עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהמוסד הלאומי לבריאות בארה&quot;ב, המכון הלאומי למדעי הרפואה הכללית (R01GM063075) לבין המרכז הלאומי לרפואה משלימה ואלטרנטיבית (R01AT05076).

1. הקמת מודל החיה של אלח דם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעכברים מורדמים עם קטמין (75 מ&quot;ג / ק&quot;ג, תוך שרירית, IM) ו xylazine (10 מ&quot;ג / ק&quot;ג, IM), והניח במצב שכיבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תקן את הרגליים של העכבר עם קלטת כדי להבטיח עמדה יציבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנקות את הבטן עם 3 סקראבס מתחלפים של בבטאדין או חיטוי העור באלכוהול אחרים. ואז, לעשות חתך קו האמצע 15 מ&quot;מ לחשוף cecum. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ולקשור cecum עם תפר משי 4-0 מ&quot;מ על כ 5.0 מקצה cecal ולאחר מכן לנקב את הגדם cecal ligated פעם עם מחט 22-מד לאפשר שיחול על שרפרף. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Cecum מוחלף מיד בחזרה למצב נורמלי התוך בטני שלו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לסגור את האתר חתך בשתי שכבות, קודם כל לסגור את שרירי הבטן עם התפרים נספגים, ואז לסגור את העור עם קליפים הפצע או התפרים nonabsorbable. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחיות העכבר פתרון 0.5 מ&quot;ל תמיסת מלח נורמלית אחת לעשותSE של imipenem (0.5 מ&quot;ג / העכבר, תת עורי) מיד לאחר סיום ההליך הכירורגי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להחזיר את העכבר חזרה לכלוב נקי עם גישה חופשית למזון ומים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ב CLP נקודות שונות זמן ההודעה, תמצית צמחים או רכיב מנוהל intraperitoneally. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הישרדות בעלי חיים מנוטרת במשך יותר משבועיים. בעלי חיים הגוססת המציגים קשיים הניצבים, נשימה האגונאלית, ניוון שרירים קשה ודימומים בלתי מבוקרת צריך להרדים משאיפת פחמן דו חמצני מנת יתר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חשוב לציין כי במחזור רמות ציטוקינים הם פרמטרים חשובים במחקרים אלה. משככי כאבים שונים הוכחו להשפיע על שחרור ציטוקין ופעילויות, ולכן היה למנוע בכוונה בטיפול לאחר הניתוח. </li></ol> 2. הכנת תמצית צמחית <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תמצית צמחי מרפא במים חמים (85 מעלות צלזיוס) במשך 1-4 שעות (1 שעה על עלים, ו 4 שעות של השורשים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בצנטריפוגה מים כךחלק luble (3300 גרם, 20 דק &#39;, 4 ° C) להסיר חלקיקים מסיסים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תסנין חלק supernatant דרך פילטר 0.2 מיקרומטר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חלק ברור מסיסים במים תסנין הוא אז מופרדים על ידי ultrafiltration באמצעות Centriprep YM-10 מסנן צנטריפוגלי (מס. 4305, Millipore). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כתוצאה נמוכות (פחות מ 10 KDA) גבוהה (&gt; 10 KDA) שברים בעלי משקל מולקולרי (MWF) מוקרנים על HMGB1 עיכוב פעילות באמצעות תרבויות מקרופאג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הממשל Intraperitoneal של HMGB1 עיכוב תמצית או רכיבים צמחיים לאחר 24 שעות הודעה CLP להערכת היעילות הטיפולית שלהם. </li></ol> 3. מקרופאג הצפק בידוד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Thioglycollate מרק (4%, 2.0 מ&quot;ל) מנוהל intraperitoneally לעכברים רגילים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקרופאגים הצפק ראשיים נקצרים לאחר 3 ימים כפי שתואר קודם 10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקרופאגים הם מראש בתרבית DMEM בינוני (Gibco BRL, גרנד איילנד, ניו יורק) בתוספת 10% בסרום שור עוברית (FBS), 2 mmol / L גלוטמין, ו 1% פניצילין. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקרופאגים חסיד נשטפים בעדינות, ולא בתרבית, סרום ללא OPTI-MEM אני בינונית שעתיים לפני גירוי עם רעלן פנימי חיידקי (lipopolysaccharide, תקליטים, החיידק 0111: B4, Sigma-Aldrich). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר 16 שעות לאחר גירוי LPS, רמות HMGB1 במדיום תרבות נקבעים על ידי ניתוח סופג המערבי 11. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עוצמת הלהקה יחסית היה לכמת באמצעות תמונה NIH 1.59 התוכנה כדי לקבוע HMGB1 רמות תוך התייחסות עקומות סטנדרטיות שנוצר עם מטוהרים HMGB1. </li></ol> 4. נציג תוצאות 1. CLP גורם לדלקת מערכתית המקומית. בתוך כמה שעות של ניתוח CLP, בעלי חיים מפגינים סימנים קליניים של אלח דם הכוללות piloerection, עייפות, מצטופפים, וירידה בצריכת מזון ומים. בעלי חיים מתפתחות הצפק חמורה עם מערכתית ברציפותזיהום בדרך כלל מתים תוך 48-96 שעות. עם זאת, גם גיל, מין, ועל רקע גנטי מתאימים בעלי החיים יכולים להגיב CLP הניתוח באופן להבחין במהלך אלח דם ניסיונית. למשל, ב 48 שעות שלאחר CLP, ואילו בעלי חיים מסוימים פנו המדינה הגוססת (כהגדרתו איור 1), אחרים עשויים להישאר במצב לא גוססת. סקרים מקיפים של ציטוקינים במחזור גילה הבדלים משמעותיים ברמות של ציטוקינים שונים (למשל, IL-6, KC, MIP-2, ו sTNFR1) בין עכברים מדינות דועכות ולא גוסס (איור 1) 12. יש לציין, מתווכים דלקתיים אלה סווגו כסמנים של פונדקאית אלח דם בגלל רמות במחזור שלהם הם מנבאים שניתן לסמוך על התוצאה הקטלנית של הניסוי 12-14 או אלח דם קליני 15. בנוסף, CLP הנגרמת גם מהדורה מקומית של ציטוקינים תומכי ואנטי דלקתיות כמוקינים שונים. למשל, ב48 שעות הודעה CLP, כמויות משמעותיות של ציטוקינים (כגון IL-6) ו כמוקינים (KC ו MIP-2) עדיין יכול להימדד לא רק מערכתית בדם, אלא גם באופן מקומי בנוזל שטיפה הצפק (איור 2). 2. ההקרנה HMGB1 עיכוב תמצית או רכיבים צמחיים. שימוש תרבויות מקרופאג, היינו יכולים להעריך את היכולות של תמצית צמחית או רכיבים שונים עיכוב שחרור HMGB1 רעלן פנימי המושרה (איור 3). לאור יכולתם בהודעה HMGB1 עיכוב, אנחנו עוד בחנו את יעילותם של אלח דם החיה מודלים. בהתחשב קינטיקה המאוחרות וממושכת של הצטברות HMGB1 של אלח דם ניסיוני 8, המנה הראשונה של HMGB1 מעכבי קיבל 24 שעות לאחר תחילת אלח דם - נקודת זמן שבו העכברים פיתחו סימנים ברורים של אלח דם ובכלל זה, עייפות piloerection שלשולים. כפי שמוצג באיור 4, עיכב מינהל חוזרות ונשנות של מרכזי תה ירוק גomponent, epigallocatechin-3-gallate (EGCG), החל ב 24 שעות לאחר תחילתה של אלח דם, באופן משמעותי להציל עכברים של אלח דם קטלני 12. גם כאשר ניתנת דרך הפה, עכברים שניצלו-EGCG עדיין אלח דם קטלני, להגדיל באופן משמעותי בשיעורי ההישרדות של בעלי חיים מ% 16-44% 16. זה יהיה חשוב כדי לקבוע אם טיפולים קומבינטוריים עם רכיבים צמחיים שונים יכולים להשיג הגנה טובה יותר משמעותית במודלים של בעלי חיים של אלח דם. יחדיו, אלה נתוני הניסוי תוקף את הגישה שלנו סוכני מסך טיפוליות חדשניות תוך שימוש במודל חיה של אלח דם CLP-Induced. 5. נציג תוצאות <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/3926/3926fig1.jpg" /> באיור 1. רמות במחזור של סמנים פונדקאית הם באופן משמעותי יותר אצל בעלי חיים ספיגה מתקרבים המדינה הגוססת. Balb / C עכברים היו נתונים אלח דם על ידי CLP פיקוח על הפיתוח של סימני מחלה. בבשלב מאוחר של אלח דם (52 שעות הודעה CLP), הדם נאסף 3 עכברים נורמליים (-CLP), 3 עכברים ספיגה מתקרבים המדינה גוססת, ו -3 עכברים ספיגה במצב לא גוססת. סרום היה אספו מכל קבוצה, ו assayed עבור פרופיל ציטוקינים על ידי מערכי נוגדנים. שים לב להבדל דרמטי את רמות היחסי של סמנים פונדקאית אחדים בין קבוצות שונות. מעובד מתוך דוי: 10.1371/journal.pone.0001153.g006 באישור כמובן מאליו את הספר. <img alt="איור 2" src="/files/ftp_upload/3926/3926fig2.jpg" /> איור 2. זיהוי של ציטוקינים כמוקינים מקומיים מערכתית בגיל 48 משאבי אנוש הודעה CLP. Balb / C עכברים היו נתונים אלח דם על ידי CLP, נוזל הדם או הצפק נבצרו ב 48 שעות שלאחר CLP. הרמות היחסיות של ציטוקינים כמה כמוקינים בנוזל שטיפה נקווה סרום או הצפק נמדדו על ידי מערכי נוגדנים ציטוקינים, והביע כיחידות שרירותיים (AU). כפקדי, דם נוזל הצפק SAmples התקבלו מבעלי חיים בריאים רגילים (-CLP) ללא laparotomy. <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/3926/3926fig3.jpg" /> איור 3. מרכיב צמחים במינון dependently עכבות רעלן פנימי הנגרמת שחרור HMGB1 בתרבויות מקרופאג ראשוניים. ראשיים מקרופאגים הצפק Murine היו מגורה עם LPS בהעדר או נוכחות של רכיב צמחי (למשל, EGCG, 15 מיקרומטר). לאחר 16 שעות לאחר גירוי LPS, רמות HMGB1 במדיום תרבות נקבעו על ידי ניתוח סופג המערבי. מעובד מתוך דוי: 10.1371/journal.pone.0001153.g006 באישור כמובן מאליו את הספר. <img alt="איור 4" src="/files/ftp_upload/3926/3926fig4.jpg" /> באיור 4. מרכיב צמחים הציל עכברים מן אלח דם קטלני. Balb / C עכברים היו נתונים אלח דם קטלני על ידי CLP, ורכיב צמחים (EGCG) היה intraperitoneally מנוהל על 24, 48, +72 שעות לכתוב את התחלתה של אלח דם.הישרדות imal היה פיקוח לתקופה של עד שבועיים. שיטת Kaplan-Meier שימש להשוות את ההבדלים בשיעורי התמותה בין הקבוצות. * P &lt;0.05 לעומת מלוחים. מעובד מתוך דוי: 10.1371/journal.pone.0001153.g006 באישור כמובן מאליו את הספר.

<ol>
	<li>Wichterman, K. A., Baue, A. E., Chaudry, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sepsis+and+septic+shock--a+review+of+laboratory+models+and+a+proposal.">Sepsis and septic shock--a review of laboratory models and a proposal.</a> J. Surg. Res. 29, 189-201 (1980).</li><li>Baker, C. C., Chaudry, I. H., Gaines, H. O., Baue, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+factors+affecting+mortality+rate+after+sepsis+in+a+murine+cecal+ligation+and+puncture+model.">Evaluation of factors affecting mortality rate after sepsis in a murine cecal ligation and puncture model.</a> Surgery. 94, 331-335 (1983).</li><li>Hubbard, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cecal+ligation+and+puncture.">Cecal ligation and puncture.</a> Shock. 24, 52-57 (2005).</li><li>Akira, S., Takeda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+signalling.">Toll-like receptor signalling.</a> Nat. Rev. Immunol. 4, 499-511 (2004).</li><li>Baggiolini, M., Loetscher, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines+in+inflammation+and+immunity.">Chemokines in inflammation and immunity.</a> Immunol. Today. 21, 418-420 (2000).</li><li>Balkwill, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytokines--soluble+factors+in+immune+responses.">Cytokines--soluble factors in immune responses.</a> Curr. Opin. Immunol. 1, 241-249 (1988).</li><li>Wang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HMG-1+as+a+late+mediator+of+endotoxin+lethality+in+mice.">HMG-1 as a late mediator of endotoxin lethality in mice.</a> Science. 285, 248-251 (1999).</li><li>Yang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversing+established+sepsis+with+antagonists+of+endogenous+high-mobility+group+box+1.">Reversing established sepsis with antagonists of endogenous high-mobility group box 1.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101, 296-301 (2004).</li><li>Qin, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+HMGB1+in+apoptosis-mediated+sepsis+lethality.">Role of HMGB1 in apoptosis-mediated sepsis lethality.</a> J. Exp. Med. 203, 1637-1642 (2006).</li><li>Ray, A., Dittel, B. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+Mouse+Peritoneal+Cavity+Cells.">Isolation of Mouse Peritoneal Cavity Cells.</a> J. Vis. Exp. (35), e1488 (2010).</li><li>Rendon-Mitchell, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IFN-gamma+Induces+High+Mobility+Group+Box+1+Protein+Release+Partly+Through+a+TNF-Dependent+Mechanism.">IFN-gamma Induces High Mobility Group Box 1 Protein Release Partly Through a TNF-Dependent Mechanism.</a> J. Immunol. 170, 3890-3897 (2003).</li><li>Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Major+Ingredient+of+Green+Tea+Rescues+Mice+from+Lethal+Sepsis+Partly+by+Inhibiting+HMGB1.">A Major Ingredient of Green Tea Rescues Mice from Lethal Sepsis Partly by Inhibiting HMGB1.</a> PLoS ONE. 2, e1153 (2007).</li><li>Osuchowski, M. F., Welch, K., Siddiqui, J., Remick, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+cytokine/inhibitor+profiles+reshape+the+understanding+of+the+SIRS/CARS+continuum+in+sepsis+and+predict+mortality.">Circulating cytokine/inhibitor profiles reshape the understanding of the SIRS/CARS continuum in sepsis and predict mortality.</a> J. Immunol. 177, 1967-1974 (2006).</li><li>Heuer, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+protein+C+and+other+biomarkers+as+predictors+of+mortality+in+a+rat+cecal+ligation+and+puncture+model+of+sepsis.">Evaluation of protein C and other biomarkers as predictors of mortality in a rat cecal ligation and puncture model of sepsis.</a> Crit. Care. Med. 32, 1570-1578 (2004).</li><li>Bozza, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytokine+profiles+as+markers+of+disease+severity+in+sepsis:+a+multiplex+analysis.">Cytokine profiles as markers of disease severity in sepsis: a multiplex analysis.</a> Crit. Care. 11, R49 (2007).</li><li>Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EGCG+stimulates+autophagy+and+reduces+cytoplasmic+HMGB1+levels+in+endotoxin-stimulated+macrophages.">EGCG stimulates autophagy and reduces cytoplasmic HMGB1 levels in endotoxin-stimulated macrophages.</a> Biochem. Pharmacol. 81, 1152-1163 (2011).</li><li>Beutler, B., Milsark, I. W., Cerami, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Passive+immunization+against+cachectin/tumor+necrosis+factor+protects+mice+from+lethal+effect+of+endotoxin.">Passive immunization against cachectin/tumor necrosis factor protects mice from lethal effect of endotoxin.</a> Science. 229, 869-871 (1985).</li><li>Tracey, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-cachectin/TNF+monoclonal+antibodies+prevent+septic+shock+during+lethal+bacteraemia.">Anti-cachectin/TNF monoclonal antibodies prevent septic shock during lethal bacteraemia.</a> Nature. 330, 662-664 (1987).</li><li>Eskandari, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-tumor+necrosis+factor+antibody+therapy+fails+to+prevent+lethality+after+cecal+ligation+and+puncture+or+endotoxemia.">Anti-tumor necrosis factor antibody therapy fails to prevent lethality after cecal ligation and puncture or endotoxemia.</a> J. Immunol. 148, 2724-2730 (1992).</li><li>Ziegler, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+gram-negative+bacteremia+and+septic+shock+with+HA-1A+human+monoclonal+antibody+against+endotoxin.+A+randomized,+double-blind,+placebo-controlled+trial.+The+HA-1A+Sepsis+Study+Group.">Treatment of gram-negative bacteremia and septic shock with HA-1A human monoclonal antibody against endotoxin. A randomized, double-blind, placebo-controlled trial. The HA-1A Sepsis Study Group.</a> N. Engl. J. Med. 324, 429-436 (1991).</li><li>Ziegler, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+gram-negative+bacteremia+and+shock+with+human+antiserum+to+a+mutant+Escherichia+coli.">Treatment of gram-negative bacteremia and shock with human antiserum to a mutant Escherichia coli.</a> N. Engl. J. Med. 307, 1225-1230 (1982).</li><li>Abraham, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+monoclonal+antibody+to+human+tumor+necrosis+factor+alpha+in+patients+with+sepsis+syndrome.+A+randomized,+controlled,+double-blind,+multicenter+clinical+trial.+TNF-alpha+MAb+Sepsis+Study+Group.">Efficacy and safety of monoclonal antibody to human tumor necrosis factor alpha in patients with sepsis syndrome. A randomized, controlled, double-blind, multicenter clinical trial. TNF-alpha MAb Sepsis Study Group.</a> JAMA. 273, 934-941 (1995).</li><li>Cohen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adjunctive+therapy+in+sepsis:+a+critical+analysis+of+the+clinical+trial+programme.">Adjunctive therapy in sepsis: a critical analysis of the clinical trial programme.</a> Br. Med. Bull. 55, 212-225 (1999).</li><li>Dellinger, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surviving+Sepsis+Campaign:+international+guidelines+for+management+of+severe+sepsis+and+septic+shock:+2008.">Surviving Sepsis Campaign: international guidelines for management of severe sepsis and septic shock: 2008.</a> Crit. Care Med. 36, 296-327 (2008).</li><li>Wang, H., Zhu, S., Zhou, R., Li, W., Sama, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+potential+of+HMGB1-targeting+agents+in+sepsis.">Therapeutic potential of HMGB1-targeting agents in sepsis.</a> Expert. Rev. Mol. Med. 10, e32 (2008).</li><li>Wang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+aqueous+extract+of+a+popular+herbal+nutrient+supplement,+Angelica+sinensis,+protects+mice+against+lethal+endotoxemia+and+sepsis.">The aqueous extract of a popular herbal nutrient supplement, Angelica sinensis, protects mice against lethal endotoxemia and sepsis.</a> J. Nutr. 136, 360-365 (2006).</li><li>Li, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cardiovascular+drug+rescues+mice+from+lethal+sepsis+by+selectively+attenuating+a+late-acting+proinflammatory+mediator,+high+mobility+group+box+1.">A cardiovascular drug rescues mice from lethal sepsis by selectively attenuating a late-acting proinflammatory mediator, high mobility group box 1.</a> J. Immunol. 178, 3856-3864 (2007).</li><li>Fukuyama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mixed+bacterial+infection+model+of+sepsis+in+rabbits+and+its+application+to+evaluate+superantigen-adsorbing+device.">Mixed bacterial infection model of sepsis in rabbits and its application to evaluate superantigen-adsorbing device.</a> Blood Purif. 23, 119-127 (2005).</li></ol>

AES ו HW הם שיתוף ממציאי בקשות לפטנטים הקשורים HMGB1 מעכבי (tanshinones) כסוכני טיפולית פוטנציאל אלח דם.

במעבדה, במודלים של בעלי חיים שונים של אלח דם כבר מועסק על מנת להבין את הפתוגנזה של אלח דם כדי לפתח טיפולים חדשים פוטנציאליים. הרלוונטיות הקלינית שלהם נשאר נושא לוויכוח לפני התרגום המוצלח של מחקרים בבעלי חיים לתוך יישומים קליניים של אלח דם. למרות נוגדנים מנטרלים נגד ציטוקינים הראשונות (למשל, TNF) היו מגן במודלים של בעלי חיים endotoxemia / בקטרמיה 17,18, הם למעשה להחמיר הישרדות במודל חיה של אלח דם 19. כמו כן, רוב אנטי TNF סוכנים לא הצליחו להראות יעילות בניסויים קליניים של אלח דם 20-22. כישלון זה משקף באופן חלקי על המורכבות של מנגנוני פתוגניים הבסיסית של אלח דם 23,24. בנוסף, הוא יכול להיות גם לייחס החסרונות בבחירה של: 1) מטרות טיפוליות האפשריים או סמים; 2) במינונים אופטימליים והעיתוי של תרופות, ו -3) לא מציאותיים מדדי התוצאה קליניים (כגון שיעורי תמותה) 25. </p&gt; התגלית האחרונה של תמצית-HMGB1 מיקוד צמחים / רכיבים, כולל 26 Danggui, תה ירוק 12,16, ו 27 Danshen סיפקה דוגמאות מוצלחות של פרה המעסיקים חקירה במודלים של בעלי חיים של אלח דם. חקירה נוספת בתחום זה יהיה לשפוך אור נוסף על מפלי המולקולריים שבבסיס רגולציה של התגובה החיסונית המולדת, ולספק רמזים לפיתוח הרפוי של מחלות דלקתיות שונות. כאשר 1 הקמת CLP במעבדה שלך, מאמץ צריך להיעשות כדי לבצע את הליך הניתוח במהירות ובדיוק האפשרי כדי להבטיח שחזור, במיוחד כאשר באמצעות מספר גדול (30-40) של עכברים להשוות את שיעורי ההישרדות בין קבוצות הניסוי מספר הניסוי. שימוש ארוך טווח הרדמה (כגון קטמין ו xylazine) מאפשר לנו להשלים את הליך כירורגי CLP על מספר רב של עכברים בלוח זמנים קצר יחסית, ובינתיים לעזורלהסיר השונות במינון הפוטנציאל התרחשו לעתים קרובות כאשר באמצעות הרדמה נדיפים. שיעורי ההישרדות וצבירה ציטוקינים מערכתית יכולה להיחשב סימנים של ביצוע מוצלח של הליך CLP. דגם CLP נעשה שימוש נרחב מכרסמים בגלל יתרונות ברורים של עלות נמוכה, פשטות הליך כירורגי, ונרחבת פתולוגיים, אימונולוגיות, אפיונים פיזיולוגיים. עם זאת, ישנן מספר מגבלות CLP העכבר מודל 1-3. למשל, כמו כל במודלים של בעלי חיים, פער המינים מודגשת על ידי העובדה כי קשירת cecal בלי לנקב עלולה להיות קטלנית בעכברים אדם אבל לא. יתר על כן, בגלל גודלו הקטן של העכבר התייבשות לאחר CLP, לעתים קרובות קשה להשיג דגימות דם הסידורי של המדידה ציטוקינים. חסרונות אלה ניתן להתגבר באופן חלקי על ידי הקמת מודלים CLP בבעלי חיים גדולים יותר 2,3,27,28. בנוסף, חשוב לציין כי שיעורי תמותהאת התקדמות דלקת הצפק במכרסמים נקבעים במידה רבה לפי כמות שחול שרפרף, אשר מושפעים מד המחט פעם לנקב cecum, מספר דקירות, בנפח כולל של cecum ligated ואת צמיגות הצואה 2, 3. בנוסף, מינון ותדירות מתן אנטיביוטיקה בשלב מוקדם של CLP יכול להשפיע גם על שיעורי התמותה. לבסוף, החי והסביבה הדיור יכול גם לתרום השונות של שיעורי התמותה.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td></tr><tr><td> בבטאדין </td><td> פרדו מוצרים LP </td><td> 25655-41-8 </td></tr><tr><td> imipenem </td><td> Merck &amp; Co, Inc </td><td> 9882821 </td></tr><tr><td> קטמין HCl </td><td> Hospira בע&quot;מ </td><td> RL-0065 </td></tr><tr><td> Xylazine </td><td> לויד מעבדות </td><td> 4821 </td></tr><tr><td> Autoclip </td><td> בקטון דיקינסון </td><td> 427631 </td></tr><tr><td> משי 4-0 תפר </td><td> Roboz </td><td> SUT-15-2 </td></tr><tr><td> Surflo צנתר IV </td><td> Terumo </td><td> SR * OX2419CA </td></tr><tr><td> ציטוקינים RayBio העכבר נוגדנים מערך </td><td> RayBiotech, Inc </td><td> עאם, CYT-3 </td></tr><tr><td> Thioglycollate </td><td> בקטון דיקינסון </td><td> 211716 </td></tr></tbody></table>

use of animal model of sepsis to evaluate novel herbal therapies

אלח דם מתייחס תסמונת תגובה דלקתית מערכתית עקב זיהום מיקרוביאלי. זה היה מדומה שגרתי אצל בעלי חיים על ידי טכניקות שונות, כולל עירוי של הרעלן החיידקי אקסוגני (endotoxemia) או חיידקים (בקטרמיה), כמו גם ניקוב כירורגי של cecum ידי קשירת cecal ו לנקב (CLP) 1-3. CLP מאפשר שפיכה חיידקים וזיהום צואתי של חלל הצפק, מחקה את המחלה הקלינית של דלקת התוספתן האנושי דיברטיקוליטיס או מחורר. חומרת אלח דם, כפי שהיא משתקפת שיעורי התמותה הסופי, ניתן לשלוט בניתוח על ידי שינוי גודל של המחט משמש לנקב cecal 2. אצל בעלי חיים, CLP גורם hemodynamic דומה, biphasic התגובות לב, חילוף חומרים, ואת מערכת החיסון כפי שנצפה במהלך קליני של אלח דם האדם 3. לכן, המודל CLP נחשב אחד הדגמים הכי רלוונטיות קלינית של אלח דם ניסיוני 1-3. &lt;/ P&gt; במודלים של בעלי חיים שונים שימשו להבהיר את המנגנונים המורכבים העומדים בבסיס הפתוגנזה של אלח דם ניסיונית. התוצאה הקטלנית של אלח דם נובע בין השאר הצטברות יתר של ציטוקינים הראשונים (כגון TNF, IL-1 ו-IFN-γ) 4-6 ו מתווכים מעודדי דלקת מאוחר (למשל, HMGB1) 7. לעומת ציטוקינים מעודדי דלקת מוקדם, מאוחר טווח מתווכים יש חלון טיפולי רחב יותר עבור יישומים קליניים. למשל, הממשל עיכוב של HMGB1-נוגדנים מנטרלים החל 24 שעות לאחר CLP, עדיין להציל עכברים מן הקטלניות 8,9, הקמת HMGB1 כמתווך מאוחר של אלח דם קטלני. גילוי HMGB1 כמתווך מאוחר טווח יזמה תחום חדש של חקירה לפיתוח טיפולים אלח דם באמצעות מסורתית בצמחי מרפא סיניים. במאמר זה נתאר תהליך של אלח דם CLP-Induced, ואת השימוש בו בהקרנת צמחי מרפא עבור HMGB1 במיקוד טיפולים.

Watch this Scientific Journal Video about Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies at JoVE.com

Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies

אלח דם מתייחס תסמונת תגובה דלקתית מערכתית עקב זיהום מיקרוביאלי, והוא יכול להיות מדומה על ידי טכניקה כירורגית כינה קשירת לנקב cecal ו (CLP). כאן אנו מתארים שיטה להשתמש CLP-Induced מודל החיה למסך צמחי מרפא עבור סוכני טיפולית.

שימוש במודל של בעלי חיים אלח דם להערכת טיפולים צמחים רומן

Sepsis refers to a systemic inflammatory response syndrome resulting from a microbial infection. It has been routinely simulated in animals by several ...

use-of-animal-model-of-sepsis-to-evaluate-novel-herbal-therapies

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

19.3K Views.  North Shore – LIJ Health System. אלח דם מתייחס תסמונת תגובה דלקתית מערכתית עקב זיהום מיקרוביאלי, והוא יכול להיות מדומה על ידי טכניקה כירורגית כינה קשירת לנקב cecal ו (CLP). כאן אנו מתארים שיטה להשתמש CLP-Induced מודל החיה למסך צמחי מרפא עבור סוכני טיפולית.

Video: Use of Animal Model of Sepsis to Evaluate Novel Herbal Therapies

The CYP2D6 Animal Model: How to Induce Autoimmune Hepatitis in Mice

Autoimmune hepatitis is a rare but life threatening autoimmune disease of the liver of unknown etiology1,2. In the past many attempts have been made to generate an animal model that reflects the characteristics of the human disease 3-5. However, in various models the induction of disease was rather complex and often hepatitis was only transient3-5. Therefore, we have developed a straightforward mouse model that uses the major human autoantigen in type 2 autoimmune hepatitis (AIH-2), namely hCYP2D6, as a trigger6. Type 1 liver-kidney microsomal antibodies (LKM-1) antibodies recognizing hCYP2D6 are the hallmark of AIH-27,8. Delivery of hCYP2D6 into wildtype FVB or C57BL/6 mice was by an Adenovirus construct (Ad-2D6) that ensures a direct delivery of the triggering antigen to the liver. Thus, the ensuing local inflammation generates a fertile field9 for the subsequent development of autoimmunity. A combination of intravenous and intraperitoneal injection of Ad-2D6 is the most effective route to induce a long-lasting autoimmune damage to the liver (section 1). Here we provide a detailed protocol on how autoimmune liver disease is induced in the CYP2D6 model and how the different aspects of liver damage can be assessed. First, the serum levels of markers indicating hepatocyte destruction, such as aminotransferases, as well as the titers of hCYP2D6 antibodies are determined by sampling blood retroorbitaly (section 2). Second, the hCYP2D6-specific T cell response is characterized by collecting lymphocytes from the spleen and the liver. In order to obtain pure liver lymphocytes, the livers are perfused by PBS via the portal vein (section 3), digested in collagen and purified over a Percoll gradient (section 4). The frequency of hCYP2D6-specific T cells is analyzed by stimulation with hCYP2D6 peptides and identification of IFN&gamma;-producing cells by flow cytometry (section 5). Third, cellular infiltration and fibrosis is determined by immunohistochemistry of liver sections (section 6). Such analysis regimen has to be conducted at several times after initiation of the disease in order to prove the chronic nature of the model. The magnitude of the immune response characterized by the frequency and activity of hCYP2D6-specific T and/or B cells and the degree of the liver damage and fibrosis have to be assessed for a subsequent evaluation of possible treatments to prevent, delay or abrogate the autodestructive process of the liver.

Infection of mice with an Adenovirus expressing the major human autoantigen cytochrome P450 2D6 (hCYP2D6) recognized by sera of patients suffering from type 2 autoimmune hepatitis results in a persistent form of autoimmune-mediated liver disease characterized by extensive hepatitis, fibrosis and generation of a CYP2D6-specific immune response.

CYP2D6 מודל החיה: כיצד לגרום דלקת כבד אוטואימונית עכברים

Autoimmune hepatitis is a rare but life threatening autoimmune disease of the liver of unknown etiology1,2. In the past many attempts have been made to ...

A Mouse Tumor Model of Surgical Stress to Explore the Mechanisms of Postoperative Immunosuppression and Evaluate Novel Perioperative Immunotherapies

Surgical resection is an essential treatment for most cancer patients, but surgery induces dysfunction in the immune system and this has been linked to the development of metastatic disease in animal models and in cancer patients. Preclinical work from our group and others has demonstrated a profound suppression of innate immune function, specifically NK cells in the postoperative period and this plays a major role in the enhanced development of metastases following surgery. Relatively few animal studies and clinical trials have focused on characterizing and reversing the detrimental effects of cancer surgery. Using a rigorous animal model of spontaneously metastasizing tumors and surgical stress, the enhancement of cancer surgery on the development of lung metastases was demonstrated. In this model, 4T1 breast cancer cells are implanted in the mouse mammary fat pad. At day 14 post tumor implantation, a complete resection of the primary mammary tumor is performed in all animals. A subset of animals receives additional surgical stress in the form of an abdominal nephrectomy. At day 28, lung tumor nodules are quantified. When immunotherapy was given immediately preoperatively, a profound activation of immune cells which prevented the development of metastases following surgery was detected. While the 4T1 breast tumor surgery model allows for the simulation of the effects of abdominal surgical stress on tumor metastases, its applicability to other tumor types needs to be tested. The current challenge is to identify safe and promising immunotherapies in preclinical mouse models and to translate them into viable perioperative therapies to be given to cancer surgery patients to prevent the recurrence of metastatic disease.

A mouse tumor model of surgical stress is used to explore how postoperative immune suppression promotes metastatic disease and to evaluate immunostimulatory perioperative therapies.

מודל גידול מאוס של מתח כירורגי כדי לחקור את המנגנונים של דיכוי מערכת חיסוני לאחר ניתוח והערכת immunotherapies Perioperative רומן

Surgical resection is an essential treatment for most cancer patients, but surgery induces dysfunction in the immune system and this has been linked to ...

Bioluminescence Imaging of an Immunocompetent Animal Model for Glioblastoma

In contrast to commonly reported human glioma xenograft animal models, GL261 murine glioma xenografts recapitulate nearly all relevant clinical and histopathologic features of the human disease. When GL261 cells are implanted intracranially in syngeneic C57BL/6 mice, the model has the added advantage of maintaining an intact immune microenvironment. Stable expression of luciferase in GL261 cells allows non-invasive cost effective bioluminescence monitoring of intracranial tumor growth. We have recently demonstrated that luciferase expression in GL261 cells does not affect the tumor growth properties, tumor cell immunomodulatory cytokine expression, infiltration of immune cells into the tumor, or overall survival of animals bearing the intracranial tumor. Therefore, it appears that the GL261 luciferase glioma model can be useful in the study of novel chemotherapeutic and immunotherapeutic modalities. Here we report the technique for generating stable luciferase expression in GL261 cells and how to study the in vitro and in vivo growth of the tumor cells by bioluminescence imaging.

GL261 glioma cells provide a useful immunocompetent animal model of glioblastoma. The goals of this protocol are to demonstrate proper techniques for monitoring intracranial tumor growth using in vivo bioluminescence imaging, and to verify the utility of luciferase-modified GL261 cells for studying tumor immunology and immunotherapeutic approaches for treating glioblastoma.

הדמיה פליטת אור של דגם עם מערכת חיסון בבעלי חיים לגליובלסטומה

In contrast to commonly reported human glioma xenograft animal models, GL261 murine glioma xenografts recapitulate nearly all relevant clinical and ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been introduced as a method to evaluate and modify organ function. NEVLP has many advantages in comparison to hypothermic and subnormothermic perfusion including reduced preservation injury, restoration of normal organ function under physiologic conditions, assessment of organ performance, and as a platform for organ repair, remodeling, and modification. Both murine and porcine NEVLP models have been described. We demonstrate a rat model of NEVLP and use this model to show one of its important applications &#8212; the use of a therapeutic molecule added to liver perfusate. Catalase is an endogenous reactive oxygen species (ROS) scavenger and has been demonstrated to decrease ischemia-reperfusion in the eye, brain, and lung. Pegylation has been shown to target catalase to the endothelium. Here, we added pegylated-catalase (PEG-CAT) to the base perfusate and demonstrated its ability to mitigate liver preservation injury. An advantage of our rodent NEVLP model is that it is inexpensive in comparison to larger animal models. A limitation of this study is that it does not currently include post-perfusion liver transplantation. Therefore, prediction of the function of the organ post-transplantation cannot be made with certainty. However, the rat liver transplant model is well established and certainly could be used in conjunction with this model. In conclusion, we have demonstrated an inexpensive, simple, easily replicable NEVLP model using rats. Applications of this model can include testing novel perfusates and perfusate additives, testing software designed for organ evaluation, and experiments designed to repair organs.

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

There is a significant liver donor shortage, and criteria for liver donors have been expanded. Normothermic ex vivo liver perfusion (NEVLP) has been developed to evaluate and modify organ function. This study demonstrates a rat model of NEVLP and tests the ability of pegylated-catalase, to mitigate liver preservation injury.

מודל בעלי חיים קטנים של זלוף הכבד Normothermic Vivo לשעבר

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Contractility איזומטרי מדידה של עורק מצע המעי העליון העכבר באמצעות חוט Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Novel Methods for Intranasal Administration Under Inhalation Anesthesia to Evaluate Nose-to-Brain Drug Delivery

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain barrier. However, there have been few reports regarding not only the quantitative analysis but also optimal administration conditions and dosing regimens for investigations of nose-to-brain delivery. The limited progress in research on nose-to-brain pathway mechanisms using rodents represents a significant impediment in terms of designing nose-to-brain delivery systems for candidate drugs.
To gain some headway in this regard, we developed and evaluated two novel methods of stable intranasal administration under inhalation anesthesia for experimental animals. We also describe a method for the evaluation of drug distribution levels in the brain via the nose-to-brain pathway using radio-labeled [14C]-inulin (molecular weight: 5,000) as a model substrate of water-soluble macromolecules.
Initially, we developed a pipette-based intranasal administration protocol using temporarily openable masks, which enabled us to perform reliable administration to animals under stable anesthesia. Using this system, [14C]-inulin could be delivered to the brain with little experimental error.
We subsequently developed an intranasal administration protocol entailing reverse cannulation from the airway side through the esophagus, which was developed to minimize the effects of mucociliary clearance (MC). This technique led to significantly higher levels of [14C]-inulin, which was quantitatively detected in the olfactory bulb, cerebrum, and medulla oblongata, than the pipette method. This appears to be because retention of the drug solution in the nasal cavity was substantially increased by active administration using a syringe pump in a direction opposite to the MC into the nasal cavity.
In conclusion, the two methods of intranasal administration developed in this study can be expected to be extremely useful techniques for evaluating pharmacokinetics in rodents. The reverse cannulation method, in particular, could be useful for evaluating the full potential of nose-to-brain delivery of drug candidates.

Here, we describe two novel methods of stable intranasal administration under inhalation anesthesia with minimal physical stress for experimental animals. We also describe a method for quantitative evaluation of drug distribution levels in the brain via the nose-to-brain pathway using radiolabeled [14C]-inulin as a model substrate of water-soluble macromolecules.

הרומן שיטות לניהול תוך-אפי בהרדמה אינהלציה כדי להעריך את האף-אל-מוח תרופות

Intranasal administration has been reported to be a potential pathway for nose-to-brain delivery of therapeutic agents that circumvents the blood-brain ...

Functional Assessment of the Donor Heart During Ex Situ Perfusion: Insights from Pressure-Volume Loops and Surface Echocardiography

Heart transplantation remains the gold standard treatment for advanced heart failure. However, the current critical organ shortage has resulted in the allocation of a growing number of donor hearts with extended criteria. These marginal grafts are associated with a high risk of primary graft failure and may benefit from ex situ perfusion before transplant. This technology allows for extended organ preservation using warm oxygenated blood perfusion with continuous metabolic monitoring. The only NESP device currently available for clinical practice perfuses the organ in an unloaded non-working state, which does not allow for functional assessment of the beating heart. We therefore developed an original platform of NESP in working mode conditions with adjustment of left ventricular preload and afterload. This protocol was applied in porcine hearts. Ex situ functional assessment of the heart was achieved with intracardiac conductance catheterization and surface echocardiography. Along with a description of the experimental protocol, we herein report the main results, as well as pearls and pitfalls associated with the acquisition of pressure-volume loops and myocardial power during NESP. Correlations between hemodynamic findings and ultrasound variables are of major interest, especially for further rehabilitation of donor hearts before transplantation. This protocol aims to improve the assessment of donor hearts to both increase the donor pool and reduce the incidence of primary graft failure.

Functional Assessment of the Donor Heart During Ex Situ Perfusion: Insights from Pressure-Volume Loops and Surface Echocardiography

A reliable noninvasive approach for functional assessment of the donor heart during normothermic ex situ heart perfusion (NESP) is lacking. We herein describe a protocol for ex situ assessment of myocardial performance using the epicardial echocardiography and conductance catheter method.

הערכה תפקודית של הלב התורם במהלך זליגת Ex Situ : תובנות מלולאות לחץ-נפח ואקוקרדיוגרפיה של פני השטח

Heart transplantation remains the gold standard treatment for advanced heart failure. However, the current critical organ shortage has resulted in the ...

Partial Sciatic Nerve Ligation: A Mouse Model of Chronic Neuropathic Pain to Study the Antinociceptive Effect of Novel Therapies

Management of chronic pain remains challenging to this day, and current treatments are associated with adverse effects, including tolerance and addiction. Chronic neuropathic pain results from lesions or diseases in the somatosensory system. To investigate potential therapies with reduced side effects, animal pain models are the gold standard in preclinical studies. Therefore, well-characterized and well-described models are crucial for the development and validation of innovative therapies. 
Partial ligation of the sciatic nerve (pSNL) is a procedure that induces chronic neuropathic pain in mice, characterized by mechanical and thermal hypersensitivity, ongoing pain, and changes in limb temperature, making this model a great fit to study neuropathic pain preclinically. pSNL is an advantageous model to study neuropathic pain as it reproduces many symptoms observed in humans with neuropathic pain. Furthermore, the surgical procedure is relatively fast and straightforward to perform. Unilateral pSNL of one limb allows for comparison between the ipsilateral and contralateral paws, as well as evaluation of central sensitization. 
To induce chronic neuropathic hypersensitivity, a 9-0 non-absorbable nylon thread is used to ligate the dorsal third of the sciatic nerve. This article describes the surgical procedure and characterizes the development of chronic neuropathic pain through multiple commonly used behavioral tests. As a plethora of innovative therapies are now being investigated to treat chronic pain, this article provides crucial concepts for standardization and an accurate description of surgeries required to induce neuropathic pain.

Partial sciatic nerve ligation induces long-lasting chronic neuropathic pain, characterized by exaggerated responses to thermal and mechanical stimuli. This mouse model of neuropathic pain is commonly used to study innovative therapies for pain management. This article describes in detail the surgical procedure to improve standardization and reproducibility.

קשירת עצבים סיאטית חלקית: מודל עכברי של כאב נוירופתי כרוני לחקר ההשפעה האנטינוסיצפטיבית של טיפולים חדשניים

Management of chronic pain remains challenging to this day, and current treatments are associated with adverse effects, including tolerance and addiction. ...

Mongolian Gerbils as an Animal Model of Wound Healing

Corneal wound healing studies have been conducted for a long time and have helped to reduce suffering and develop treatments that contribute to improving patients' eye health. Historically, corneal healing has been studied in rodents such as mice and rats, but these models might not completely mimic human disorders. However, information on other rodents such as Mongolian gerbils (Meriones unguiculatus) is scant in corneal research.
Here, we describe a technique to develop a novel animal model for studying corneal healing after photorefractive keratectomy. Due to the limited literature available on the cornea of M. unguiculatus, we also describe a histological analysis of the normal cornea. These research techniques can also be employed in the study of eye diseases because of the similarity between the corneas of Mongolian gerbils and humans in terms of genetics, anatomy, and physiology.

This article describes a new animal model developed to study the anatomy and histology of the cornea and its healing processes. This new animal model uses the Mongolian gerbil, which has a cornea with many similarities to the human cornea.

גרבילים מונגולים כמודל חייתי לריפוי פצעים

Corneal wound healing studies have been conducted for a long time and have helped to reduce suffering and develop treatments that contribute to improving ...

צנתר היקמן לגישה ארוכת טווח של כלי הדם בחזירים

Hickman Catheter Use for Long-Term Vascular Access in a Preclinical Swine Model

Central venous catheters (CVCs) are invaluable devices in large animal research as they facilitate a wide range of medical applications, including blood monitoring and reliable intravenous fluid and drug administration. Specifically, the tunneled multi-lumen Hickman catheter (HC) is commonly used in swine models due to its lower extrication and complication rates. Despite fewer complications relative to other CVCs, HC-related morbidity presents a significant challenge, as it can significantly delay or otherwise negatively impact ongoing studies. The proper insertion and maintenance of HCs is paramount in preventing these complications, but there is no consensus on best practices. The purpose of this protocol is to comprehensively describe an approach for the insertion and maintenance of a tunneled HC in swine that mitigates HC-related complications and morbidity. The use of these techniques in &gt;100 swine has resulted in complication-free patent lines up to 8 months and no catheter-related mortality or infection of the ventral surgical site. This protocol offers a method to optimize the lifespan of the HC and guidance for approaching issues during use.

מחבר זרקור: שימוש בצנתר היקמן לגישה ארוכת טווח לכלי דם במודל חזירי פרה-קליני  

A reliable and reproducible approach for the insertion and maintenance of a tunneled Hickman catheter for long-term vascular access in swine is described. Placement of a central venous catheter allows for convenient daily sampling of whole blood from awake animals and intravenous administration of medication and fluids.

שימוש בצנתר היקמן לגישה ארוכת טווח לכלי דם במודל חזירי פרה-קליני

Central venous catheters (CVCs) are invaluable devices in large animal research as they facilitate a wide range of medical applications, including blood ...