מחקר ההדרים וקרן פיתוח הוא הודו על סיועם. הודות למלאך מיכאל הויט ופלורס לביצוע מבדקים.

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אסיפה מותאם במיוחד, חלק שני נמל T-olfactometer תואר קודם לכן במאן ואח&#39; 10. מוצג באיור 1. Olfactometer מורכב משפופרת זכוכית 30 סנטימטרים כי הוא מפוצל לשתי יציאות נפרדות עם רצועת טפלון להרכיב T-מבוך. כל מחצית מקבילה לזרוע של olfactometer סגנון 2-בחירה מאפשרת הנבדק לבחור בין שני שדות ריח פוטנציאליים. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרכבה ולאחר המבחנים אמורים להתרחש בתוך חדר עם הטמפרטורה מבוקרת או קאמרי סביבתית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> olfactometer הר זכוכית T-מבוך האנכי כפי שמוצג באיור 1 ולמקם אותו מתחת לנורת ניאון 900 לוקס. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאור פיזור אופטימלי, ההרכבה צריכה להיות מותקנת בתוך 1.0 x 0.6 x 0.6 מ &#39;מכל אטום כדי למקסם את הדיפוזיה אור אחידה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את זרועות olfactometer למקורות ריח שישוכנו במייקרו מיצוי אחזקה / ריח המקור chamb מוצק שלבאה (SPMEC) (ARS, Inc, גיינסוויל, פלורידה) דרך טפלון; מחברי צינור זכוכית. כל SPMEC מורכב משפופרת זכוכית ישרה (17.5 סנטימטרים x 3.5 סנטימטרי רוחב) תמכה בכניסה ושסתום פורקן לזרמי אוויר נכנסים ויוצאים (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את מערכת אספקת האוויר למקור חיצוני של האוויר ופחמן humidified מטוהר שנמצא תחת לחץ מתמיד (מערכת אספקת האוויר יש גם פילטר פנימי פחם לטיהור אוויר וbubbler אוויר לאידוי אם מקורות חיצוניים אינם זמינים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ממס דגימות כימיות רצויות בתוך diluent המתאים (ממס) ופיפטה על מצע שחרור איטי כגון פתיל כותנה (פטי ג&#39;ון אריזה, Inc, קונקורד, צפון קרוליינה). טיפול ביקורת צריך להיות מורכב מפתיל כותנה ספוג ממס בלבד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על מנת למנוע זיהום משמעותי של כלי הזכוכית, עוטף את פתילות הכותנה שטופלו ושליטה ברקמת מעבדה (Kimwipes, קימברלי קלארק, רוזוול, GA) ומקום לשתי זרועות SPMEC (ARS, Inc, גיינסוויל, פלורידה). במקרה של דגימות צמחים חיות, קאמרי אוסף הגיליוטינה הפכפכה יכולה להיות מחובר לolfactometer מכיל טיפולים במקום SPMEC (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לספק מטוהר ואוויר humidified דרך SPMEC (או קאמרי הגיליוטינה נדיף) באמצעות שתי משאבות הקשורים למערכת אספקת אוויר (איור 1). לשמור על קצב זרימת אוויר ברמה של 0.1 ליטר / דקה בשתי זרועות של olfactometer. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> העסקת olfactometer לבדוק את התגובה לפרוקי רגלי דוחים משוערים. בתיאור ההווה, חרקי hemipteran, psyllid הדרים האסיאניים, Diaphorina citri, שמש כפרוקי רגלי בדיקה. תגובה נוסתה עד נדיפים הדרים לבד או בשילוב עם (דיסולפיד דימתיל) דוחה ואוויר נקי כמקורות ריח. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנהל את כל הניסויים בטמפרטורה אחידה ולחות יחסית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני כל הבדיקות, לא תחשוףest נושאים לאוויר נקי לעומת אוויר נקי או אוויר נקי לעומת ממס בolfactometer T-המבוך כדי לוודא היעדר הטית מיקומית או שפעת הממס על התנהגותו של הנבדק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הקצאת מקור ריח באופן אקראי לאחת מזרועותיו של olfactometer בתחילתו של כל מבדק. היפוך בעמדה זו לאחר כל 10 נבדקים assayed, לכל הפחות, לבטל את הפוטנציאל של הטית מיקומית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק את התגובה של מינימום של 30 (ועד 120) נבדקים לשילוב טיפול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרשה נושאי מבחן 100-300 שניות להפגין תגובה התנהגותית המבוססת על תגובה הוקמה בעבר (חביון) מרווח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השיא אם הנושא נכנס לטיפול זרוע, זרוע שליטה או נשאר בנמל השחרור או מתחת חטיבת T-המבוך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להבקיע בחירת זרוע טיפול או שליטה כאשר נושא הבדיקה חוצה את החלוקה בT-המבוך ועובר לכל אחת מזרועות olfactometer. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להבקיע בחירת זרוע שחרור כאשר מבחן שלubject נשאר בנמל השחרור או מתחת חטיבת T-המבוך. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקה olfactometer וצינורות המחברים יסודיות עם 2% תמיסת סבון ולאפות את רכיבי הזכוכית ב 200 ° F בין השימוש בטיפולי ריח שונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> למבחנים שבטיפולים דוחים משוערים מוצגים בolfactometer T-המבוך עם או בלי טיפול כימי לעומת אוויר נקי, להשוות את מספר הנבדקים שנותרו בנקודת השחרור ולא להיכנס olfactometer בין טיפולים על ידי ניתוח דרך אחת של שונות ( ANOVA) ואחרי הבדיקה של Tukey HSD (α &lt;0.05). במקרים שבו הנבדקים לעזוב את זרוע השחרור, להשוות את מספר בחירת זרוע השליטה לעומת זרוע הטיפול בצ&#39;י מרובע (χ 2) ניתוח בα &lt;0.05. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Resh, R. H., Card&#233;, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Encyclopedia of Insects. , (2003).</li><li>Aluja, M., Lesky, T. C., Vincent, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biorational tree-fruit pest management. , (2009).</li><li>Rodriquez-Saona, C., Stelinski, L. L., Peshin, R., Dhawan, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavior-modifying+strategies+in+IPM:+Theory+and+Practice.">Behavior-modifying strategies in IPM: Theory and Practice.</a> Integrated Pest Management: Innovation - Development Process. , 261-311 (2009).</li><li>Card&#233;, R. T., Millar, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Advances in insect chemical ecology. , (2004).</li><li>Knight, A. L., Stelinski, L. L., Hebert, V., Gut, L., Light, D., Brunner, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+dispensers+simultaneously+releasing+pear+ester+and+sex+pheromone+for+disruption+of+codling+moth+(Lepidoptera:+Tortricidae).">Novel dispensers simultaneously releasing pear ester and sex pheromone for disruption of codling moth (Lepidoptera: Tortricidae).</a> Journal of Applied Entomology. 136 (1-2), 79-86 (2012).</li><li>Mann, R. S., Tiwari, S., Smoot, J. M., Rouseff, R. L., Stelinski, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repellency+and+toxicity+of+plant-based+essential+oils+and+their+constituents+against+Diaphorina+citri+Kuwayama+(Hemiptera:+Psyllidae).">Repellency and toxicity of plant-based essential oils and their constituents against Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Psyllidae).</a> Journal of Applied Entomology. 136 (1-2), 87-96 (2012).</li><li>Forbes, A. A., Powell, H. Q., Stelinski, L. L., Smith, J. J., Feder, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sequential+sympatric+speciation+across+trophic+levels.">Sequential sympatric speciation across trophic levels.</a> Science. 323 (5915), 776-779 (2009).</li><li>Kennedy, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+visual+responses+of+flying+mosquitos.">The visual responses of flying mosquitos.</a> Proceedings of the Zoological Society of London A. 109 (4), 221-242 (1940).</li><li>Miller, J. R., Roelofs, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained-flight+tunnel+for+measuring+insect+responses+to+wind-borne+sex+pheromones.">Sustained-flight tunnel for measuring insect responses to wind-borne sex pheromones.</a> Journal of Chemical Ecology. 4 (2), 187-198 (1978).</li><li>Mann, R. S., Rouseff, R. L., Smoot, J. M., Castle, W. S., Stelinski, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sulfur+volatiles+from+Allium+spp.+affect+Asian+citrus+psyllid,+Diaphorina+citri+Kuwayama+(Hemiptera:+Psyllidae),+response+to+citrus+volatiles.">Sulfur volatiles from Allium spp. affect Asian citrus psyllid, Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Psyllidae), response to citrus volatiles.</a> Bulletin of Entomological Research. 101 (1), 89-97 (2011).</li><li>Onagbola, E. O., Rouseff, R. L., Smoot, J. M., Stelinski, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guava+leaf+volatiles+and+dimethyl+disulfide+inhibit+response+of+Diaphorina+citri+Kuwayama+to+host+plant+volatiles.">Guava leaf volatiles and dimethyl disulfide inhibit response of Diaphorina citri Kuwayama to host plant volatiles.</a> Journal of Applied Entomology. 135 (6), 404-414 (2011).</li><li>Baker, T. C., Linn, C. E., Hummel, H., Miller, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wind+tunnels+in+pheromone+research.">Wind tunnels in pheromone research.</a> Techniques in Pheromone Research. , 75-110 (1984).</li><li>Stelinski, L. L., Rodriguez-Saona, C., Meyer, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recognition+of+foreign+oviposition+marking+pheromone+in+a+multitrophic+context.">Recognition of foreign oviposition marking pheromone in a multitrophic context.</a> Naturwissenschaften. 96 (5), 585-592 (2009).</li><li>G&#246;k&#231;e, A., Stelinski, L. L., Whalon, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+electrophysiological+responses+of+leafroller+moths+to+selected+plant+extracts.">Behavioral and electrophysiological responses of leafroller moths to selected plant extracts.</a> Environmental Entomology. 34 (6), 1426-1432 (2005).</li><li>Ali, J. G., Alborn, H. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=herbivore-induced+plant+volatile+increases+biological+control+activity+of+multiple+beneficial+nematode+species+in+distinct+habitats.">herbivore-induced plant volatile increases biological control activity of multiple beneficial nematode species in distinct habitats.</a> PLoS ONE. 7 (6), e38146 (2012).</li><li>Mann, R. S., Ali, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+release+of+a+plant+defense+volatile+'deceptively'+attracts+insect+vectors+to+plants+infected+with+a+bacterial+pathogen.">Induced release of a plant defense volatile 'deceptively' attracts insect vectors to plants infected with a bacterial pathogen.</a> PLoS Pathogens. 8 (3), e1002610 (2012).</li></ol>

המחבר זכה למימון שהועמד על ידי מחקר ההדרים וקרן פיתוח.

<html> בזאת, מכשיר בדיקה ופרוטוקול מתואר למדידת התגובה של פרוקי רגליים קטנים (Insecta: Hemiptera: Psyllidae) לodorants. השיטה כרוכה במבחן אמריקאי, המאפשר לחרקים לעשות בחירה בין שני שדות odorant במקרה של מבחני הערכת attractant משוער. יתר על כן, נושא הבדיקה עשוי להציג שלושה סוגים של התנהגויות על ידי השארת זרוע השחרור וכניסה לכל אחד משני תחומי ריח פוטנציאליים, או שנותר בזרוע השחרור, במקרה של מבחני repellency. Olfactometer מאפשר איסוף נתוני תפוקה גבוהה משום שהיא מנצלת את geotactic השלילי (נטייה לנוע כלפי מעלה) וphototactic החיובי (נטייה לנוע לכיוון אור) תגובה התנהגותית טבעית של פרוקי רגליים רבים. למרות ההפגנה הנוכחית משתמשת בדוגמא מבחן חרקי psyllid, assay יכול להיות מותאם בקלות לפרוקי רגליים רחבה, כאלה שמשתמשים בטיסה או הליכה כמצבים דומיננטיים של תחבורה. Olfactometers &quot;jove_content&quot;&gt; המיועד למדידת התגובה של חרקים בתחילה פותחו לפני עשרות שנים ומלאה תפקיד מרכזי בהבהרת מושכים ודוחה חרקים 12. העיצובים הספציפיים של olfactometers כאלה להשתנות במידה רבה, עם זאת, וריאציות על הנושא הכללי של assay שתי הבחירה, כמו גם כפי שמתוארות כאן, מבחנים דומים Y-tube שלעתים קרובות משמשים למדידת תגובת פרוקי רגליים לכימיקלים. מנהרות טיסה גדולות יותר שעלול לגרום לבריחה מתמשכת של חרקים 9 הביאו גם אוסף של נתוני פורצים מאירים את המנגנונים הבסיסיים של טיסה וכיוון חרק semiochemicals, כמו גם, נתונים המודיעים שימוש מעשי בכלי דברה. זה לעתים קרובות יש צורך להתאים את עיצוב olfactometer ומכשור נלווה לביולוגיה של נושא בדיקת פרוקי רגליים המסוימות. olfactometers אלה שיכולים לשמש בקרב קבוצה רחבה של חרקים מועילים יותר מאלה specific לקבוצה קטנה, אך לעתים את המשמעות הכלכלית של קבוצה קטנה של חרקים מכתיבה את הצורך בפיתוח של olfactometer מאוד ספציפיים וטכניקת בדיקה. העיצוב תאר כרגע בונה על טכניקות חרקי העבר מוכרות. זה מאפשר לassay שתי בחירה סטנדרטי יותר מ-Y bioassays צינור שבזירת הניסוי או המבחן האמריקאי לובשת צורה של מכשיר זכוכית בצורת אות V 7. בדרך כלל, זרוע אחת של Y-צינור כזה תקבל odorant טיפול, ואילו השני יישאר ריק 13. וריאציות על olfactometers כאלה עשויות לכלול תוספת של זרועות מרובות חישורים, 14 ואפילו תוספת של אדמה בינונית לassaying ההתנהגות של יצורים הנעים בקרקע 15. בפיתוח olfactometers כאלה מבחנים נלווים, חשוב לשקול כמה הדוק תנאים טבעיים משוכפלים ולכן הרלוונטיות האמיתית של תגובות התנהגותיות הוערכו במונחים של הביולוגיה של הנבדקים. כדי להתואר rge, הנתונים שנאספו יהיה שימושי כמו הרלוונטיות של המבדק התנהגותי ביחס לאקולוגיה התנהגותית של האורגניזם 16 בלבד. Olfactometer תאר כרגע והמבדק ההתנהגותי תוכנן במיוחד עבור חרק hemipteran שנוטה ליזום טיסה כמו &quot;קפיצות&quot; קצרות 16. הכיוון האנכי של olfactometer וסידור מקור האור להקל חניכה של תנועת חרק ולכן התנהגות אורינטציה כימית בתיווך לאחר מכן ניתן assayed ביעילות ובתפוקה גבוהה. הסדר assay התנהגות זו סבירה יכול לשמש למגוון רחב של טיסה או הליכה או מיני פרוקי רגליים יכולים גם להיות שונים בקלות כדי להתאים את הצורך של יצורים שאינם חרקים.

פרוקי רגליים (כולל חרקים ועכבישים) לעתים קרובות מוגדרים כמזיקים, כי הם גם להתחרות עם מאכל אדם בהגדרות חקלאיות או עירוניות או להעביר פתוגנים סיבתיות של מחלה 1. כמות גדולה של השקעה נעשית לפיתוח כלי בקרה למזיקים כאלה. כלים אלה יכולים להשתנות במידה רבה והתקדמות משמעותית נעשתה בפיתוח כלי biorational כי גם לשנות או לנצל את ההתנהגות הטבעית של מזיקים עם השימוש במשיכה או דוחי 2,3 התנהגותיים. מזיקי פרוקי רגליים לעתים קרובות מסתמכים על אותות או רמזי חוש ריח לזוג ו / או מיקום 4 מארח. לכן גילוי של משיכה או דוחים יעילות למזיקים יכול להוביל לעתים קרובות לפיתוח כלי בקרה. תהליך זה של גילוי כרוך במספר שלבים. ראשית, ההתנהגות הטבעית של הנבדק חייבת להיות מובנת. לדוגמה, יש לוודא אם מין אחד ממינים נתונים מושך את ההפךסקס למיקום זוג. אם כך, צריך לקבוע אם משיכה זו מתווכת על ידי חומר כימי והיכן שמיוצר כימי. צעדים נוספים כוללים קביעה מתי הכימי מופק וזיהוי הסופי שלה. במשך כל התהליך, (חרקים או קרדית) התגובה התנהגותית של נושא המבחן לodorants חייבת להיבדק. בתחילה, את ההתנהגות של הנבדק תיבחן לחומר הטבעי. לדוגמה, תגובתו של עש זכר עשויה להיבדק לזה של התמצית של בלוטת הפרומו שלה הנשית conspecific. לחלופין, תגובה של אוכלי עשב לריחות הטבעיים של הצמח הפונדקאי שלו יכולה להיבדק. למרות חקירות אלה יש לעתים קרובות התמקדות מעשית בפיתוח של כלי ניהול 5,6, הם יכולים להיות מיושמים גם על מחקר שעוסק בשאלות עקרוניות יותר, כגון התפצלות 7. השלבים הבאים כרוכים בבדיקת התגובה של פרוקי הרגליים לגרסות סינטטיות של מוצרים טבעיים שזוהו. Understanding כמה פרוקי רגליים מגיבים לכימיקלים מחייב פיתוח של כלים המתאימים כדי למדוד את התנהגותם. הנתונים המופקים על ידי כלים כאלה יהיו תלויים בכמה טובים הוא החוקר הצליח למדוד התנהגויות טבעיות בהגדרה מבוקרת. לפני למעלה משישה עשורים, olfactometers טיסה הממושכת ומנהרות שפותחו כדי למדוד תגובת חרק odorants 8,9. Olfactometers להשתנות באופן משמעותי בעיצוב, ולעתים קרובות הם מותאמים לחרק או הבעיה הספציפי הנחקר. המטרה של מאמר זה היא לתאר את העיצוב ושימוש ב, olfactometer T-מבוך כיוון אנכי למדידת תגובת חרק odorants (איור 1). הכיוון האנכי של olfactometer מנצל geotaxis השלילי (נטייה לנוע למעלה) הוצג על ידי חרקים רבים. מקור אור ממוקם ישירות מעל olfactometer מנצל phototaxis החיובי (נטייה לנוע לכיוון מקור האור) הוצג על ידי חרקים רבים. Olfactometer שימושי במיוחד לחרקי hemipteran שנוטים לא להציג בקלות בתנועה אופקית olfactometers אורינטציה ושהושפעו מאוד מעוצמת האור ביחס לאורינטציה. עם זאת, המכשיר הזה יכול לשמש למגוון רחב של חרקים מעופפים והזוחלים, כמו גם Arachnids. Olfactometer יכול להיות מועסק על מנת להעריך את שני מושכים ודוחה. במקרה של משיכה, שדה הריח המפוצל (איור 1) הוא הקים עם attractant המשוער שוחרר בצד אחד לעומת אוויר נקי שוחרר בצד הנגדי. בחירה נרשמת כאשר החרק שוחרר בבסיס olfactometer בוחר אחד משני שדות הריח. במקרה של דוחים, התנהגות שלישית היא אפשרית. בנוסף לתנועה כלפי מעלה בכל אחד משני שדות הריח, חוסר התנועה כלפי מעלה עשוי להיות מוקלט המציין גירוי שאינו מגיב או הדיפה מגירוי או שדות ריח.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם ציוד </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> שתיים יציאה מחולקת T-olfactometer </td><td> מחקר אנליטי מערכות (ARS), Inc גיינסוויל, פלורידה </td><td> אף אחד (בהתאמה אישית) </td><td> אם אינן זמין מARS, דרום מדעי (גיינסוויל, פלורידה) גם כיום בונה ומפיצת ציוד כזה. </td></tr><tr><td> מוצק שלב החזקת מייקר חילוץ / קאמרי מקור ריח עם טפלון; מחברי צינור זכוכית. </td><td> מחקר אנליטי מערכות (ARS), Inc גיינסוויל, פלורידה </td><td> RV-R3 </td><td> ראה לעיל הערה </td></tr><tr><td> מערכת אספקת אוויר </td><td> מחקר אנליטי מערכות (ARS), Inc גיינסוויל, פלורידה </td><td> HADS-2AFM2C.4 </td><td> ראה לעיל הערה </td></tr><tr><td> גיליוטינה קאמרית </td><td> אנליטי reseקשת מערכות (ARS), Inc גיינסוויל, פלורידה </td><td> L3GP3 </td><td> ראה לעיל הערה </td></tr></tbody></table>

vertical t-maze choice assay for arthropod response to odorants

לאור החשיבות הכלכלית של חרקים ומזיקים כמו Arachnids של גידולים חקלאיים, סביבות עירוניות או כוקטורים של מפעל ומחלות אנושיות, טכנולוגיות שונות מפותחות ככלי בקרה. משנה של כלים אלה מתמקד בשינוי ההתנהגות של פרוקי רגליים על ידי משיכה או דחייה. לכן, פרוקי רגליים הם לעתים קרובות המוקד של חקירות התנהגותיים. כלים שונים פותחו כדי למדוד התנהגות פרוקי רגליים, כולל מנהרות רוח, טחנות טיסה, servospheres, וסוגים שונים של olfactometers. המטרה של הכלים הללו היא למדוד תגובת חרקים או עכבישים לרמזים ויזואליים או לעתים קרובות יותר חוש ריח. Oflactometer T-המבוך האנכי המתואר כאן מודד בחירות שבוצעו על ידי חרקים בתגובה למושכים או דוחים. זהו מכשיר בדיקת תפוקה גבוה שמנצל phototaxis החיובי (משיכה לאור) וgeotaxis השלילי (נטייה ללכת או לעוף כלפי מעלה) הוצג על ידי פרוקי רגליים רבים. Olfactometאה מורכב משפופרת זכוכית 30 סנטימטרים שמחולקת במחצית עם רצועת טפלון להרכיב T-מבוך. כל מחצית משמשת כזרוע של olfactometer מאפשר לנבדקים לבצע בחירה בין שני שדות ריח פוטנציאליים במבחנים המעורבים מושכים. במבחנים הכוללים דוחים, חוסר התגובה נורמלית למושכים ידועים אך ניתן למדוד כמשתנה שלישית.

אטרקציה של הדרי מבוגרי אסיה psyllid (Diaphorina citri) לריחות שלהם נדיפים הלידה המארחת הצמח (הדרים) מתוארת באיור 2 א. באופן משמעותי (α &lt;0.05) יותר מבוגרים בוחרים בזרועו של olfactometer T-המבוך מקבל ריחות מצמחי הדר מתגוררים בהשוואה לשליטה ריקה (אוויר נקי). דוגמה לדחייה מוצגת באיור 2 ב. במקרה זה, את החרקים נחשפו לזרוע אחת נדיפים ההדרים שקבלו T-המבוך, ואילו הזרוע השנייה קבלה נדיפים מצמח הדרים שטופל בדיסולפיד הידוע הדוחה, דימתיל 11. במקרה זה, שלושה סוגים של התנהגויות נצפו. מספר psyllids נעצר בזרוע השחרור ולא להגיב לא הייתה שונים סטטיסטית מהמספר נכנס זרוע קבלת הריחות מצמחי הדר בלבד (איור 2 ב &#39;). עם זאת, אין psyllids נכנס הזרוע המכילה tהוא יארח צמח הפכפך כאשר משותף הציג-עם הדוחה (2B איור). <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/50229/50229fig1.jpg" /> איור 1. התרשים סכמטי של olfactometer כיוון אנכי T-מבוך הצטרף למערכת מסירת אוויר ומכשירי שחרור טיפול ריח. התרשים הוא עיבוד של איור 1 במאן et al. 10. נושא הבדיקה ממוקם בנפרד לתוך תא שחרורו של T-2-olfactometer מחולק הנמל. הוא נע לכיוון הריחות דרך שסתום שער שמאפשר תנועה כלפי מעלה בשליטה אל olfactometer ומונע מהחרקים זוחלים בחזרה לאזור נקודת השחרור. צינור bifurcates 10 סנטימטרים אחרי ערך השער. תגובה חיובית לריח נרשמת פעם אחת החרק נע 0.5 סנטימטר לצד מסוים של החלוקה. קאמרי אוסף הגיליוטינה ההפכפכה יכול להיות בשימוש במקום המוצק PHAsדואר החזקת מייקר חילוץ / קאמרית מקור ריח (SPMEC) כמקור ריח. <img alt="איור 2" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/50229/50229fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50229/50229fig2.jpg" /> איור 2. תגובה של הדרי מבוגרי אסיה psyllid (Diaphorina citri) לנדיפים מצמחי הדר מארחים לעומת בקרת אוויר נקיה () או נדיפים הדרים לעומת הדרי נדיפים שיתוף שוחרר-עם (דיסולפיד דימתיל) הדוחה (ב &#39;) בכיוון אנכי T מבוך-olfactometer איור 2 א:. ניתוח חד כיווני של שונות (ANOVA) ואחרי הבדיקה של Tukey HSD (α &lt;0.05) בוצע כדי להשוות את מספר psyllid ביצוע בחירה בין שתי הזרועות (2 טיפולים, n = 120). עמודות שצוינו על ידי אותיות שונות שונות באופן משמעותי מזו (α &lt;0.05) התרשים 2B:. Analys כיוון אחדהוא שונים (ANOVA) ואחרי הבדיקה של Tukey HSD (α &lt;0.05) בוצע כדי להשוות את מספר psyllid ביצוע בחירה בין כל אחת מזרועות או שנותר בנקודת השחרור (3 טיפולים, n = 120). עמודות שצוינו על ידי אותיות שונות שונות באופן משמעותי מזו (α &lt;0.05).

Watch this Scientific Journal Video about Vertical T-maze Choice Assay for Arthropod Response to Odorants at JoVE.com

Vertical T-maze Choice Assay for Arthropod Response to Odorants

Olfactometer אנכי, T-מבוך מתואר לassaying התגובה התנהגותית של פרוקי רגליים. Olfactometer מאפשר הנסיין למדוד בחירות שבוצעו על ידי נבדקים, כאשר נתון שני שדות ריח פוטנציאליים. שניהם המשיכה ולדחייה מodorants ניתן למדוד במכשיר זה.

Assay בחירה האנכי T-מבוך לתגובת פרוקי רגליים לodorants

Given the economic importance of insects and arachnids as pests of agricultural crops, urban environments or as vectors of plant and human diseases, ...

vertical-t-maze-choice-assay-for-arthropod-response-to-odorants

Research

JoVE Journal

Neuroscience

14.6K Views.  University of Florida. Olfactometer אנכי, T-מבוך מתואר לassaying התגובה התנהגותית של פרוקי רגליים. Olfactometer מאפשר הנסיין למדוד בחירות שבוצעו על ידי נבדקים, כאשר נתון שני שדות ריח פוטנציאליים. שניהם המשיכה ולדחייה מodorants ניתן למדוד במכשיר זה.

Video: Vertical T-maze Choice Assay for Arthropod Response to Odorants

High-resolution Measurement of Odor-Driven Behavior in Drosophila Larvae

Olfactory responses in Drosophila larvae have been traditionally studied in Petri dishes comprising a single peripheral odor source. In this behavioral paradigm, the experimenter usually assumes that the rapid diffusion of odorant molecules from the source leads to the creation of a stable gradient in the dish. To establish a quantitative correlation between sensory inputs and behavioral responses, it is necessary to achieve a more thorough characterization of the odorant stimulus conditions. In this video article, we describe a new method allowing the construction of odorant gradients with stable and controllable geometries. We briefly illustrate how these gradients can be used to screen for olfactory defects (full and partial anosmia) and to study more subtle features of chemotaxis behavior.

In this video article, we describe a new method allowing the construction of odorant gradients with stable and controllable geometries. We briefly illustrate how these gradients can be used to screen for olfactory defects (full and partial anosmia) and to study more subtle features of chemotaxis behavior.

ברזולוציה גבוהה מדידה של התנהגות ריח מונחה על הזחלים תסיסנית

Olfactory responses in Drosophila larvae have been traditionally studied in Petri dishes comprising a single peripheral odor source. In this behavioral ...

Biology

A Wind Tunnel for Odor Mediated Insect Behavioural Assays

Olfaction is the most important sensory mechanism by which many insects interact with their environment and a wind tunnel is an excellent tool to study insect chemical ecology. Insects can locate point sources in a three-dimensional environment through the sensory interaction and sophisticated behavior. The quantification of this behavior is a key element in the development of new tools for pest control and decision support. A wind tunnel with a suitable flight section with laminar air flow, visual cues for in-flight feedback and a variety of options for the application of odors can be used to measure complex behaviour which subsequently may allow the identification of attractive or repellent odors, insect flight characteristics, visual-odor interactions and interactions between attractants and odors lingering as background odors in the environment. A wind tunnel holds the advantage of studying the odor mediated behavioural repertoire of an insect in a laboratory setting. Behavioural measures in a controlled setting provide the link between the insect physiology and field application. A wind tunnel must be a flexible tool and should easily support the changes to setup and hardware to fit different research questions. The major disadvantage to the wind tunnel setup described here, is the clean odor background which necessitates special attention when developing a synthetic volatile blend for field application.

Here, we describe the construction and use of a wind tunnel for odor mediated behavioural assays with insects. The wind tunnel design facilitates the release of odor sources by several methods, with and without visual stimuli. Wind tunnel experiments are important methods to identify behaviorally active volatile chemicals.

במנהרת רוח עבור ריח מתווכת מבחני התנהגותי חרקים

Olfaction is the most important sensory mechanism by which many insects interact with their environment and a wind tunnel is an excellent tool to study ...

Behavior

Drosophila Adult Olfactory Shock Learning

Drosophila have been used in classical conditioning experiments for over 40 years, thus greatly facilitating our understanding of memory, including the elucidation of the molecular mechanisms involved in cognitive diseases1-7. Learning and memory can be assayed in larvae to study the effect of neurodevelopmental genes8-10 and in flies to measure the contribution of adult plasticity genes1-7. Furthermore, the short lifespan of Drosophila facilitates the analysis of genes mediating age-related memory impairment5,11-13. The availability of many inducible promoters that subdivide the Drosophila nervous system makes it possible to determine when and where a gene of interest is required for normal memory as well as relay of different aspects of the reinforcement signal3,4,14,16.
Studying memory in adult Drosophila allows for a detailed analysis of the behavior and circuitry involved and a measurement of long-term memory15-17. The length of the adult stage accommodates longer-term genetic, behavioral, dietary and pharmacological manipulations of memory, in addition to determining the effect of aging and neurodegenerative disease on memory3-6,11-13,15-21.
Classical conditioning is induced by the simultaneous presentation of a neutral odor cue (conditioned stimulus, CS+) and a reinforcement stimulus, e.g., an electric shock or sucrose, (unconditioned stimulus, US), that become associated with one another by the animal1,16. A second conditioned stimulus (CS-) is subsequently presented without the US. During the testing phase, Drosophila are simultaneously presented with CS+ and CS- odors. After the Drosophila are provided time to choose between the odors, the distribution of the animals is recorded. This procedure allows associative aversive or appetitive conditioning to be reliably measured without a bias introduced by the innate preference for either of the conditioned stimuli. Various control experiments are also performed to test whether all genotypes respond normally to odor and reinforcement alone.

Drosophila Adult Olfactory Shock Learning

The method to measure adult Drosophila associative memory is described. The assay is based on the ability of the fly to associate an odor presented with a negative reinforcer (electric shock) and then recall this information at a later time, allowing memory to be measured.

דרוזופילה מבוגרים חוש הריח הלם למידה

Drosophila have been used in classical conditioning experiments for over 40 years, thus greatly facilitating our understanding of memory, including the ...

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster. In a light-tight box illuminated by red light that is invisible to fruit flies, a camera linked to custom data acquisition software monitors the position of six flies simultaneously. Each fly is confined to walk in individual arenas containing a food odor at the center. The testing arenas rest on a porous floor that functions to prevent odor accumulation. Latency to locate the odor source, a metric that reflects olfactory sensitivity under different physiological states, is determined by software analysis. Here, we discuss the critical mechanics of running this behavioral paradigm and cover specific issues regarding fly loading, odor contamination, assay temperature, data quality, and statistical analysis.

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

In this video article, we describe an automated assay to measure the effect of hunger or satiety on olfactory dependent food search behavior in the adult fruit fly Drosophila melanogaster.

יחיד לטוס Assay עבור התנהגות שיחור מזון ב<em&gt; דרוזופילה</em

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video ...

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, mechanoreception, hearing, and chemoperception through taste, via direct contact or through olfaction, which represents the response to a volatile molecule acting at longer range. Volatile chemical molecules are very important signals for most animals in the detection of danger, a source of food, or to communicate between individuals. Drosophila melanogaster is one of the most common biological models for scientists to explore the cellular and molecular basis of olfaction. In order to highlight olfactory abilities of this small insect, we describe a modified choice protocol based on the Y-maze test classically used with mice. Data obtained with Y-mazes give valuable information to better understand how animals deal with their perpetually changing environment. We introduce a step-by-step protocol to study the impact of odorants on fly exploratory response using this Y-maze assay.

Testing Drosophila Olfaction with a Y-maze Assay

We present a choice test to reveal the influence of odorants on Drosophila behavior using a Y-maze assay.

בדיקה<em&gt; דרוזופילה</em&gt; Olfaction עם Assay Y-מבוך

Detecting signals from the environment is essential for animals to ensure their survival. To this aim, they use environmental cues such as vision, ...

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To complicate matters even further, the odors detected by the insect nervous system usually are not single compounds but mixtures whose composition and concentration ratios vary. This leads to an almost infinite amount of different olfactory stimuli which have to be evaluated by the nervous system.
To understand which aspects of an odor stimulus determine its evaluation by the fly, it is therefore desirable to efficiently examine odor-guided behavior towards many odorants and odor mixtures. To directly correlate behavior to neuronal activity, behavior should be quantified in a comparable time frame and under identical stimulus conditions as in neurophysiological experiments. However, many currently used olfactory bioassays in Drosophila neuroethology are rather specialized either towards efficiency or towards resolution.
Flywalk, an automated odor delivery and tracking system, bridges the gap between efficiency and resolution. It allows the determination of exactly when an odor packet stimulated a freely walking fly, and to determine the animal&#180;s dynamic behavioral reaction.

High-resolution Quantification of Odor-guided Behavior in Drosophila melanogaster Using the Flywalk Paradigm

The automated tracking system Flywalk is used for high-resolution quantification of odor-guided behavior in Drosophila melanogaster.

כימות ברזולוציה גבוהה של התנהגות מודרכת ריח<em&gt; תסיסנית melanogaster</em&gt; שימוש ב<em&gt; Flywalk</em&gt; פרדיגמה

In their natural environment, insects such as the vinegar fly Drosophila melanogaster are bombarded with a huge amount of chemically distinct odorants. To ...

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

A key challenge in neurobiology is to understand how neural circuits function to guide appropriate animal behaviors. Drosophila melanogaster is an excellent model system for such investigations due to its complex behaviors, powerful genetic techniques, and compact nervous system. Laboratory behavioral assays have long been used with Drosophila to simulate properties of the natural environment and study the neural mechanisms underlying the corresponding behaviors (e.g. phototaxis, chemotaxis, sensory learning and memory)1-3. With the recent availability of large collections of transgenic Drosophila lines that label specific neural subsets, behavioral assays have taken on a prominent role to link neurons with behaviors4-11. Versatile and reproducible paradigms, together with the underlying computational routines for data analysis, are indispensable for rapid tests of candidate fly lines with various genotypes. Particularly useful are setups that are flexible in the number of animals tested, duration of experiments and nature of presented stimuli. The assay of choice should also generate reproducible data that is easy to acquire and analyze. Here, we present a detailed description of a system and protocol for assaying behavioral responses of Drosophila flies in a large four-field arena. The setup is used here to assay responses of flies to a single olfactory stimulus; however, the same setup may be modified to test multiple olfactory, visual or optogenetic stimuli, or a combination of these. The olfactometer setup records the activity of fly populations responding to odors, and computational analytical methods are applied to quantify fly behaviors. The collected data are analyzed to get a quick read-out of an experimental run, which is essential for efficient data collection and the optimization of experimental conditions.

Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer

We describe here a behavioral setup and data analysis method for assaying olfactory responses of up to 100 vinegar flies (Drosophila melanogaster). This system may be used with single or multiple olfactory stimuli, and adaptable for optogenetic activation or silencing of neuronal subsets.

התנהגויות חוש הריח assayed ידי מעקב ממוחשב של<em&gt; תסיסנית</em&gt; בתוך אולפקטומטר ארבעה-רביע

A key challenge in neurobiology is to understand how neural circuits function to guide appropriate animal behaviors. Drosophila melanogaster is an ...

Functional Evaluation of Olfactory Pathways in Living Xenopus Tadpoles

Xenopus tadpoles offer a unique platform to investigate the function of the nervous system. They provide multiple experimental advantages, such as accessibility to numerous imaging approaches, electrophysiological techniques and behavioral assays. The Xenopus tadpole olfactory system is particularly well suited to investigate the function of synapses established during normal development or reformed after injury. Here, we describe methodologies to evaluate the processing of olfactory information in living Xenopus larvae. We outline a combination of in vivo measurements of presynaptic calcium responses in glomeruli of the olfactory bulb with olfactory-guided behavior assays. Methods can be combined with the transection of olfactory nerves to study the rewiring of synaptic connectivity. Experiments are presented using both wild-type and genetically modified animals expressing GFP reporters in central nervous system cells. Application of the approaches described to genetically modified tadpoles can be useful for unraveling the molecular bases that define vertebrate behavior.

Functional Evaluation of Olfactory Pathways in Living Xenopus Tadpoles

Xenopus tadpoles offer a unique platform to investigate the function of the nervous system in vivo. We describe methodologies to evaluate the processing of olfactory information in living Xenopus larvae in normal rearing conditions or after injury.

הערכה תפקודית של חוש הריח מסלולים ב ראשנים של צפרדע רפואית חי

Xenopus tadpoles offer a unique platform to investigate the function of the nervous system. They provide multiple experimental advantages, such as ...

C. elegans Chemotaxis Assay

Many organisms use chemotaxis to seek out food sources, avoid noxious substances, and find mates. Caenorhabditis elegans has impressive chemotaxis behavior.
 The premise behind testing the response of the worms to an odorant is to place them in an area and observe the movement evoked in response to an odorant. Even with the many available assays, optimizing worm starting location relative to both the control and test areas, while minimizing the interaction of worms with each other, while maintaining a significant sample size remains a work in progress 1-10. The method described here aims to address these issues by modifying the assay developed by Bargmann et al.1. A Petri dish is divided into four quadrants, two opposite quadrants marked "Test" and two are designated "Control". Anesthetic is placed in all test and control sites. The worms are placed in the center of the plate with a circle marked around the origin to ensure that non-motile worms will be ignored. Utilizing a four-quadrant system rather than one 2 or two 1 eliminates bias in the movement of the worms, as they are equidistant from test and control samples, regardless of which side of the origin they began. This circumvents the problem of worms being forced to travel through a cluster of other worms to respond to an odorant, which can delay worms or force them to take a more circuitous route, yielding an incorrect interpretation of their intended path. This method also shows practical advantages by having a larger sample size and allowing the researcher to run the assay unattended and score the worms once the allotted time has expired.

C. elegans Chemotaxis Assay

A method of quantitatively evaluating the chemotactic response of Caenorhabditis elegans is described. A chemotactic index (CI) was employed as a way to precisely evaluate the response of worms to certain targets, and serve as a platform of comparison between strains and compounds of interest.

Assay Chemotaxis סי אלגנס

Many organisms use chemotaxis to seek out food sources, avoid noxious substances, and find mates.  Caenorhabditis elegans has impressive chemotaxis ...

Four-Way Olfactometer Assay: A Method to Assess Odorant-Cued Responses in Drosophila

Source: Lin, C.C., et al. <a href="https://www.jove.com/video/54346/" target="_blank">Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer</a>. J. Vis. Exp. (2016).
Fruit flies have a complex olfactory system, can discriminate hundreds of odorants, and use their sense of smell to direct behavioral decisions. This video describes the four-way olfactometer assay, a method to study olfactory behavioral responses in flies. The featured protocol clip shows how to handle test flies and what are critical steps while performing the assay.

בדיקת אולפקטומטר ארבע-כיוונית: שיטה להערכת תגובות מרומזות ריח בדרוזופילה

Source: Lin, C.C., et al. Olfactory Behaviors Assayed by Computer Tracking Of Drosophila in a Four-quadrant Olfactometer. J. Vis. Exp. (2016).
Fruit flies ...

Assay בחירה האנכי T-מבוך לתגובת פרוקי רגליים לodorants

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

ברזולוציה גבוהה מדידה של התנהגות ריח מונחה על הזחלים תסיסנית

במנהרת רוח עבור ריח מתווכת מבחני התנהגותי חרקים

דרוזופילה מבוגרים חוש הריח הלם למידה

יחיד לטוס Assay עבור התנהגות שיחור מזון ב

בדיקה

כימות ברזולוציה גבוהה של התנהגות מודרכת ריח

התנהגויות חוש הריח assayed ידי מעקב ממוחשב של

הערכה תפקודית של חוש הריח מסלולים ב ראשנים של צפרדע רפואית חי

Assay Chemotaxis סי אלגנס

בדיקת אולפקטומטר ארבע-כיוונית: שיטה להערכת תגובות מרומזות ריח בדרוזופילה