olarak imal kuyruk süspansiyon kutular (Dört Saat Gün, Baltimore) kullanın. Hayvanların birbirlerini gözlemleyerek ya da etkileşim önlemek amacıyla, her bir fare kendi üç duvarlı dikdörtgen bölmesi (55 yükseklik X genişlik 15 X 11.5 cm derinliğinde) içinde askıya alınır. Fare, bu bölmesinin ortasında askıya genişlik ve derinlik fare işbirliği yapamaz, böylece yeterli büyüklükteduvarları ile ntact. Bu ortamda, yaklaşık fare burun ve cihazın zemin arasındaki mesafe 20-25 cm dir. Az dört fareler bir süre test etmek için bize izin veren cihazın, dört tane aynı bölmeleri vardır. Her fare kuyruğu askıya almak için kullanılan bir alüminyum süspansiyon çubuğu (1 cm yükseklik X 1 cm genişlik x 60 cm uzunluk), kutunun üstüne konumlandırılmış. Bizim laboratuar kullandığımız boyutları genel bir referans olarak kabul edilmelidir. Örneğin, kuyruk süspansiyon kutusu ayrı bölmelere boyutu büyük bir outbred fare türünün (örneğin, CD-1) kullanıldığı takdirde artırılabilir. Her bölmesinin alt kısmında hayvanların dışkı ya da idrar toplayan çıkarılabilir alüminyum tepsi yerleştirin. Biz albino hayvanlar için bir koyu gri kutu ve diğer kat renk fareler için bir krem ​​renkli kutu kullanabilirsiniz. Bu düzenleme, daha iyi kontrast ve bu nedenle daha güvenilir bir test davranış puanlama verir. 2. Bant <p class= &quot;Jove_content&quot;&gt; Teyp fare kuyruğu ve süspansiyon çubuğu hem de güvenli bir şekilde yapışır ve fare (örneğin TimeMed Etiketleme Sistemleri, Inc, Burr Ridge, IL, 1.9 cm genişliğinde) denenmektedir ağırlığını taşıyabilecek kadar güçlü olması gerekir. Ancak, kuyruk silinecektir oturumun sonunda bu yana bant, aşırı derecede yapışkan olmamalı. Biz 17 cm bant parçaları kesilmiş ve bir uçtan bir uca bir işareti 2 cm. Kalan fare süspansiyon için kullanılan 15 cm iken, bu 2 cm&#39;lik kısmı, kuyruk bandı takmak için kullanılmıştır. 3. Timer 4. Video kayıt cihazı Bir video kamera ve tripod (ya da diğer destek yapısı) ihtiyaç vardır. Bu test, genellikle aynı anda test ediliyor birden fazla hayvanlar içerdiğinden, canlı skor zor olacak ve tavsiye edilmez. Video kamera, yüksek kayıtdavranış puanlama için daha sonra kullanılacak olan kaliteli bir resmi işlemek için yeterli çözünürlüğe gh. Her zaman teste başlamadan önce kamera yeterli kayıt hafızası var olduğundan emin olun. Biz videoları basit transferi için izin vererek, fiziksel ortam (yani video kaset) kullanmadan dijital olarak kaydeden bir video kamera kullanın. 5. Beyaz gürültü jeneratör Gürültü jeneratör aralıklı çevresel sesleri maske gerekir. Potansiyel fareler irkilme olacağını ani yüksek sesler duyulabilir laboratuvar ortamında ve bir gürültü jeneratör kullanımı özellikle tavsiye edilir. Bizim deney odasında ortam gürültü seviyesi (beyaz gürültü jeneratör olmadan aktif), 60 dB civarındadır. TST yapılan yerde aktive beyaz gürültü jeneratör ile toplam ses seviyesi 70-72 dB. Ancak, bu rakamlar sadece örnek olarak verilmiştir olduğunu kaydetti olmalı ve her laboratuar seçmelisiniz, benzersiz bir ortam ve koşullara göre sağ gürültü düzeyleri. 6. Temizleme Ürünleri Her seanstan sonra süspansiyon kutusu bir sterilizasyon solüsyonu (örneğin MB-10, nükte Laboratories Inc, Wilmington, DE, veya benzeri) ile iyice silinmelidir. 7. Climbstoppers (isteğe bağlı: suşu bağımlı kullanılan) C57BL / 6 gibi bazı kökenden, Fare, 1 test sırasında onların kuyrukları girebilirler . Polikarbonat tüp dört cm uzunluğunda (Baltimore FourHourDay Inc) (# 8585K41, McMaster-Carr, Santa Fe Springs kesilir Clear delikli silindir (4 cm uzunluğunda, dış çapı 1.6 cm, iç çapı 1,3 cm, 1,5 gram) , CA) davranış 2,3 tırmanma gibi kuyruk önlemek farelerin kuyruklarını etrafına yerleştirilir. Bu cihazlar ortak araçları ve malzemeleri ile, herhangi bir laboratuvar yapılabilir. 2. Davranış Usulleri <p class="jove_content"&gt; Genel deneysel tasarım denemenize özgü değişkenler arasındaki uygun dengeleyici yansıtmalıdır. Örneğin, bizim deneylerde eşit her TST oturumu (yani, dört tedavi grubu varsa, her oturumda temsil edilecektir) her bir grubu temsil etmek için çalışıyoruz. Ayrıca, farelerin pozisyonları her tedavi grubundaki fareler Her oturumda farklı bir konumda yerleştirilmiş böyle bir şekilde döndürülebilir. <ol><li> Pozisyonda kamera yerleştirin. Kamera hayvanların mümkün olan en yüksek çözünürlük elde etmek için mümkün olduğunca yakın olmalıdır. </li><li> Oturum sırasında kullanılacak Teyp parçaları, kesme işaretli, ve oturumu için hazırlanmış olmalıdır. </li><li> Kullanılan fareler, test odası tanıtıldı önce, beyaz gürültü jeneratörü çalıştırmak. Beyaz gürültü seviyesi sadece dış gürültüleri maskelemek için yeterli olacaktır. Yüksek ses kaçının ve beyaz gürültü ile aynı düzeyde, tüm hayvanlar için kullanıldığından emin olun. </li><li> Bir getirintest odasına imals. Hayvanların bulunduğu oda ve test odasına benzer ortam koşulları ile birbirine bitişik olan, hiçbir aklimasyonundan süre gerekli olabilir. Aksi takdirde, aklimasyonundan bir süre (genellikle en az bir saat) için test odası, hayvanları yerleştirin. Aynı odada bulunan diğer hayvanlar, koku alma ve ultrasonik ipuçları anlamda farkında olun. </li><li> C57BL6 / J gibi kuyrukları, tırmanmak için bilinen bir gerilme, bant uygulamadan önce kuyrukları etrafında yer Climbstoppers kullanılıyor ise. </li><li> Farelerin kuyruklarını bant uyun. Bant işaretli ucunu kullanın ve bant, kuyruk ve kendi üzerinde geri yapışıyor emin olun. Teyp bandı dışında kalan 2-3 milimetre kuyruk kuyruk sonuna kadar uygulanmalıdır. </li><li> Bir kere her parça bant kafesinin iç duvarlarına bandın orta kısmı sopa bir fare kuyruğu bağlı. Bu bant parçaları karışıklığı önlemek birbirlerine yardımcı olacaktır. Not cBu şekilde onfinement strese neden olur ve kısa sürede her bir hayvan için bant uygulama sürecini tamamlamak için önemlidir. </li><li> Tüm bant uygulandıktan sonra, kayıt başlangıç ​​ve fareler askıya önce oturum tanımlamak. </li><li> Tedavi grupları arasında dengeli bir düzen süspansiyon çubuğu ya da rafa bant serbest ucunu koyarak hayvanlar askıya alınması. Fareler tüm TST oturumu attı ve bu süre içinde davranışlarını değerlendirmek için kamera yetersizlik yol açacaktır tıkayan olacak çünkü kamera görüntüsü engellemez bir şekilde askıya alınması. Tüm bant biter, her bir fare için bolluk benzer bir uzunluğu ile paralel süspansiyon çubuğu ya da rafa asılı olduğunu kontrol edin. </li><li> (Bunlar normalde altı dakika) oturum sonunda, kendi homecage hayvanlar dönün ve dikkatli bir şekilde hafifçe çekerek her kuyruk bandı çıkarın. Bunu yaparken mikrofon ağrıya neden olabilir bu yana kuyruk bandı rip etmeyine. </li><li> Farelerin onların koloni odasına döndükten sonra, dışkı boli ve idrar toplama kasetlerden atmak ve cihazın sterilizasyon solüsyonu ile silin. </li></ol> 3. Davranış Analizi <ol><li> Genellikle, TST, altı dakika uzunluğunda baştan sona. Yaygın olarak kullanılan başka bir antidepresan etkinliği prosedürü aksine, zorla yüzmeye testi, tüm oturum atılırsa. Bu fareler daha önce tezahür hareketsizlik TST eğiliminde olduğunu bulma genel kaynaklanmaktadır. </li><li> Laboratuarımızda kameradan analiz yürütülen bir PC&#39;ye doğrudan video dosyalarını yüklemek. </li><li> Davranış analizi sırasında cep ölçülen her bir fare harcadığı zaman. Hareketsizlik zaman doğrudan ölçmek mümkün iken, biz daha kolay yerine bu tür hareketlerin olmaması çok aktif hareketleri algılamak ve ölçmek için bulduk. </li><li> TST davranış analizinin en önemli yönü hareketin tutarlı bir kimlikiyi niyetli bir hareketlilik olarak kaydedilmektedir var. Fareler özellikle oturumun başında, açıkça kaçmak ilgili tezahür davranışları. Bunlar, aparatın duvarlar ve süspansiyon çubuğu, vücudun güçlü sallayarak, ve çalıştıran benzeyen bacaklarda hareket ulaşmaya çalışıyorum. Bu hareketler açıkça hareketlilik oluşturmaktadır. Ve daha sonra bu davranışları azalır ince haline gelmiştir. Ön ayakları ile sınırlı ama arka ayakları katılımı olmadan hareketlilik olarak sayılmaz laboratuvar küçük hareketler. Ayrıca, momentum nedeniyle salıncaklar gibi salınımlar ve sarkaç önceki hareketlilik nöbetleri sırasında elde edilen hareketlilik de sayılmaz. </li><li> Laboratuarımızda zaman ölçümleri için ekrandaki kronometre yazılım (XNote Kronometre, dnSoft Araştırma Grubu) kullanın. İki ayrı stopwatches ekranda kullanılır. Davranışsal analiz dönemi ne zaman sona erer ilk kronometre 360 ​​saniye ve uyarılar gözlemci sayar. Ikinci stozaman cep geçirdi gözlemci önlemler pwatch kontrollü. Bazı kronometre yazılım ekranda klavye kronometre kontrolü, böylece işlevleri başlatmak ve durdurmak için tuşlar atamak için yeteneğine sahiptir. Düzenli bir klavye yerine, yaygın stopwatches kontrol etmek için bir &#39;gamepad&#39; olarak bilinen bir giriş aygıtı kullanın. </li><li> Ekranda test edilmiş ve mevcut birden fazla fare var ise, onların hareketleri gözlemcinin dikkatini dağıtmak, böylece diğer hayvanlar karşılamak için iyi bir fikirdir. Bu, başka bir program penceresini kullanarak veya fiziksel kağıt ile ekranda, diğer farelerin kapsayan tarafından gerçekleştirilebilir. </li><li> Hareketliliği süresi toplam tutarı belli bir fare için geçen analiz oturumun tamamlanmasından önce görünür olması durumunda meydana gelen bazı ön yargılar olabilir. Bir ekran kronometre kullanılması durumunda, tüm ama kronometre milisaniye ondalık kapsayacak şekilde öneririz. Kronometre kapsayan gözlemci sadece kronometre olup olmadığını biliyorancak açık veya kapalı herhangi bir noktada toplam süre herhangi bir önyargı ile geçen ve bu nedenle etkilenmiş olamaz bilmiyor. Bu yaklaşım gözlemci kullanarak, hayvanların grubu atamaları kör, her hayvan hareketlilik düzeyi hakkında genel bir fikir olmaz. </li><li> Bir gözlemciler arası güvenilirlik testi, test hayvanlardan elde edilen verileri toplamak için başlamadan önce her yeni gözlemci için yapılmalıdır. O puanlama ise Laboratuarımızda her yeni gözlemci ilk deneyimli bir gözlemci izler. Yeni gözlemcilerin hareketsizlik hareketliliği ayırt etmek için yeterli güvenini kazanmak sonra, daha sonra deneyimli bir gözlemci izliyor ve herhangi bir hata işaret ederek gerçek zamanlı olarak puan. Bu aşamada başarılı bir şekilde tamamlandıktan sonra, yeni gözlemci, eğitim amaçlı Laboratuvarımızda korumak TST videolar belirli bir analiz edecektir. Gözlemciler arası korelasyon yüksek düzeyde deneyimli gözlemci ile elde edilir sonra gerçek bir araştırmacı TST videos analizdeneyler. Biz arşiv, laboratuvar için bir iç standart teşkil edecek bu eğitim analizleri veri. Biz (ve hareket) davranışları hareketliliği ifade ve cinsiyetler arasındaki süre hareketsizlik anlamına hangi şekilde suşları arasındaki farklılıklar gözlemledik. Zorlanma, cinsiyet, ya da genetik olarak değiştirilmiş yeni bir fare modeli laboratuvarda test edildiğinde tekrar bu tür güvenirlik analizi gerçekleştirilmesi için gerekli. </li></ol> 4. Temsilcisi Sonuçlar Biz çeşitli fare suşları lityum tedavisi (Şekil 1) 3 antidepresan gibi yanıtları değerlendirmek için TST kullandık. Bu deneyde deneysel ayrıntıları Can ve ark, 2011 3 yayınlanır. <img src="/files/ftp_upload/3769/3769fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1 kendilenmiş beş fare suşlarının kronik lityum verildikten sonra kuyruk süspansiyon test Hareketsizlik zaman. Fare grup ev vardıd kafes başına dört fare. Fare lityum tedavi grubunda lityum chow üç hafta 4 gr / kg LiCl içeren aldı. Hayvanları kontrol lityum klorür olmadan aynı gıda aldı. **: P &lt;0.01, ***: p &lt;0.001 anlamlı, eşleştirilmemiş t-testi belirtmek. Veriler ortalama ± SEM olarak ifade edilir. n :10-12 grup başına hayvanların her bir suş için. (Şekil 3 çoğaltılamaz). Bu örnekte, sadece C57BL/6J ve DBA/2J suşları gıda teslim kronik lityum önemli bir tedavi etkisi görülmektedir. Diğer üç suşları, hareketsizlik sürede istatistiksel olarak anlamlı bir azalma gözlendi. Bu veriler, aynı zamanda diğer antidepresan ilaçlar 4-8 gözlenmiştir kronik lityum tedavisinin antidepresan gibi tepki bağlı zorlanma olduğunu göstermektedir.

<ol>
	<li>Mayorga, A. J., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+on+the+use+of+the+C57BL/6+mouse+in+the+tail+suspension+test.">Limitations on the use of the C57BL/6 mouse in the tail suspension test.</a> Psychopharmacology (Berl). 155, 110-112 (2001).</li><li>Dao, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mood+Disorder+Susceptibility+Gene+CACNA1C+Modifies+Mood-Related+Behaviors+in+Mice+and+Interacts+with+Sex+to+Influence+Behavior+in+Mice+and+Diagnosis+in+Humans.">Mood Disorder Susceptibility Gene CACNA1C Modifies Mood-Related Behaviors in Mice and Interacts with Sex to Influence Behavior in Mice and Diagnosis in Humans.</a> Biological Psychiatry. 68, 801-810 (2010).</li><li>Can, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+responses+to+lithium+in+genetically+diverse+mouse+strains.">Antidepressant-like responses to lithium in genetically diverse mouse strains.</a> Genes, Brain and Behavior. 10, 434-443 (2011).</li><li>Bai, F., Li, X., Clay, M., Lindstrom, T., Skolnick, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-+and+interstrain+differences+in+models+of+"behavioral+despair".">Intra- and interstrain differences in models of "behavioral despair".</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 70, 187-192 (2001).</li><li>Cervo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotype-dependent+activity+of+tryptophan+hydroxylase-2+determines+the+response+to+citalopram+in+a+mouse+model+of+depression.">Genotype-dependent activity of tryptophan hydroxylase-2 determines the response to citalopram in a mouse model of depression.</a> J. Neurosci. 25, 8165-8172 (2005).</li><li>David, D. J., Renard, C. E., Jolliet, P., Hascoet, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+forced+swimming+test.">Antidepressant-like effects in various mice strains in the forced swimming test.</a> Psychopharmacology (Berl). 166, 373-382 (2003).</li><li>Dulawa, S. C., Holick, K. A., Gundersen, B., Hen, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+chronic+fluoxetine+in+animal+models+of+anxiety+and+depression.">Effects of chronic fluoxetine in animal models of anxiety and depression.</a> Neuropsychopharmacology. 29, 1321-1330 (2004).</li><li>Lucki, I., Dalvi, A., Mayorga, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitivity+to+the+effects+of+pharmacologically+selective+antidepressants+in+different+strains+of+mice.">Sensitivity to the effects of pharmacologically selective antidepressants in different strains of mice.</a> Psychopharmacology (Berl). 155, 315-322 (2001).</li><li>Steru, L., Chermat, R., Thierry, B., Simon, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tail+suspension+test:+a+new+method+for+screening+antidepressants+in+mice.">The tail suspension test: a new method for screening antidepressants in mice.</a> Psychopharmacology (Berl). 85, 367-370 (1985).</li><li>Can, A., Dao, D. T., Arad, M., Terrillion, C. E., Piantadosi, S. C., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Mouse+Forced+Swim+Test.">The Mouse Forced Swim Test.</a> J. Vis. Exp. 58, 3791-3638 (2012).</li><li>Porsolt, R. D., Bertin, A., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+despair+in+mice:+a+primary+screening+test+for+antidepressants.">Behavioral despair in mice: a primary screening test for antidepressants.</a> Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. 229, 327-336 (1977).</li><li>Porsolt, R. D., Anton, G., Blavet, N., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioural+despair+in+rats:+a+new+model+sensitive+to+antidepressant+treatments.">Behavioural despair in rats: a new model sensitive to antidepressant treatments.</a> Eur. J. Pharmacol. 47, 379-391 (1978).</li><li>Crowley, J. J., Blendy, J. A., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain-dependent+antidepressant-like+effects+of+citalopram+in+the+mouse+tail+suspension+test.">Strain-dependent antidepressant-like effects of citalopram in the mouse tail suspension test.</a> Psychopharmacology (Berl). 183, 257-264 (2005).</li><li>Karolewicz, B., Paul, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Group+housing+of+mice+increases+immobility+and+antidepressant+sensitivity+in+the+forced+swim+and+tail+suspension+tests.">Group housing of mice increases immobility and antidepressant sensitivity in the forced swim and tail suspension tests.</a> European Journal of Pharmacology. 415, 197-201 (2001).</li><li>Lad, H. V., Liu, L., Paya-Cano, J. L., Fernandes, C., Schalkwyk, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+traits+for+the+tail+suspension+test:+automation,+optimization,+and+BXD+RI+mapping.">Quantitative traits for the tail suspension test: automation, optimization, and BXD RI mapping.</a> Mammalian. Genome. 18, 482-491 (2007).</li><li>Liu, X., Gershenfeld, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+differences+in+the+tail-suspension+test+and+its+relationship+to+imipramine+response+among+11+inbred+strains+of+mice.">Genetic differences in the tail-suspension test and its relationship to imipramine response among 11 inbred strains of mice.</a> Biol. Psychiatry. 49, 575-581 (2001).</li><li>Ripoll, N., David, D. J., Dailly, E., Hascoet, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+tail+suspension+test..">Antidepressant-like effects in various mice strains in the tail suspension test..</a> Behav. Brain. Res.. 143, 193-200 (2003).</li><li>Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+unpredictable+chronic+mild+stress+on+anxiety+and+depression-like+behavior+in+mice.">Effects of unpredictable chronic mild stress on anxiety and depression-like behavior in mice.</a> Behav. Brain. Res. 175, 43-50 (2006).</li><li>Thierry, B., Stéru, L., Simon, P., Porsolt, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tail+suspension+test:+Ethical+considerations.">The tail suspension test: Ethical considerations.</a> Psychopharmacology. 90, 284-285 (1986).</li><li>Cryan, J. F., Mombereau, C., Vassout, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tail+suspension+test+as+a+model+for+assessing+antidepressant+activity:+review+of+pharmacological+and+genetic+studies+in+mice.">The tail suspension test as a model for assessing antidepressant activity: review of pharmacological and genetic studies in mice.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 29, 571-625 (2005).</li><li>O'Leary, O. F., Cryan, J. F., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety Related Phenotypes in Mice. 42, 119-137 (2009).</li><li>Detke, M. J., Johnson, J., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+and+Chronic+Antidepressant+Drug+Treatment+in+the+Rat+Forced+Swimming+Test+Model+of+Depression.">Acute and Chronic Antidepressant Drug Treatment in the Rat Forced Swimming Test Model of Depression.</a> Experimental and Clinical Psychopharmacology. 5, 107-112 (1997).</li><li>Rupniak, N. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+depression:+challenges+from+a+drug+development+perspective.">Animal models of depression: challenges from a drug development perspective.</a> Behavioural Pharmacology. 14, 385-390 (2003).</li><li>Strekalova, T., Steinbusch, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 42, 153-176 (2009).</li><li>Bartolomucci, A., Fuchs, E., Koolhaas, J. M., Ohl, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 42, 261-275 (2009).</li><li>Samuels, B. A., Hen, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 63, 107-121 (2011).</li><li>Juszczak, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+usage+of+video+analysis+system+for+detection+of+immobility+in+the+tail+suspension+test+in+mice.">The usage of video analysis system for detection of immobility in the tail suspension test in mice.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 85, 332-338 (2006).</li><li>Crowley, J. J., Jones, O. '. L. e. a. r. y., F, O., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+tests+for+measuring+the+effects+of+antidepressants+in+mice.">Automated tests for measuring the effects of antidepressants in mice.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 78, 269-274 (2004).</li><li>Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+AMPA+receptors+in+the+antidepressant-like+effects+of+lithium+in+the+mouse+tail+suspension+test+and+forced+swim+test.">Involvement of AMPA receptors in the antidepressant-like effects of lithium in the mouse tail suspension test and forced swim test.</a> Neuropharmacology. 54, 577-587 (2008).</li><li>Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mood and Anxiety related phenotypes in mice: Characterization using behavioral tests. 42, (2009).</li></ol>

Yazarlar Çıkar çatışması beyan ederim.

Steru ark TST Kalkınma 9 daha önce geliştirilen zorla yüzmeye testi 10-12 etkilenmiştir. TST farelerde zorla yüzmeye testi, kaçınılmaz ama orta derecede stresli bir durumda yerleştirilir. Eksikliği, hareketsizlik kaçış ilgili davranış olarak kabul edilir. Zorunlu yüzme testi gibi, TST, antidepresan ilaçların etkinliğinin değerlendirilmesi için en iyi valide test, ancak, aynı zamanda çevresel, nörobiyolojik ve genetik manipülasyonlar 13-18 etkilerini de?...

<ul><li> Bant </li><li> Timer </li><li> Video Kamera </li><li> White Noise Jeneratör (isteğe bağlı) </li><li> Climbstoppers (isteğe bağlı; suşu kullanılmaktadır üzerine bağlı) </li></ul>

the tail suspension test

Tail-süspansiyon test tarama potansiyel antidepresan ilaçlar yararlı bir fare davranış testi ve depresyon ile ilgili davranışlarını etkilemesi beklenmektedir diğer manipülasyonlar değerlendirilmesi. Fareler kaçmak ya da yakındaki yüzeylere tutmayın ki böyle bir konumda, teyp onların kuyrukları tarafından askıya alınır. Bu test sırasında, tipik olarak altı dakika süre içinde ortaya çıkan kaçış yönelik davranışları sayısal vardır. Tail-süspansiyon test ilaç keşfi prospektif antidepresan bileşiklerinin yüksek verimli tarama için değerli bir araçtır. Burada, biz, ortaya çıkabilir ve bunları önlemek için nasıl potansiyel sorunlar hakkında ek vurgu ile bu testin uygulanması için gerekli ayrıntılar anlatılmaktadır. Biz de yaygın olarak kullanılan C57BL / 6 gibi kuyruk tırmanma davranışına bir çözüm, ortak bir sorun, bazı fare suşları bu testi işe yaramaz hale getirir. Özellikle, küçük bir plastik ile fare kuyrukları geçerek kuyruk tırmanma davranışları önlemekönce süspansiyon silindir. Son olarak, ayrıntılarıyla nasıl bu test tecelli davranışları elle puan.

Watch this Scientific Journal Video about The Tail Suspension Test at JoVE.com

The Tail Suspension Test

Tail-süspansiyon test farelerde antidepresan ilaç tedavilerinin etkinliğini değerlendirmek için deneysel bir prosedür olarak onaylanmıştır. Fareler altı dakika için onların kuyrukları tarafından askıya alınır ve kaçış ilgili davranışlar değerlendirilmektedir. Biz kuyruk süspansiyon test yürütülmesinde kullanılan yöntem açıklanmaktadır.

Kuyruk Süspansiyon Testi

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

78.8K Görüntüleme.  University of Maryland School of Medicine. Tail-süspansiyon test farelerde antidepresan ilaç tedavilerinin etkinliğini değerlendirmek için deneysel bir prosedür olarak onaylanmıştır. Fareler altı dakika için onların kuyrukları tarafından askıya alınır ve kaçış ilgili davranışlar değerlendirilmektedir. Biz kuyruk süspansiyon test yürütülmesinde kullanılan yöntem açıklanmaktadır.

Video: The Tail Suspension Test

One Dimensional Turing-Like Handshake Test for Motor Intelligence

In the Turing test, a computer model is deemed to "think intelligently" if it can generate answers that are not distinguishable from those of a human. However, this test is limited to the linguistic aspects of machine intelligence. A salient function of the brain is the control of movement, and the movement of the human hand is a sophisticated demonstration of this function. Therefore, we propose a Turing-like handshake test, for machine motor intelligence. We administer the test through a telerobotic system in which the interrogator is engaged in a task of holding a robotic stylus and interacting with another party (human or artificial). Instead of asking the interrogator whether the other party is a person or a computer program, we employ a two-alternative forced choice method and ask which of two systems is more human-like. We extract a quantitative grade for each model according to its resemblance to the human handshake motion and name it "Model Human-Likeness Grade" (MHLG). We present three methods to estimate the MHLG. (i) By calculating the proportion of subjects' answers that the model is more human-like than the human; (ii) By comparing two weighted sums of human and model handshakes we fit a psychometric curve and extract the point of subjective equality (PSE); (iii) By comparing a given model with a weighted sum of human and random signal, we fit a psychometric curve to the answers of the interrogator and extract the PSE for the weight of the human in the weighted sum. Altogether, we provide a protocol to test computational models of the human handshake. We believe that building a model is a necessary step in understanding any phenomenon and, in this case, in understanding the neural mechanisms responsible for the generation of the human handshake.

We present a Turing-like Handshake test administered through a telerobotic system in which the interrogator is holding a robotic stylus and interacting with another party (human or artificial). We use a forced choice method, and extract a measure for the similarity of the artificial model to a human handshake.

Motor İstihbarat Bir Boyutlu Turing Gibi El Sıkışma Testi

In the Turing test, a computer model is deemed to "think intelligently" if it can generate answers that are not distinguishable from those of a human.  ...

Nörobilim

The Mouse Forced Swim Test

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental manipulations that are aimed at rendering or preventing depressive-like states. Mice are placed in an inescapable transparent tank that is filled with water and their escape related mobility behavior is measured. The forced swim test is straightforward to conduct reliably and it requires minimal specialized equipment. Successful implementation of the forced swim test requires adherence to certain procedural details and minimization of unwarranted stress to the mice. In the protocol description and the accompanying video, we explain how to conduct the mouse version of this test with emphasis on potential pitfalls that may be detrimental to interpretation of results and how to avoid them. Additionally, we explain how the behaviors manifested in the test are assessed.

The forced swim test is validated as an experimental approach to assess potential antidepressant efficacy in rodents. Experimental animals are placed in a tank of water and escape-related mobility behavior is quantified. The common procedures for the mouse version of this test are described.

Fare Zorla Swim Testi

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental ...

The Fibular Nerve Injury Method: A Reliable Assay to Identify and Test Factors That Repair Neuromuscular Junctions

The neuromuscular junction (NMJ) undergoes deleterious structural and functional changes as a result of aging, injury and disease. Thus, it is imperative to understand the cellular and molecular changes involved in maintaining and repairing NMJs. For this purpose, we have developed a method to reliably and consistently examine regenerating NMJs in mice. This nerve injury method involves crushing the common fibular nerve as it passes over the lateral head of the gastrocnemius muscle tendon near the knee. Using 70 day old female mice, we demonstrate that motor axons begin to reinnervate previous postsynaptic targets within 7 days post-crush. They completely reoccupy their previous synaptic areas by 12 days. To determine the reliability of this injury method, we compared reinnervation rates between individual 70 day old female mice. We found that the number of reinnervated postsynaptic sites was similar between mice at 7, 9, and 12 days post-crush. To determine if this injury assay can also be used to compare molecular changes in muscles, we examined levels of the gamma-subunit of the muscle nicotinic receptor (gamma-AChR) and the muscle-specific kinase (MuSK). The gamma-AChR subunit and MuSK to are highly upregulated following denervation and return to normal levels following reinnervation of NMJs. We found a close relationship between transcript levels for these genes and innervation status of muscles. We believe that this method will accelerate our understanding of the cellular and molecular changes involved in repairing the NMJ and other synapses.

We have developed a nerve injury method to reliably examine muscle reinnervation, and thus regeneration of neuromuscular junctions in mice. This technique involves injuring the common fibular nerve via a simple and highly reproducible surgery. Muscle reinnervation in then assessed by whole-mounting the extensor digitorum longus muscle.

Fibula Sinir Yaralanması Yöntem: Güvenilir Testi tanımak ve Test O Tamir Nöromüsküler Junctions Faktörleri

The neuromuscular junction (NMJ) undergoes deleterious structural and functional changes as a result of aging, injury and disease. Thus, it is imperative ...

Diffuse Reflectance Spectroscopy: Getting the Capillary Refill Test Under One's Thumb

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill should occur within 2 s after releasing 5 s of firm pressure (e.g., by the physician&#39;s finger) in the normal healthy supine patient. A slower refill time indicates poor skin perfusion, which can be caused by conditions including sepsis, blood loss, hypoperfusion, and hypothermia. Since its introduction, the clinical usefulness of the test has been debated. Advocates point out its feasibility and simplicity and claim that it can indicate changes in vascular status earlier than changes in vital signs such as heart rate. Critics, on the other hand, stress that the lack of standardization in how the test is performed and the highly subjective nature of the naked eye assessment, as well as the test&#39;s susceptibility to ambient factors, markedly lowers the clinical value. The aim of the present work is to describe in detail the course of the refill event and to suggest potentially more objective and exact endpoint values for the capillary refill test using diffuse polarization spectroscopy.

This protocol describes how the use of diffuse polarization spectroscopy can improve the clinical usefulness of the capillary refill test. We suggest a more detailed analysis of the course of the capillary refill in healthy volunteers using diffuse reflectance spectroscopy videos and new informatic endpoints.

Diffüz yansıma spektroskopisi: bir parmağının altında kılcal damar yeniden doldurmak Test alma

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill ...

Frequent Tail-tip Blood Sampling in Mice for the Assessment of Pulsatile Luteinizing Hormone Secretion

In many endocrine systems, circulating factors or hormones are not released continuously, but are secreted as a discrete pulse in response to a releasing factor. Single-point sampling measures are inadequate to fully understand the biological significance of the secretory pattern of pulsatile hormones either under normal physiologic conditions or during conditions of dysregulation. Luteinizing hormone (LH) is synthesized by the anterior pituitary gonadotrope&#160;cells and secreted in a pulsatile pattern which requires frequent collection of blood samples for pulse assessment. This has not been possible in mice until recently, due to the development of a high-sensitivity LH assay and advancement in a technique for frequent low-volume sample collection, initially described by Steyn and colleagues.1 Here we describe a protocol for the frequent peripheral blood sample collection from mice with sufficient handling acclimatization to detect pulsatile secretion of LH. The current protocol details an expanded acclimatization period that allows assessment of robust and continuous pulses of LH over multiple hours. In this protocol, the tip of the tail is clipped&#160;and blood is collected from the tail using a hand-held pipette. For assessment of pulsatile LH in gonadectomized mice, serial samples are collected every 5-6 min for 90-180 min. Importantly, the collection of blood and measurement of robust pulses of LH can be accomplished in awake, freely behaving mice, given adequate handling acclimatization and effort to minimize environmental stressors. Sufficient acclimatization can be achieved within 4-5 weeks prior to blood collection. This protocol highlights advances in the methodology to ensure collection of whole blood samples for assessment of pulsatile LH secretion patterns over multiple hours in the mouse, a powerful animal model for neuroendocrine research.

Here we present a tail-tip blood sampling protocol for frequent sample collection in unrestrained mice. This method is useful for assessing patterns of pulsatile luteinizing hormone secretion and could be adapted for analysis of other circulating factors.

Pulsatil luteinizan hormon salgısı değerlendirilmesi için kuyruk ucu kan örnekleme farelerde sık

In many endocrine systems, circulating factors or hormones are not released continuously, but are secreted as a discrete pulse in response to a releasing ...

A Metric Test for Assessing Spatial Working Memory in Adult Rats Following Traumatic Brain Injury

Impairments to sensory, short-term, and long-term memory are common side effects after traumatic brain injury (TBI). Due to the ethical limitations of human studies, animal models provide suitable alternatives to test treatment methods, and to study the mechanisms and related complications of the condition. Experimental rodent models have historically been the most widely used due to their accessibility, low cost, reproducibility, and validated approaches. A metric test, which tests the ability to recall the placement of two objects at various distances and angles from one another, is a technique to study impairment in spatial working memory (SWM) after TBI. The significant advantages of metric tasks include the possibility of dynamic observation, low cost, reproducibility, relative ease of implementation, and low stress environment. Here, we present a metric test protocol to measure impairment of SWM in adult rats after TBI. This test provides a feasible way to evaluate physiology and pathophysiology of brain function more effectively.

Traumatic brain injury (TBI) is commonly associated with memory impairment. Here, we present a protocol to assess spatial working memory after TBI via a metric task. A metric test is a useful tool to study spatial working memory impairment after TBI.

Travmatik Beyin Hasarından Sonra Yetişkin Sıçanlarda Mekansal Çalışma Belleğini Değerlendirmek için Bir Metrik Test

Impairments to sensory, short-term, and long-term memory are common side effects after traumatic brain injury (TBI). Due to the ethical limitations of ...

Eş Zamanlı EEG Kaydı ile Sıçanlardan Beyin Omurilik Sıvısı ve Kan Çekilmesi

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure molecules of interest, such as hormones, growth factors, proteins, or small non-coding RNAs. A specific example is the sampling of biological liquids in the research of biomarkers for epilepsy. In these studies, it is desirable to compare the levels of molecules in cerebrospinal fluid (CSF) and in plasma, by withdrawing CSF and plasma in parallel and considering the time distance of the sampling from and to seizures. The combined CSF and plasma sampling, coupled with video-EEG monitoring in epileptic animals, is a promising approach for the validation of putative diagnostic and prognostic biomarkers. Here, a procedure of combined CSF withdrawal from cisterna magna and blood sampling from the lateral tail vein in epileptic rats that are continuously video-EEG monitored is described. This procedure offers significant advantages over other commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, and reduced time of anesthesia. Additionally, it can be used to obtain CSF and plasma samples in both tethered and telemetry EEG recorded rats, and it may be used repeatedly across multiple days of experiment. By minimizing the stress due to sampling by shortening isoflurane anesthesia, measures are expected to reflect more accurately the true levels of investigated molecules in biofluids. Depending on the availability of an appropriate analytical assay, this technique may be used to measure the levels of multiple, different molecules while performing EEG recording at the same time.

Yazar Spotlight: Epilepsi Biyobelirteç Keşfi için Yüksek Kaliteli BOS ve Kan Örnekleri Alma 

The protocol shows repeated cerebrospinal fluid and blood collections from epileptic rats performed in parallel with continuous video-electroencephalogram (EEG) monitoring. These are instrumental for exploring possible links between changes in various body fluid molecules and seizure activity.

EEG Kayıtları Sırasında Sıçanlarda Lateral Kuyruk Veninden Beyin Omurilik Sıvısı ve Kan Örneği Alınması

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...

Drosophila Sinir Sisteminden Genlerin Poli(A) Uzunluğunun Ölçülmesi

Measurement of Poly A Tail Length from Drosophila Larva Brain and Cell Line

Polyadenylation is a crucial posttranscriptional modification that adds poly(A) tails to the 3' end of mRNA molecules. The length of the poly(A) tail is tightly regulated by cellular processes. Dysregulation of mRNA polyadenylation has been associated with abnormal gene expression and various diseases, including cancer, neurological disorders, and developmental abnormalities. Therefore, comprehending the dynamics of polyadenylation is vital for unraveling the complexities of mRNA processing and posttranscriptional gene regulation. 
This paper presents a method for measuring poly(A) tail lengths in RNA samples isolated from Drosophila larval brains and Drosophila Schneider S2 cells. We employed the guanosine/inosine (G/I) tailing approach, which involves the enzymatic addition of G/I residues at the 3' end of mRNA using yeast poly(A) polymerase. This modification protects the RNA's 3' end from enzymatic degradation. The protected full-length poly(A) tails are then reverse-transcribed using a universal antisense primer. Subsequently, PCR amplification is performed using a gene-specific oligo that targets the gene of interest, along with a universal sequence oligo used for reverse transcription. 
This generates PCR products encompassing the poly(A) tails of the gene of interest. Since polyadenylation is not a uniform modification and results in tails of varying lengths, the PCR products display a range of sizes, leading to a smear pattern on agarose gel. Finally, the PCR products are subjected to high-resolution capillary gel electrophoresis, followed by quantification using the sizes of the poly(A) PCR products and the gene-specific PCR product. This technique offers a straightforward and reliable tool for analyzing poly(A) tail lengths, enabling us to gain deeper insights into the intricate mechanisms governing mRNA regulation.

Yazar Spotlight: Poly A Kuyruk Analiz Teknikleri ile mRNA Araştırmasının Sınırını Keşfetmek

The protocol describes an efficient and reliable method for quantifying the poly(A) length of the gene of interest from the Drosophila nervous system, which can be easily adapted to tissues or cell types from other species.

Drosophila Larva Beyin ve Hücre Hattından Poli A Kuyruk Uzunluğunun Ölçülmesi

Polyadenylation is a crucial posttranscriptional modification that adds poly(A) tails to the 3' end of mRNA molecules. The length of the poly(A) tail is ...