המחברים מבקשים להודות לג'נט הייז-קלוג וקלי אנדרסון על ניהול מושבת המונטג'אק, ד"ר אלן יאנג על שהכירו לנו את המונטיאק ומר קליב טדפורד מ-Cervid Solutions Inc. על שסיפקו את המונטג'אק לפרויקט זה. עבודה זו נתמכה על ידי מענק NIH R01AI093634.

1. הכנה פרוצדורלית
כל ההליכים בבעלי חיים המתוארים נבדקו ואושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת קולורדו, האגודה להערכה והסמכה של טיפול בבעלי חיים במעבדה (AAALAC), Intl. מוסד מוכר.
<ol><li>לפני הבדיקה, לשתק בעלי חיים באמצעות פרוטוקולי הרדמה או הרדמה מתאימים כדי לספק רגיעה ולאפשר מיצוב מתאים. מטפל אחד מרסן את הצבי בזמן שאדם שני מנהל את ההרדם לבעל החיים. שים לב: המחברים מצאו את השילוב הבא כדי לספק הרדמה יעילה במין זה: butorphanol (0.45 מ"ג / קילוגרם), אזפרון (0.035 מ"ג / קילוגרם), ו medetomidine (0.04 מ"ג / קילוגרם), מנוהל תוך שרירי העכוז.</li>
	<li>לאחר שהאלב הגיע למישור של הרדים המאפשר טיפול תואם, מקם אותה בנסיכה הגבית או הצדדית על שולחן בדיקה או בתוך שוקת V. הרימו מעט את הראש, הצוואר והת'ורן (כ-20-30 מעלות) כדי להפחית את הסיכון להתחדשות ושאיפה לתכולת רומן ולאפשר אוורור תקין במהלך ההליך. שים לב: ברוב cervids או מינים מהורהרים אחרים, אולטרסאונד בטן מבוצעת בבעלי חיים עומדים; עם זאת, הגודל הקטן והשיקולים ההתנהגותיים של מין זה דורשים הרדמה כבדה לבדיקה ומיצוב עצם החזה ולכן קשה יותר ועשוי למנוע טכניקת הדמיה יעילה. מיקום החיה באמצע הדרך בין עצם החזה לבין כבידה לרוחב עשוי להיות אידיאלי להפחתת הסיכון של regurgitation ו hypoventilation ויש לשקול במידת האפשר. בכל תנוחה שכיבה, חיוני לעקוב בזהירות אחר נשימות בעלי החיים ולהפסיק לאלתר את הבדיקה ולהציב את החיה בנסיכות קשה אם צוין regurgitation או hypoventilation.</li>
	<li>במידת הצורך, קליפ שיער מאזור הבטן להיבדק על מנת להשיג מגע הולם בין טביעת הרגל של המתמר לבין העור. שים לב: בהריון מוקדם, ראיות של הריון ניתן לזהות בבטן caudal ליד בלוטות החלב. אזור זה של muntjac הוא בדרך כלל חסר שיער, ולכן גילוח לא ניתן לציין בשלב זה. ככל שהעובר גדל והרחם מתפזר כדי לתפוס תנוחה גולגולתית יותר בבטן, יהיה צורך בגזירת השיער לפני ההדמיה. יש להקפיד להימנע מגרימת טראומה מכנית כלשהי לעור, כולל חתכים מסכיני גילוח או פגיעה תרמית מקוצץ חשמלי.</li>
	<li>מקם את יחידת האולטרסאונד במקום המאפשר לטכנאי לדמיין בקלות את הצג תוך ביצוע הבדיקה עם ידו הדומיננטית. הזן מידע זיהוי בעלי חיים (שם, מספר זיהוי וכו ')לתוך המערכת כדי לתייג באופן אוטומטי תמונות שמורות ולולאות וידאו.</li>
</ol>2. בדיקת אולטרסאונד רבייה טרנסבדומינלית
<ol><li>יש למרוח כמות נדיבה של ג'ל צימוד אקוסטי על הבטן הקאודלית.</li>
	<li>מניחים מתמר ליניארי מעוקל 5-10 MHz על העור של הבטן caudal, מיד גולגולת הערווה, ולהזיז אותו לאט בכיוון גולגולתי כדי להעריך את המבנים בתוך חלל האגן. סרוק את הרבעים השמאליים והימניים של הבטן הקאודלית כדי להעריך את שתי הקרניים של הרחם הדו-קרן של המונטיאק. שים לב: אולטרסאונד בטן מקיף כרוך בהערכה של כל הקרביים הבטן, כולל הכבד, הכליות, הטחול, מערכת העיכול, שלפוחית השתן, ודרכי הרבייה. לצורך פרוטוקול זה, רק בדיקה של הריון תידון בפירוט; עם זאת, המראה הרגיל של איברי בטן אחרים caudal צריך להיות מוכר כמו מבנים אלה צפויים להיתקל במהלך המחקר. האיברים הנפוצים ביותר במיקום זה כוללים קטעים של מערכת העיכול, שלפוחית השתן, ואת מערכת הרבייה. המעי הגס והמעי הדק מזוהים על ידי המראה השכבתי האופייני של דופן המעי. לומן עשוי או לא יכול להיות מבוטא בהתאם לסוג וכמות התוכן, אשר עשוי לכלול נוזלים, גז, רירי, או חלקיקי מזון. ייתכן שיהיה קשה לזהות את שלפוחית השתן אלא אם כן היא נפוחה בשתן, והשכבות של דופן שלפוחית השתן פחות ברורות באופן משמעותי מאלה של המעיים. מלבד הרחם, השחלות ניתן למצוא גם על אולטרסאונד של מערכת הרבייה של muntjac הנשי. השחלות יופיעו כמבני ביציות ליד מוט הקאודל של הכליות, ומראהן עשוי להשתנות במהלך מחזור האסטרוס. נוכחותם של זקיקים בוגרים ומלאי נוזלים מרובים בתוך קליפת המוח מרמזת על אסטרוס. שים לב: על ידי סיבוב ו/או "פנינג" ראש הסריקה של המתמר, ניתן להעריך מבנים במישורים רוחביים או קשתיים.<ol>
<li>במידת הצורך כדי להבדיל בין רחם גרוויד לבין שלפוחית השתן, רוקן את שלפוחית השתן באופן ידני על ידי הפעלת לחץ עדין על הבטן הקאודלית או על ידי הנחת קטטר שתן וחזרה על הסריקה. שים לב: ביטוי ידני של שלפוחית השתן יש לנסות רק כאשר החיה נמצאת במצב קשה או זקוף, אשר מקל על אוריינטציה טבעית יותר של הקרביים הבטן ומפחית את הסיכון לטראומה למבנים אחרים. הרחם עשוי גם להיות מובחן משלפוחית השתן על ידי הערכת עובי דופן האיבר. העובי האופייני של שלפוחית השתן נפוחה בינונית הוא כ 1.4 מ"מ24, בעוד המחברים מצאו כי הקיר השרירי יותר של הרחם gravid ב muntjac בדרך כלל מודד בין 7-8 מ"מ. שים לב: הריון מוקדם קשה לאבחן באופן סופי בשל חוסר מבנים עובריים לזיהוי, ולמעשה האינדיקציה הראשונה להריון עשויה פשוט להיות כיס נוזלי קטן בבטן הקאודלית. אם יראו אותו בשלב זה, העובר המתפתח יופיע כהיפרכואי, אוב למבנה אמורפי בתוך הרחם (איור 1).</li>
	</ol></li>
	<li>בצעו התאמות בעומק, בתדירות וברווח לפי הצורך כדי לשפר את הניגודיות ואת פרטי התמונה. הערה: תדרים גבוהים יותר משויכים לאורכי גל קצרים יותר, הנחוצים לשיפור רזולוציית התמונה. רוב המתמרים מסוגלים לפעול בטווח של תדרים (לדוגמה, 6-10 מגה-הרץ)24. ניתן לכוונן את התדירות באמצעות פקדי הסורק ביחידת האולטרסאונד, והגדלת התדירות תגרום לתמונה ברורה יותר. הגדלת התדירות בו זמנית מקטין את עומק חדירת גל קול; לכן, הפחתת התדירות עשויה להיות נחוצה כדי לדמיין מבנים עמוקים יותר, אבל הרזולוציה עלולה להיות בסכנה24. מסיבה זו חשוב לבחור את התדר הגבוה ביותר האפשרי כדי להגיע לעומק הרקמה הרצוי. התאמות לבקרות הרווח ישנו את ההגברה של גלי קול החוזרים אל המתמר מהרקמות וישפיעו על מידת הניגוד בתמונה24. הרווח צריך להיות מוגדר לנקודה שבה ניגודיות אופטימלית בין רקמות hyperechoic ו hypoechoic מושגת, והגדרות אלה ייתכן שיהיה צורך להתאים בהתאם למבנים כי הם להיות בתמונה.</li>
</ol>3. קבלת מדידות עובריות
הערה: גיל ההיריון במינים רבים של בעלי חיים מקומיים ניתן להעריך באמצעות טווחי התייחסות הוקמה למדידות עובריות המתקבלות מבדיקת אולטרסאונד. המדידות הנפוצות ביותר כוללות אורך ישר של כתר עכוז (SCRL), עומק חזה (CD) ואורך הראש (HL)17. בעוד נתונים מספיקים עדיין לא נאספו כדי לפתח הנחיות גיל הריון אמין צבי muntjac של ריבס, מדידות ניתן לאסוף על מנת להתחיל להקים הפניות אלה. קצב הלב העוברי (FHR) הוכח במינים אחרים של cervid ו מהורהר להגדיל באופן ליניארי כמו ההריון מתקדם לנקודה מסוימת (בדרך כלל סביב יום 60 של ההריון), שבו קצב הלב מתחיל לרדת17. FHR עשוי לשמש להערכת גיל ההיריון בשילוב עם תצפיות אולטרסאונד אחרות, אולם הוא נפוץ יותר כמדד של הכדאיות העוברית17,24. FHR חושב במונטג'אק של ריבס כבר 35 ימים לאחר ההזדווגות שנצפתה.
<ol><li>כדי למדוד SCRL, לאתר את הרחם על הצג ולבצע התאמות עדינות למיקום של מתמר עד תצוגה קשתית של העובר כולו מתקבל (איורים 2 ו -3). להקפיא את התמונה ולמדוד את המרחק בין ההיבט הגבי ביותר של הגולגולת ואת הבסיס של הנביאה (איורים 2 ו -3).</li>
	<li>כדי למדוד תקליטור, לקבל תצוגה קשתית של העובר (אותה תמונה עשויה לשמש למדידת SCRL) ולמדוד את המרחק בין ההיבטים הגביים הגחוניים של בית החזה (איורים 2 ו -3).</li>
	<li>כדי למדוד HL, באמצעות אותה תצוגה קשתית של העובר כמתואר במדידות SCRL ותקליטורים, למדוד את המרחק מן הסמל העורפי לבסיס האף (איורים 2 ו -3).</li>
	<li>כדי לחשב את קצב הלב העוברי, לזהות את הלב בתוך חלל בית החזה של העובר על ידי הדמיה התכווצויות קצביות שלה. לחשב את הדופק על ידי ספירת מספר הצירים (פעימות לב) המתרחשים בתוך 1 דקות של זמן. שים לב: אם יחידת אולטרסאונד בשימוש יש יכולות דופלר, תכונה זו עשויה להיות מועסקת כדי לסייע עוד יותר להבחין את הלב מתנועות עובריות לא ספציפיות אחרות.</li>
	<li>ודא שכל התמונות השמורות ולולאות הווידאו כוללות את כל המידע המזהה הדרוש, כולל שם בעל חיים או מספר, תאריך, מדידות ותוויות מבנה מתאימות.</li>
</ol>4. מסקנות פרוצדורליות והתאוששות
<ol><li>הסר את כל שאריות ג'ל מגע אולטרסאונד מהבטן של החיה באמצעות מטלית רכה או מגבות נייר. יש לנקות את הג'ל מהמתמר לפני האחסון.</li>
	<li>אם משתמשים בפרוטוקול ההרדמה המתואר בשלב 1.1, יש לנהל את atipamezole תת עורית במינון של 0.25 מ"ג/ק"ג כדי להפוך את ההשפעות של מדטומידין. אם באמצעות פרוטוקול סם שונה שבו אנטגוניסט זמין, לנהל סוכן זה לבעל החיים על פי המינונים שפורסמו בסיום ההליך כדי להאיץ את ההתאוששות.</li>
	<li>מניחים את muntjac על משטח מיטה רך ב recumbency עצם החזה, עם הראש מורם מעט כדי להפחית את הסיכון של regurgitation ושאיפה של תוכן rumenal. לפקח על החיה מקרוב עד התאושש באופן מלא ומסוגל להסתובב סביב המתחם ללא סיוע.</li>
</ol>

<ol>
	<li>White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+ultrasonic+scanning+in+the+diagnosis+of+pregnancy+and+the+estimation+of+gestational+age+in+cattle.">Real-time ultrasonic scanning in the diagnosis of pregnancy and the estimation of gestational age in cattle.</a> Vet Rec. 117 (1), 5-8 (1985).</li><li>Sergeev, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+ultrasound+imaging+for+predicting+ovine+fetal+age.">Real-time ultrasound imaging for predicting ovine fetal age.</a> Theriogenology. 34 (3), 593-601 (1990).</li><li>Aiumlamai, S., Fredriksson, G., Nilsfors, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+ultrasonography+for+determining+the+gestational+age+of+ewes.">Real-time ultrasonography for determining the gestational age of ewes.</a> Vet. Rec. 131 (24), 560-562 (1992).</li><li>Lee, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonic+measurement+of+fetal+parameters+for+estimation+of+gestational+age+in+Korean+black+goats.">Ultrasonic measurement of fetal parameters for estimation of gestational age in Korean black goats.</a> J. Vet. Med. Sci. 67 (5), 497-502 (2005).</li><li>Renaudin, C. D., Gillis, C. L., Tarantal, A. F., Coleman, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+equine+fetal+growth+from+day+100+of+gestation+to+parturition+by+ultrasonography.">Evaluation of equine fetal growth from day 100 of gestation to parturition by ultrasonography.</a> J. Reprod. Fertil. Suppl. (56), 651-660 (2000).</li><li>Lopate, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimation+of+gestational+age+and+assessment+of+canine+fetal+maturation+using+radiology+and+ultrasonography:+a+review.">Estimation of gestational age and assessment of canine fetal maturation using radiology and ultrasonography: a review.</a> Theriogenology. 70 (3), 397-402 (2008).</li><li>Gatel, L., Rosset, E., Chalvet-Monfray, K., Buff, S., Rault, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+between+fetal+biometry,+maternal+factors+and+birth+weight+of+purebred+domestic+cat+kittens.">Relationships between fetal biometry, maternal factors and birth weight of purebred domestic cat kittens.</a> Theriogenology. 76 (9), 1716-1722 (2011).</li><li>Mulley, R. C., English, A. W., Rawlinson, R. J., Chapple, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+diagnosis+of+fallow+deer+by+ultrasonography.">Pregnancy diagnosis of fallow deer by ultrasonography.</a> Aust. Vet. J. 64 (8), 257-258 (1987).</li><li>Willard, S. T., Sasser, R. G., Jaques, J. T., White, D. R., Neuendorff, D. A., Randel, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+pregnancy+detection+and+the+hormonal+characterization+of+embryonic-fetal+mortality+in+fallow+deer+(Dama+dama).">Early pregnancy detection and the hormonal characterization of embryonic-fetal mortality in fallow deer (Dama dama).</a> Theriogenology. 49 (4), 861-869 (1998).</li><li>Willard, S. T., Petty, S. J., Sasser, R. G., White, D. L., Randel, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+detection+and+the+effects+of+age,+body+weight,+and+previous+reproductive+performance+on+pregnancy+status+and+weaning+rates+of+farmed+fallow+deer+(Dama+dama).">Pregnancy detection and the effects of age, body weight, and previous reproductive performance on pregnancy status and weaning rates of farmed fallow deer (Dama dama).</a> J. Anim. Sci. 77 (1), 32-38 (1999).</li><li>Lenz, M. F., English, A. W., Dradjat, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+ultrasonography+for+pregnancy+diagnosis+and+foetal+ageing+in+fallow+deer.">Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and foetal ageing in fallow deer.</a> Aust. Vet. J. 70 (10), 373-375 (1993).</li><li>White, I. R., McKelvey, W. A., Busby, S., Sneddon, A., Hamilton, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+pregnancy+and+prediction+of+fetal+age+in+red+deer+by+real-time+ultrasonic+scanning.">Diagnosis of pregnancy and prediction of fetal age in red deer by real-time ultrasonic scanning.</a> Vet. Rec. 124 (15), 395-397 (1989).</li><li>Bingham, C. M., Wilson, P. R., Davies, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+ultrasonography+for+pregnancy+diagnosis+and+estimation+of+fetal+age+in+farmed+red+deer.">Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer.</a> Vet. Rec. 126 (5), 102-106 (1990).</li><li>Wilson, P. R., Bingham, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accuracy+of+pregnancy+diagnosis+and+prediction+of+calving+date+in+red+deer+using+real-time+ultrasound+scanning.">Accuracy of pregnancy diagnosis and prediction of calving date in red deer using real-time ultrasound scanning.</a> Vet. Rec. 126 (6), 133-135 (1990).</li><li>Revol, B., Wilson, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonography+of+the+reproductive+tract+and+early+pregnancy+in+red+deer.">Ultrasonography of the reproductive tract and early pregnancy in red deer.</a> Vet. Rec. 128 (10), 229-233 (1991).</li><li>Revol, B., Wilson, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Foetal+ageing+in+farmed+red+deer+using+real-time+ultrasonography.">Foetal ageing in farmed red deer using real-time ultrasonography.</a> Anim. Reprod. Sci. 25 (3), 241-253 (1991).</li><li>Yanagawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+age+estimation+of+Hokkaido+sika+deer+(Cervus+nippon+yesoensis)+using+ultrasonography+during+early+pregnancy.">Fetal age estimation of Hokkaido sika deer (Cervus nippon yesoensis) using ultrasonography during early pregnancy.</a> J. Reprod. Dev. 55 (2), 143-148 (2009).</li><li>Savela, H., Vahtiala, S., Lindeberg, H., Dahl, R. E., Beckers, J. F., Saarela, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+accuracy+of+ultrasonography,+progesterone,+and+pregnancy-associated+glycoprotein+tests+for+pregnancy+diagnosis+in+semidomesticated+reindeer.">Comparison of accuracy of ultrasonography, progesterone, and pregnancy-associated glycoprotein tests for pregnancy diagnosis in semidomesticated reindeer.</a> Theriogenology. 72 (9), 1229-1236 (2009).</li><li>Vahtiala, S., Sakkinen, H., Dahl, E., Beckers, J. F., Ropstad, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonography+in+early+pregnancy+diagnosis+and+measurements+of+fetal+size+in+reindeer+(Rangifer+tarandus+tarandus).">Ultrasonography in early pregnancy diagnosis and measurements of fetal size in reindeer (Rangifer tarandus tarandus).</a> Theriogenology. 61 (4), 785-795 (2004).</li><li>Chapman, N. G., Harris, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+that+the+seasonal+antler+cycle+of+adult+Reeves'+muntjac+(Muntiacus+reevesi)+is+not+associated+with+reproductive+quiescence.">Evidence that the seasonal antler cycle of adult Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) is not associated with reproductive quiescence.</a> J. Reprod. Fertil. 92 (2), 361-369 (1991).</li><li>Chapman, D. I., Chapman, N. G., Dansie, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+periods+of+conception+and+parturition+in+feral+Reeves'+muntjac+(Muntiacus+reevesi)+in+southern+England,+based+upon+age+of+juvenile+animals.">The periods of conception and parturition in feral Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) in southern England, based upon age of juvenile animals.</a> J. Zool. 204 (4), 575-578 (1984).</li><li>Chapman, N. G., Furlong, M., Harris, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproductive+strategies+and+the+influence+of+date+of+birth+on+growth+and+sexual+development+of+an+aseasonally-breeding+ungulate:+Reeves'+muntjac+(Muntiacus+reevesi).">Reproductive strategies and the influence of date of birth on growth and sexual development of an aseasonally-breeding ungulate: Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi).</a> J. Zool. 241 (3), 551-570 (1996).</li><li>Liming, S., Yingying, Y., Xingsheng, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+cytogenetic+studies+on+the+red+muntjac,+Chinese+muntjac,+and+their+F1+hybrids.">Comparative cytogenetic studies on the red muntjac, Chinese muntjac, and their F1 hybrids.</a> Cytogenet. Cell Genet. 26 (1), 22-27 (1980).</li><li>Nyland, T. G., Mattoon, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Chapter 2. Small Animal Diagnostic Ultrasound. , 19-29 (2002).</li><li>Huang, F., Cockrell, D. C., Stephenson, T. R., Noyes, J. H., Sasser, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+serum+pregnancy+test+with+a+specific+radioimmunoassay+for+moose+and+elk+pregnancy-specific+protein+B.">A serum pregnancy test with a specific radioimmunoassay for moose and elk pregnancy-specific protein B.</a> J. Wildl. Manag. 64, 492-499 (2000).</li></ol>

למחברים אין מה לחשוף.

פרוטוקול זה מתאר את היישום של אולטרה סאונד transabdominal לאבחון הריון בצבי muntjac של ריבס. עולה בקנה אחד עם מחקרי אולטרסאונד אחרים, ציוד מתאים ומיומנות טכנית הם הכרחיים לבדיקת הרבייה מוצלחת של האימונית muntjac. סקירה מדוקדקת של אנטומיה בסיסית של יונקים, העקרונות הפיזיים של אולטרסאונד אבחון, ואת המראה...

בדיקה אולטרה-סונוגרפית היא שיטה מתוארת היטב לאבחון הריון בבקר1, כבשים2,3, עזים4, סוסים5, חיותלוויה 6,7, ומינים אחרים של בעלי חיים מקומיים. שיטה זו הדמיה זוהתה גם ככלי רב ערך לגילוי הריון והערכת גיל העובר במספר מינים של cervids בשבי, כולל צבי fallow8-11, צבי אדום12-16, Hokkaido sika צבי17, ואיילים18,19. במקרים רבים, אולטרה סאונד הפיק שיעורי דיוק גבוהים יותר מאשר מנגנונים אחרים של גילוי הריון, כגון פרוגסטרון בסרום או ניתוח גליקופרוטאין הקשורות להריון9,18. יתר על כן, הדמיה אולטרה-דמוגרפית של מערכת הרבייה יכולה לספק מידע נוסף לגבי הכדאיות העוברית, גיל ההיריון וזיהוי מומים התפתחותיים שאחרת היה קשה להעריך. התועלת של אולטרה-סאונד להערכת מצב הרבייה מרמזת על כך שיש להתאים מתודולוגיה זו למינים אחרים שבהם נעשה שימוש בתוכניות רבייה פעילות.
צבי המונטג'אק של ריבס(Muntiacus reevesi)הוא מין קטן שמקורו בדרום מזרח אסיה20. בעוד מחזור הרבייה של בעלי חיים אלה אינו מאופיין היטב בשטחים מולדתם, מחקרים של אוכלוסיות פראיות בחלקים של דרום אנגליה שיפרו את ההבנה של דפוסי הרבייה שלהם20. שלא כמו רוב הסרווידים, נראה כי המונטג'אק של ריבס מתרבה כל השנה, ללא פסגות מתרפסות עונתיות לכאורה20-22. נקבת muntjac בדרך כלל ללדת עופר יחיד לאחר תקופת הריון של 210 יום, ולהיכנס באופן אמין אסטרוס לאחר לידה בתוך 24 שעות20-22. האם זה לא להרות במהלך תקופה זו לאחר הלידה יחזור estrus כ 24-25 ימים מאוחר יותר20. במצבים שבויים, רבייה מושגת בדרך כלל על ידי דיור עושה עם זכר שלם אחד או יותר. מערכת זו מייצרת שיעורי תפיסה משביעי רצון ודורשת מיומנות טכנית מועטה עבור כוח אדם, אולם תאריכי רבייה מדויקים קשים, אם לא בלתי אפשריים, לקבוע.
Muntjac משמשים בדרך כלל במחקרים ציטוגנטיים בשל מגוון רחב של מספרי כרומוזום דיפלואיד ושיעור גבוה של גיוון karyotypic בקרב המינים השונים23. בעלי חיים אלה נחקרים גם כיום כמודל של מחלת פריון פתוגנזה והעברת, עם עניין מיוחד להציב על המחקר של שידור אנכי של מחלת בזבוז כרונית (CWD) ב cervids. החשיבות של muntjac במספר יישומי מחקר שונים עולה כי טכנולוגיות הרבייה משופרת יש להקים כדי להשלים את הליכי החקירה הנוכחיים. באופן ספציפי, מנגנונים לא פולשניים להערכת תקופת ההיריון עלולים להבהיר שינויים קריטיים בביצועי הרבייה ובצמיחה והתפתחות העובר בתנאים ניסיוניים שונים. יתר על כן, הפיתוח של הפניות מדידה עוברית בזמן אמת יהיה בעל ערך פוטנציאלי בהערכת גיל ההיריון במצבים שבהם תאריכי הרבייה לא ניתן לקבוע. מחקרים קודמים תיארו מנגנונים לשימוש במדידות עובריות, כגון אורך כתר-עכוז (CRL), עומק חזה (CD) ואורך הראש (HL) כדי להעריך את השלב המשוער של ההריון במיניםcervid 11-14, 16,17. בנוסף, חלק ממחקרים אלה קבעו גם קווים מנחים המתארים מתי אבני דרך התפתחותיות ספציפיות, כגון מינרליזציה שלד או פעימות לב עובריות, ניתן לזהות8-19. בעוד נתונים אלה עשויים להיות שימושיים כדי לעזור להנחות ניתוח אולטרסאונד הרבייה muntjac, רוב המינים cervid אחרים שנחקרו יש גודל גוף גדול בהרבה ותקופות הריון ארוכות יותר, הפחתת הערך התרגומי של מחקרים אלה עבור יישומי muntjac.
הפרוטוקול המתואר כאן מתאר אולטרה-סאונד טרנסבדומינלי של המונטג'אק הנשי לצורך אבחון וניטור הריון. ביצוע מוצלח של פרוטוקול זה יכול להקל על גילוי הריון מוקדם והערכה של צמיחה והתפתחות העובר. טכניקה זו יש יישומים בעלי ערך בניהול מחקרים לחקור רבייה, בפיתוח הרחם, או שידור אנכי של מחלות זיהומיות במודל cervid קטן עשוי גם להיות שימושי למטרות קליניות בפעולות רבייה בשבי.

<table><tbody><tr><td>Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg)</td><td>Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa</td><td>NADA 135-780</td><td></td></tr><tr><td>Azaperone tartrate (0.035 mg/kg)</td><td>ZooPharm</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Medetomidine HCl (0.04 mg/kg)</td><td>ZooPharm</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound contact gel</td><td>Medline, Mundelein, Illinois</td><td>MDS092005</td><td></td></tr><tr><td>Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg)</td><td>Orion Corporation, Espoo, Finland</td><td>NADA 141-033</td><td></td></tr><tr><td>V-trough (optional)</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough</td></tr><tr><td>Electrical clippers or razor blades for hair removal</td><td>Oster, McMinnville, Tennessee</td><td>78005-140</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound</td><td>E.I. Medical Imaging, Loveland, CO</td><td>Ibex Pro</td><td></td></tr><tr><td>5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array</td><td>E.I. Medical Imaging, Loveland, CO</td><td>290420</td><td></td></tr><tr><td>3 ml syringes</td><td>Covidien</td><td>1.18E+09</td><td></td></tr><tr><td>22 G needles</td><td>Covidien</td><td>8.88E+09</td><td></td></tr></tbody></table>

transabdominal ultrasound for pregnancy diagnosis in reeves' muntjac deer

צבי המונטג'אק של ריבס(Muntiacus reevesi)הוא מין קטן שמקורו בדרום מזרח אסיה, וכיום הוא נחקר כמודל פוטנציאלי להעברת מחלות פריון ופתוגנזה. שידור אנכי הוא תחום עניין בקרב חוקרים החוקרים מחלות זיהומיות, כולל מחלת פריון, וחקירות אלה דורשות שיטות יעילות להערכת ההשפעות של זיהום אימהי על ביצועי הרבייה. בדיקה אולטרה-סונוגרפית היא כלי מבוסס היטב לאבחון הריון ולהערכת בריאות העובר במינים רבים של בעליחיים 1-7, כולל מספר מינים של cervids חקלאי8-19, אולם טכניקה זו לא תוארה צבי muntjac ריבס. כאן אנו מתארים את היישום של אולטרסאונד transabdominal כדי לזהות הריון muntjac עושה כדי להעריך את הצמיחה וההתפתחות העוברית לאורך כל תקופת ההיריון. באמצעות הליך זה, בעלי חיים בהריון זוהו כבר 35 ימים לאחר זיווג doe-buck וזה היה אמצעי יעיל כדי לפקח בבטחה על ההריון במרווחי זמן קבועים. מטרות עתידיות של עבודה זו יכללו קביעת התייחסויות מדידת עובר נורמלי להערכת גיל ההיריון, קביעת רגישות וספציפיות של הטכניקה לאבחון הריון בשלבים שונים של ההריון, וזיהוי וריאציות בצמיחה והתפתחות העובר בתנאים ניסיוניים שונים.

באמצעות הפרוטוקול המתואר כאן, הריון יכול להיות מאובחנים ומנוטרים צבי muntjac של ריב עם טכניקות פולשניות מינימלית. נקודת הזמן המוקדמת ביותר כי ההריון יכול להיות מזוהה על ידי המחברים היה כ 35 ימים לאחר התנהגות הזדווגות שנצפו.
בשלבים המוקדמים של ההיריון, ההריון אובחן על ידי הדמיה ?...

Watch this Scientific Journal Video about Transabdominal Ultrasound for Pregnancy Diagnosis in Reeves' Muntjac Deer at JoVE.com

Transabdominal Ultrasound for Pregnancy Diagnosis in Reeves' Muntjac Deer

אולטרסאונד Transabdominal מתואר כאמצעי יעיל, פולשני להערכת מצב הרבייה צבי muntjac של ריבס. שיטות אלה ניתן להשתמש כדי להשיג אבחון הריון מוקדם כדי להעריך את הכדאיות העוברית. יישומים עתידיים של טכניקה זו כוללים הערכה של גיל ההיריון ואת ההשפעות של מחלה אימהית על התפתחות העובר.

אולטרסאונד Transabdominal לאבחון הריון באייל Muntjac של ריבס

Reeves' muntjac deer (Muntiacus reevesi) are a small cervid species native to southeast Asia, and are currently being investigated as a potential model of ...

transabdominal-ultrasound-for-pregnancy-diagnosis-reeves-muntjac

Research

JoVE Journal

Medicine

10.3K Views.  Colorado State University. אולטרסאונד Transabdominal מתואר כאמצעי יעיל, פולשני להערכת מצב הרבייה צבי muntjac של ריבס. שיטות אלה ניתן להשתמש כדי להשיג אבחון הריון מוקדם כדי להעריך את הכדאיות העוברית. יישומים עתידיים של טכניקה זו כוללים הערכה של גיל ההיריון ואת ההשפעות של מחלה אימהית על התפתחות העובר...

Video: Transabdominal Ultrasound for Pregnancy Diagnosis in Reeves' Muntjac Deer

Murine Fetal Echocardiography

Transgenic mice displaying abnormalities in cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding the molecular mechanisms underlying both normal cardiovascular function and the pathophysiological basis of human cardiovascular disease. Fetal and perinatal death is a common feature when studying genetic alterations affecting cardiac development 1-3. In order to study the role of genetic or pharmacologic alterations in the early development of cardiac function, ultrasound imaging of the live fetus has become an important tool for early recognition of abnormalities and longitudinal follow-up. Noninvasive ultrasound imaging is an ideal method for detecting and studying congenital malformations and the impact on cardiac function prior to death 4. It allows early recognition of abnormalities in the living fetus and the progression of disease can be followed in utero with longitudinal studies 5,6. Until recently, imaging of fetal mouse hearts frequently involved invasive methods. The fetus had to be sacrificed to perform magnetic resonance microscopy and electron microscopy or surgically delivered for transillumination microscopy. An application of high-frequency probes with conventional 2-D and pulsed-wave Doppler imaging has been shown to provide measurements of cardiac contraction and heart rates during embryonic development with databases of normal developmental changes now available 6-10. M-mode imaging further provides important functional data, although, the proper imaging planes are often difficult to obtain. High-frequency ultrasound imaging of the fetus has improved 2-D resolution and can provide excellent information on the early development of cardiac structures 11.

Fetal and perinatal death is a common feature when studying genetic alterations affecting cardiac development. High-frequency ultrasound imaging has improved 2-D resolution and can provide excellent information on early cardiac development and is an ideal method to detect the impact on cardiac structure and function prior to death.

אקו העוברי Murine

Transgenic mice displaying abnormalities in  cardiac development and function represent a powerful tool for the understanding  the molecular mechanisms ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is routinely used as an in vivo model to study embryo implantation and pregnancy progression. Unfortunately, such murine studies require pregnancy interruption to enable follow-up phenotypic analysis. To address this issue, we used three-dimensional (3-D) reconstruction of HFUS imaging data for early detection and characterization of murine embryo implantation sites and their individual developmental progression in utero. Combining HFUS imaging with 3-D reconstruction and modeling, we were able to accurately quantify embryo implantation site number as well as monitor developmental progression in pregnant C57BL6J/129S mice from 5.5 days post coitus (d.p.c.) through to 9.5 d.p.c. with the use of a transducer. Measurements included: number, location, and volume of implantation sites as well as inter-implantation site spacing; embryo viability was assessed by cardiac activity monitoring. In the immediate post-implantation period (5.5 to 8.5 d.p.c.), 3-D reconstruction of the gravid uterus in both mesh and solid overlay format enabled visual representation of the developing pregnancies within each uterine horn. As genetically engineered mice continue to be used to characterize female reproductive phenotypes derived from uterine dysfunction, this method offers a new approach to detect, quantify, and characterize early implantation events in vivo. This novel use of 3-D HFUS imaging demonstrates the ability to successfully detect, visualize, and characterize embryo-implantation sites during early murine pregnancy in a non-invasive manner. The technology offers a significant improvement over current methods, which rely on the interruption of pregnancies for gross tissue and histopathologic characterization. Here we use a video and text format to describe how to successfully perform ultrasounds of early murine pregnancy to generate reliable and reproducible data with reconstruction of the uterine form in mesh and solid 3-D images.

Mice are widely used to study gestational biology. However, pregnancy termination is required for such studies which precludes longitudinal investigations and necessitates the use of large numbers of animals. Therefore, we describe a non-invasive technique of high-frequency ultrasonography for early detection and monitoring of post-implantation events in the pregnant mouse.

שימוש הרומן של בדיקת אולטרה סאונד בתדירות גבוהה תלת מימדי אפיון בתחילת ההריון העכבר

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Developmental Biology

Fetal Echocardiography and Pulsed-wave Doppler Ultrasound in a Rabbit Model of Intrauterine Growth Restriction

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ultrasound and fetal echocardiography. Increasingly, these imaging modalities are being employed clinically to examine cardiac function and assess wellbeing in utero, thereby guiding timing of birth decisions. Here, we used a rabbit model of IUGR that allows analysis of cardiac function in a clinically relevant way. Using isoflurane induced anesthesia, IUGR is surgically created at gestational age day 25 by performing a laparotomy, exposing the bicornuate uterus and then ligating 40-50% of uteroplacental vessels supplying each gestational sac in a single uterine horn. The other horn in the rabbit bicornuate uterus serves as internal control fetuses. Then, after recovery at gestational age day 30 (full term), the same rabbit undergoes examination of fetal cardiac function. Anesthesia is induced with ketamine and xylazine intramuscularly, then maintained by a continuous intravenous infusion of ketamine and xylazine to minimize iatrogenic effects on fetal cardiac function. A repeat laparotomy is performed to expose each gestational sac and a microultrasound examination (VisualSonics VEVO 2100) of fetal cardiac function is performed. Placental insufficiency is evident by a raised pulsatility index or an absent or reversed end diastolic flow of the umbilical artery Doppler waveform. The ductus venosus and middle cerebral artery Doppler is then examined. Fetal echocardiography is performed by recording B mode, M mode and flow velocity waveforms in lateral and apical views. Offline calculations determine standard M-mode cardiac variables, tricuspid and mitral annular plane systolic excursion, speckle tracking and strain analysis, modified myocardial performance index and vascular flow velocity waveforms of interest. This small animal model of IUGR therefore affords examination of in utero cardiac function that is consistent with current clinical practice and is therefore useful in a translational research setting.

We describe examination of fetal cardiac function with contemporary functional fetal echocardiography and fetoplacental Doppler ultrasound using the VisualSonics VEVO 2100 microultrasound in a surgically induced model of intrauterine fetal growth restriction in a rabbit.

אקו העוברי ואולטראסאונד דופלר פעמו גל בדגם ארנב של הגבלת גדילה תוך רחמית

Fetal intrauterine growth restriction (IUGR) results in abnormal cardiac function that is apparent antenatally due to advances in fetoplacental Doppler ...

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and painless, and the application is easy, fast, and can be done anywhere, even with mobile devices. During pregnancy, ultrasound imaging is standardly used to closely monitor fetal development. The technique is important to assess intrauterine growth restriction (IUGR), a pregnancy complication with short- and long-term health consequences for both the mother and fetus. Understanding the process of IUGR is indispensable for developing effective therapeutic strategies. 
The ultrasound system used in this manuscript is an ultrasound device produced for the analysis of small animals and can be used in various research fields, including pregnancy research. Here we describe the usage of the system for in vivo analysis of fetuses from natural killer (NK) cell/mast cell (MC)-deficient mothers that give birth to growth-restricted pups. The protocol includes preparation of the system, handling of the mice before and during measurements, and the usage of the B-mode, color doppler mode, and pulse-wave doppler mode. Fetal size, placental size, and blood supply to the fetus were analyzed. We found reduced implantation sizes and smaller placentas in NK/MC-deficient mice from mid-gestation onwards. In addition, MC/NK-deficiency was associated with absent and reversed end diastolic flow in the fetal Arteria umbilicalis(UmA) and an elevated resistance index. The methods described in the protocol can easily be used for related and non-related research topics.

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Here we describe the technique of high frequency ultrasound for in vivo analysis of fetuses in mice. This method allows the follow-up of fetuses and the analysis of placental parameters as well as maternal and fetal blood flow throughout pregnancy.

אולטרסאונד בתדירות גבוהה לניתוח של התפתחות עוברית היפרדות In Vivo

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

Non-Invasive Ultrasound Assessment of Endometrial Cancer Progression in Pax8-Directed Deletion of the Tumor Suppressors Arid1a and Pten in Mice

Uterine cancers can be studied in mice due to the ease of handling and genetic manipulation in these models. However, these studies are often limited to assessing pathology post-mortem in animals euthanized at multiple time points in different cohorts, which increases the number of mice needed for a study. Imaging mice in longitudinal studies can track the progression of disease in individual animals, reducing the number of mice needed. Advances in ultrasound technology have allowed for the detection of micrometer-level changes in tissues. Ultrasound has been used to study follicle maturation in ovaries and xenograft growth but has not been applied to morphological changes in the mouse uterus. This protocol examines the juxtaposition of pathology with in vivo imaging comparisons in an induced endometrial cancer mouse model. The features observed by ultrasound were consistent with the degree of change seen by gross pathology and histology. Ultrasound was found to be highly predictive of the observed pathology, supporting the incorporation of ultrasonography into longitudinal studies of uterine diseases such as cancer in mice.

Non-Invasive Ultrasound Assessment of Endometrial Cancer Progression in Pax8-Directed Deletion of the Tumor Suppressors Arid1a and Pten in Mice

This protocol describes a method for monitoring the progression of morphological changes over time in the uterus in an inducible mouse model of endometrial cancer using ultrasound imaging with correlation to gross and histological changes.

הערכת אולטרסאונד לא פולשנית של התקדמות סרטן רירית הרחם במחיקה מכוונת Pax8 של מדכאי הגידול Arid1a ו - Pten בעכברים

Uterine cancers can be studied in mice due to the ease of handling and genetic manipulation in these models. However, these studies are often limited to ...

Cancer Research

Is My Mouse Pregnant? High-Frequency Ultrasound Assessment

The mouse is the mammalian animal model of choice for many human diseases and biological processes. Developmental biology often requires staged-pregnant mice to determine evolving processes at various timepoints. Moreover, optimal and efficient breeding of model mice requires an assessment of timed pregnancies. Most commonly, mice are mated overnight, and the presence of a vaginal plug is determined; however, the positive predictive value of this technique is suboptimal, and one needs to wait to know if the mouse is truly pregnant. High-resolution ultrasound biomicroscopy is an effective and efficient tool for imaging: 1) Whether a mouse is pregnant; 2) What gestational stage the mouse has reached; and 3) Whether there are intrauterine losses. In addition to the embryos and fetuses, the investigator must also recognize common artifacts in the abdominal cavity so as not to mistake these for a gravid uterus. This article provides a protocol for imaging along with illustrative examples.

High-resolution ultrasound can help streamline experiments requiring timed-pregnant mice by determining the state of pregnancy, gestational age, and pregnancy losses. Presented here is a protocol to illustrate methods to assess mouse pregnancies as well as potential pitfalls (image artifacts) that may mimic pregnancy.

העכבר שלי בהריון? הערכת אולטראסאונד בתדר גבוה

The mouse is the mammalian animal model of choice for many human diseases and biological processes. Developmental biology often requires staged-pregnant ...

Murine Neural Plate Targeting by In Utero Nano-Injection (NEPTUNE) at Embryonic Day 7.5

Manipulating gene expression in the developing mouse brain in utero holds great potential for functional genetics studies. However, it has previously largely been restricted to the manipulation of embryonic stages post-neurulation. A protocol was developed to inject the amniotic cavity at embryonic day (E)7.5 and deliver lentivirus, encoding cDNA or shRNA, targeting &gt;95% of the neural plate and neural crest cells, contributing to the future brain, spinal cord, and peripheral nervous system. This protocol describes the steps necessary to achieve successful transduction, including grinding of the glass capillary needles, pregnancy verification, developmental staging using ultrasound imaging, and optimal injection volumes matched to embryonic stages. 
Following this protocol, it is possible to achieve transduction of &gt;95% of the developing brain with high-titer lentivirus and thus perform whole-brain genetic manipulation. In contrast, it is possible to achieve mosaic transduction using lower viral titers, allowing for genetic screening or lineage tracing. Injection at E7.5 also targets ectoderm and neural crest contributing to distinct compartments of the eye, tongue, and peripheral nervous system. This technique thus offers the possibility to manipulate gene expression in mouse neural-plate- and ectoderm-derived tissues from preneurulation stages, with the benefit of reducing the number of mice used in experiments.

Murine Neural Plate Targeting by In Utero Nano-Injection NEPTUNE at Embryonic Day 7.5

In this protocol, we describe how to inject the mouse amniotic cavity at E7.5 with lentivirus, leading to uniform transduction of the entire neural plate, with minimal detrimental effects on survival or embryonic development.

מיקוד צלחת עצבית מורין על ידי ננו-הזרקת רחם (NEPTUNE) ביום עוברי 7.5

Manipulating gene expression in the developing mouse brain in utero holds great potential for functional genetics studies. However, it has previously ...

Ultrasonography in Experimental Reproductive Investigations on Rats

With the development of assisted reproductive technology and the ethical limitations of research on humans, rat animal models have been widely used in reproductive medicine. In the past, the study of reproductive system development in rodents has been based on one-time histological examination of excised tissues. Recently, with the development of high-resolution transabdominal ultrasound, high-quality sonography can now be performed to evaluate the reproductive organs of rats, allowing a new method for studying the reproductive system. Images were obtained using a high-resolution ultrasonographic system. Gynecological ultrasonography was performed on 28 eight-week-old non-pregnant rats and 5 pregnant Sprague-Dawley rats. We describe how to recognize organs of the reproductive system and associated structures in typical views during different phases of the estrus cycle. Color flow Doppler was used to measure uterine artery blood flow and evaluate uterine blood flow pattern changes during different stages of pregnancy. We have demonstrated that ultrasound exploration is a useful method for evaluating changes in internal reproductive organs. Its use raises the possibility of conducting additional experiments, including medical or surgical procedures, and provides the ability to monitor sonographic changes to internal organs without sacrificing animals.

This manuscript describes the utility of ultrasound performed on female rats to design experimental models for reproductive and gynecological investigation. A step-by-step explanation of how to perform ultrasonographic evaluation is shown.

בדיקת אולטרה סאונד בחקירות הרבייה ניסויים על חולדות

With the development of assisted reproductive technology and the ethical limitations of research on humans, rat animal models have been widely used in ...

Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.

Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer.

שיטות איסוף חלב לעכברים וריבס &#39;Muntjac צביים

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native ...

Biology

Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive behaviors and the acquisition of gametes and embryos for physiological or molecular research. Amphibians contribute to one-quarter to one-third of vertebrate research, and of interest in this context is their contribution to the scientific community&#39;s knowledge of reproductive processes and embryological development. However, most of this knowledge is derived from a small number of species. In recent times, the decimation of amphibians across the globe has required increasing intervention by conservationists. The captive recovery and assurance colonies that continue to emerge in response to the extinction risk make existing research and clinical applications invaluable to the survival and reproduction of amphibians held under human care. The success of any captive population is founded on its health and reproduction and the ability to develop viable offspring that carry forward the most diverse genetic representation of their species. For researchers and veterinarians, the ability to monitor and control ovarian development and health is, therefore, imperative. The focus of this article is to highlight the different assisted reproductive techniques that can be used to monitor and, where appropriate or necessary, control ovarian function in amphibians. Ideally, any reproductive and health issues should be reduced through proper captive husbandry, but, as with any animal, issues of health and reproductive pathologies are inevitable. Non-invasive techniques include behavioral assessments, visual inspection and palpation and morphometric measurements for the calculation of body condition indices and ultrasound. Invasive techniques include hormonal injections, blood sampling, and surgery. Ovarian control can be exercised in a number of ways depending on the application required and species of interest.

The study of amphibian biology provides valuable information on the reproductive, physiological, embryological and developmental processes that drive organisms of many taxonomic groups. Here, we present a comprehensive guide on different methodologies that can be used to study ovarian control and monitoring in amphibians.

טכניקות הרבייה ניטור ובקרה של השחלות

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive ...