המחברים לא תודות לך

הפרוטוקול עוקב אחר הקווים המנחים של אוניברסיטת בית החולים ציריך האנושי מחקר ועדת האתיקה.
1. אבחנות של Neuromata, בחירת מטופלים:
<ol><li>לבצע בלוקים עצבים לפני הניתוח proximal כדי נירומה כדי לאשר את האבחונים. להעריך את אבני בשליש האמצעי של האמה ולהשמיט מפעילים פוטנציאליים של האזורים העצבוב חופפים SBRN, כגון העצב עורית antebrachial הלטראלי (LACN), עצב interosseous האחורי (PIN), ענף הגבי של עצב הגומד 10.</li>
	<li>לבצע ניתוח רק בחולים עם כאב ניכר צמצום (לפחות 5 נקודות על חזותי אנלוגי סולם (VAS) לכאב)11.</li>
</ol>2. ניתוח הכנה
<ol><li>וחלילה החולה כל צריכת מזון או נוזלים 6 שעות לפני הניתוח.</li>
	<li>המקום החולה באמצע חבילת כירורגית על שולחן פעיל אוניברסלי בעמדה כיסא חוף.</li>
	<li>במקום הזרוע/יד המושפעים על מנוחה לזרוע.</li>
	<li>תשאל את anesthetists כדי לבצע הרדמה אנדוטרכאליות (פנטניל 2 µg/kg, rocuronium 0.6 מ"ג/ק"ג, propofol 150-250 מ"ג).</li>
	<li>לחטא את העור עם povidone יוד בשטח של שאיבת שומן (למשל בירך הפנימית ו/או הבטן העליונה/התחתונה), האתר של נירומה כריתה.</li>
	<li>לכסות את המטופל עם וילונות כירורגי סטרילי, להשאיר חשוף האתר של שאיבת שומן, באתר כירורגית.</li>
</ol>3. שאיבת שומן בפוליצר
<ol><li>להפוך מספר חתכים קטנים דקירה (ניקוב) של 3-5 מ"מ קוטר עם איזמל #11-להב באזור של שאיבת שומן. פצעים וחתכים עד כמה נגיש את השכבה התת עורית.</li>
	<li>להזריק את הפתרון בפוליצר המכיל לידוקאין שתדללו של אפינפרין (לקטט פתרון 500 מ"ל רינגר, 20 מ"ל של לידוקאין 1%, 1 מ ג אפינפרין) באמצעות המסתנן-14 (שחדר בצינורית) לתוך שכבת השומן התת עורית (3 מ מ לעומק) ב- אזור של קצירת שמן.</li>
	<li>להמתין לפחות 20 דקות ומאפשר את הפתרון בפוליצר ייכנסו לתוקף.</li>
	<li>הוק 3 מ מ איסוף בצינורית (החיצונית בקוטר 3 מ מ, אורך 26 ס"מ) 60-mL טומיי המזרק ולהתחיל קציר שומן באמצעות חתכים דקירה. הערה: היד nondominant שולט ללא הרף והשמה כמובן הצינורית.</li>
	<li>למשוך בחזרה על הבוכנה של המזרק טומיי לסימן 60-mL ולמקם מלחציים נגד יתושים לאורך הבוכנה מופנמים על מנת לשמור על לחץ שלילי במזרק, למנוע יצירת ואקום רציפה עם היד הדומיננטית.</li>
	<li>הקציר מינימום של 220 מ של רקמת שומן על-ידי הצבת את טומי? המזרקים בצורה מאונכת בבסטה מזרק טומיי שסופקו; פעולה זו מאפשרת את שיקוע של שומן, ההפרדה מן הנוזל.</li>
	<li>לקחת טיפול מיוחד כדי לקבל השתלה שמן באיכות טובה ללא כמות משמעותית של דם. הערה: לשנות את האזור של שאיבת שומן כאשר תוכן augmented דם הוא הבחין.</li>
	<li>תפר את החתכים לדקור עם תפרים פשוטים והפעילו לחץ לפי הצורך (למשל compressive חגורה).</li>
	<li>להעביר את lipoaspirate לתוך ערכה סטרילית חד-פעמיים חד פעמיות של מערכת הבידוד.</li>
	<li>שמור מזרק אחד טומיי עם lipoaspirate העמדה שמוצגת על מנת לקבל את השבר שומן עבור lipofilling מאוחר יותר.</li>
</ol>4. רקמת שומן עיבוד
<ol><li>סגור את ערכת מתכלה סטרילי. הערה: מערכת הבידוד (ראה טבלה של חומרים) מאשרת את השלמות על ידי ביצוע מבחן רטוב.</li>
	<li>בצע את ההוראות על התצוגה. הערה: התהליך הוא בעיקר תוכנה מבוקר ולא רק דורש אישור ידני עבור הצעדים המפורטים להלן על ידי לחיצה על הלחצנים 'הבא' או 'חזרה' בלוח הבקרה. Lipoaspirate מועבר לתוך המיכל אוסף רקמה. את המכל אוסף של רקמות, lipoaspirate שקל, באופן אוטומטי לנקות עם תמיסת רינגר לקטט כדי להסיר את שאריות תאי הדם ואת פתרון הרטבה.</li>
	<li>להוסיף יותר שומן אם נדרש. הערה: בהתאם המשקל של רקמת שומן שנקטפו מערכת הבידוד מבקשת מהמשתמש להוסיף יותר שומן או הוא מחשב את הסכום של ריאגנט אנזימים נוספים כדי להוסיף.</li>
	<li>להוסיף את הכמות הנדרשת של אנזים ריאגנט כאשר תתבקש על-ידי מערכת הבידוד. הערה: במהלך התהליך של עיכול אנזימטי, הפרדת שומנים בדם את SVF מושגת. ובכך, הרקמה הוא נדנוד תנועה. לאחר השלמת עיכול אנזימטי, SVF מועברים באופן אוטומטי אל החדר צנטריפוגה תא ריכוז. בבית הבליעה צנטריפוגה, SVF הוא מרוכז כדי גלולה תא (מהירות צנטריפוגה היא כ 3000 g x). לבסוף, בגדר התא עובר סדרה של שוטף עם תמיסת רינגר לקטט כדי להפחית את רמות אנזים שיורית בפלט. כאשר התהליך יושלם, 5 מ של נוזל צלול (SVF) מתקבל.</li>
</ol>5. ניתוח
<ol><li>לפנות את נירומה, עושים חתך בעור מעל האתר נירומה שאובחנו בעבר בשליש הדיסטלי של האמה.</li>
	<li>תחת השימוש כירורגי המשקפת זכוכיות מגדלת זכוכית מגדלת משקפיים (2.5-3.5 X), להמשיך לנתח את הרקמה התת עורית ולזהות proximal כדי נירומה העצב המעורבים.<ol>
<li>לאחר מכן, בצע את העצב יש ולזהות את נירומה (בהתבסס על בדיקה ויזואלית).</li>
	</ol>
</li>
	<li>לאחר ההרחבה מלא של נירומה ברור, להתחיל לסלק את נירומה על ידי חתך ישר הטרנס-עצבי מספריים. אם אין נירומה מזוהה, מבוצע רק neurolysis של העצב.</li>
	<li>המשיכו עם neurolysis של העצב הגדם שנותר עד לפרק כף היד הפרוקסימלית של 3 ס מ. הערה: בסוף הגדם עצב צריך להיות ממוקם באמצע של החתך העיקרי.</li>
	<li>לארגן שניים עד ארבעה מקומות (דקירות) חתכים (1 מ מ קוטר) עם איזמל דרך cutis באפידרמיס, עורי סביב הגישה העיקרי.</li>
	<li>מקום קנולות בוטה שניים עד ארבעה (16-מד, באורך 9 ס מ) דרך perineural חתכים לדקור את הגדם. הערה: קצה קנולות צריכות להיות מופנות כלפי הגדם עצב.</li>
	<li>אבטח את קנולות במקום על ידי ההלבשה דבק.</li>
	<li>למקם את התפרים סביב קנולות ולהשאיר את חומר תפרים באתרו ללא מאבטחים את הצומת.</li>
	<li>תפר החתך העיקרי בחוזקה כדי למנוע זרימה יוצאת של הרכבה. הערה: ודא כי קנולות נשארים באתרו.</li>
</ol>6. יישום של השתל השמן מועשר SVF
הערה: לאחר כ 1.5 h של עיבוד, 5 מיליליטר SVF מעובד הוא מוכן לשימוש נוסף.
<ol><li>וביופסיה 5 מיליליטר SVF במזרק המקיימים תקשורת 10-mL.</li>
	<li>באותו אופן, תשאף 2 מ"ל של השבר השומנים sedimented במזרק 10-mL מנוגדות.</li>
	<li>מערבבים את 5 מיליליטר SVF עם mL 2 של השבר השומנים sedimented, לסירוגין למשוך בחזרה על הבוכנה של מזרק אחד ומושך את הבוכנה של המזרק בתקשורת, היריב עד ערבוב מספיק מתקבל.</li>
	<li>לחלק השתל השמן מועשר SVF באותה מידה במזרקים 10 מ ל 2-4.</li>
	<li>להפיץ מוכן מועשרת SVF השתל שמן אחד אחרי השני באותה מידה סביב העצב סטאמפ על-ידי חיבור של המזרקים קנולות בוטה. הערה: לפני החלת השתל, לוודא קנולות מאובטחים בתנוחה הנכונה להיזהר שלא לנקוע את קנולות תוך יישום השתל השמן.</li>
	<li>הסר את קנולות בקפידה.</li>
	<li>לאחר מכן, קלטת את החתכים ניקוב קטנים עם פלסטרים.</li>
	<li>לשתק את היד על-ידי החלה של סד ב מהותי פלוס מיקום (מפרקים metacarpophalangeal (MCP) מכופפות על 60-70 מעלות המפרקים (IP) interphalangeal מוארך, האגודל בדקו האגרוף, היד כיפוף הגבי של 25°). אם רק neurolysis של העצב מבוצע, סד אין צורך וחבש את היד, כף היד הם במשך 10 ימים.</li>
</ol>7. לאחר הניתוח החולה טיפול
<ol><li>להעביר את החולה יחידת הרדמה שלאחר השחזור לאחר הניתוח, ולאפשר לניטור מספיק במחלקה.</li>
	<li>להמשיך לשתק את כף היד במשך 10 ימים לאחר הניתוח.</li>
	<li>ביצוע השינוי הראשון של תחבושות לאחר 48 שעות לאחר הניתוח ולהמשיך במרווחי זמן קבועים (כלומר כל יום השני עד השחרור).</li>
	<li>הסרת התפרים 12-14 ימים במשככי.</li>
	<li>לבצע הערכה קלינית של כאב במהלך מעקב ב- 2, 6, 12, ו- 36 חודשים.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Mackinnon, S. E., Dellon, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Results+of+treatment+of+recurrent+dorsoradial+wrist+neuromas.">Results of treatment of recurrent dorsoradial wrist neuromas.</a> Ann Plast Surg. 19 (1), 54-61 (1987).</li><li>Hazari, A., Elliot, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+end-neuromas,+neuromas-in-continuity+and+scarred+nerves+of+the+digits+by+proximal+relocation.">Treatment of end-neuromas, neuromas-in-continuity and scarred nerves of the digits by proximal relocation.</a> J Hand Surg Br. 29 (4), 338-350 (2004).</li><li>Goldstein, S. A., Sturim, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraosseous+nerve+transposition+for+treatment+of+painful+neuromas.">Intraosseous nerve transposition for treatment of painful neuromas.</a> J Hand Surg Am. 10 (2), 270-274 (1985).</li><li>Koch, H., Haas, F., Hubmer, M., Rappl, T., Scharnagl, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+painful+neuroma+by+resection+and+nerve+stump+transplantation+into+a+vein.">Treatment of painful neuroma by resection and nerve stump transplantation into a vein.</a> Ann Plast Surg. 51 (1), 45-50 (2003).</li><li>Vaienti, L., Merle, M., Battiston, B., Villani, F., Gazzola, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perineural+fat+grafting+in+the+treatment+of+painful+end-neuromas+of+the+upper+limb:+a+pilot+study.">Perineural fat grafting in the treatment of painful end-neuromas of the upper limb: a pilot study.</a> J Hand Surg Eur. 38 (1), 36-42 (2013).</li><li>Zuk, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multilineage+cells+from+human+adipose+tissue:+implications+for+cell-based+therapies.">Multilineage cells from human adipose tissue: implications for cell-based therapies.</a> Tissue Eng. 7 (2), 211-228 (2001).</li><li>Fraser, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Celution+System:+Automated+Processing+of+Adipose-Derived+Regenerative+Cells+in+a+Functionally+Closed+System.">The Celution System: Automated Processing of Adipose-Derived Regenerative Cells in a Functionally Closed System.</a> Adv Wound Care (New Rochelle). 3 (1), 38-45 (2014).</li><li>Guo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+vascular+fraction:+A+regenerative+reality?+Part+2:+Mechanisms+of+regenerative+action.">Stromal vascular fraction: A regenerative reality? Part 2: Mechanisms of regenerative action.</a> J Plast Reconstr Aesthet Surg. 69 (2), 180-188 (2015).</li><li>Lutz, B. S., Ma, S. F., Chuang, D. C., Chan, K. H., Wei, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interposition+of+a+pedicle+fat+flap+significantly+improves+specificity+of+reinnervation+and+motor+recovery+after+repair+of+transected+nerves+in+adjacency+in+rats.">Interposition of a pedicle fat flap significantly improves specificity of reinnervation and motor recovery after repair of transected nerves in adjacency in rats.</a> Plast Reconstr Surg. 107 (1), 116-123 (2001).</li><li>Calcagni, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+novel+treatment+of+SVF-enriched+fat+grafting+for+painful+end-neuromas+of+superficial+radial+nerve.">The novel treatment of SVF-enriched fat grafting for painful end-neuromas of superficial radial nerve.</a> Microsurgery. , (2016).</li><li>Hawker, G. A., Mian, S., Kendzerska, T., French, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measures+of+adult+pain:+Visual+Analog+Scale+for+Pain+(VAS+Pain),+Numeric+Rating+Scale+for+Pain+(NRS+Pain),+McGill+Pain+Questionnaire+(MPQ),+Short-Form+McGill+Pain+Questionnaire+(SF-MPQ),+Chronic+Pain+Grade+Scale+(CPGS),+Short+Form-36+Bodily+Pain+Scale+(SF-36+BPS),+and+Measure+of+Intermittent+and+Constant+Osteoarthritis+Pain+(ICOAP).">Measures of adult pain: Visual Analog Scale for Pain (VAS Pain), Numeric Rating Scale for Pain (NRS Pain), McGill Pain Questionnaire (MPQ), Short-Form McGill Pain Questionnaire (SF-MPQ), Chronic Pain Grade Scale (CPGS), Short Form-36 Bodily Pain Scale (SF-36 BPS), and Measure of Intermittent and Constant Osteoarthritis Pain (ICOAP).</a> Arthritis Care Res (Hoboken). 63 Suppl. 63, S240-S252 (2011).</li><li>Stokvis, A., van der Avoort, D. J., van Neck, J. W., Hovius, S. E., Coert, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+management+of+neuroma+pain:+a+prospective+follow-up+study.">Surgical management of neuroma pain: a prospective follow-up study.</a> Pain. 151 (3), 862-869 (2010).</li><li>Kolle, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enrichment+of+autologous+fat+grafts+with+ex-vivo+expanded+adipose+tissue-derived+stem+cells+for+graft+survival:+a+randomised+placebo-controlled+trial.">Enrichment of autologous fat grafts with ex-vivo expanded adipose tissue-derived stem cells for graft survival: a randomised placebo-controlled trial.</a> Lancet. 382 (9898), 1113-1120 (2013).</li><li>Zhu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte+regeneration+after+free+fat+transplantation:+promotion+by+stromal+vascular+fraction+cells.">Adipocyte regeneration after free fat transplantation: promotion by stromal vascular fraction cells.</a> Cell Transplant. 24 (1), 49-62 (2015).</li><li>Eto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+human+adipose+tissue-resident+hematopoietic+cell+populations+reveals+a+novel+macrophage+subpopulation+with+CD34+expression+and+mesenchymal+multipotency.">Characterization of human adipose tissue-resident hematopoietic cell populations reveals a novel macrophage subpopulation with CD34 expression and mesenchymal multipotency.</a> Stem Cells Dev. 22 (6), 985-997 (2013).</li><li>Premaratne, G. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+vascular+fraction+transplantation+as+an+alternative+therapy+for+ischemic+heart+failure:+anti-inflammatory+role.">Stromal vascular fraction transplantation as an alternative therapy for ischemic heart failure: anti-inflammatory role.</a> J Cardiothorac Surg. 6, 43 (2011).</li><li>Paik, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+in+Fat+Grafting:+Part+V.+Cell-Assisted+Lipotransfer+to+Enhance+Fat+Graft+Retention+Is+Dose+Dependent.">Studies in Fat Grafting: Part V. Cell-Assisted Lipotransfer to Enhance Fat Graft Retention Is Dose Dependent.</a> Plast Reconstr Surg. 136 (1), 67-75 (2015).</li></ol>

המחברים אין לחשוף.

מטרת המחקר הנוכחי היא להמחיש באופן שיטתי את ההיבטים הטכניים של מועשרת SVF הרכבה השמן לטיפול סימפטומטי סוף-neuromata רומן.
Neuromata של SBRN קשורים עם שיעור הצלחה כירורגי של 33% רק12. . Vaienti et al. הציג שורה של תוצאות חיוביות בתחילת המעקב באמצעות perineural שומן הרכבה (PFG) ?...

הנהלת סימפטומטי סוף-neuromata של SBRN נותר מאתגר עם שפע של טיפולים כירורגיים הקיים. ב־1995, נירומה זה טוחנות, עצב הגדם שנותר פלשתין למבנים הסמוכים כגון שרירים1,2, עצם3או ורידים4. ההנחה היא כדי למנוע מחוץ לבלוב ההתחדשות fascicles עצבית על ידי מחקה את האווירה של איבר בסוף. עם זאת, אף אחת משיטות אלה הוכיח עליון, כפי שיעור גבוה של כאב נסיגה וצמצום כאב לא מספיקות נצפו לעתים קרובות.
לאחרונה, הרכבה שומן סביב עצב הגדם שנותר הניבו תוצאות מבטיחות, היה דגלו בתור אפשרות טיפול חדשה עבור סוף כואב-neuromata של הגפיים העליונות5. חוץ מתנהג כמו מחסום מכני כדי למנוע תנועה מתמשכת, הקש על כאב, ההיבט מועילות של הרכבה השמן מיוחס מעדיף מהרמה התאית. רקמת שומן אנושי מכיל סוגי תאים מרובים, כולל preadipocytes, תאי פיטום, pericytes, תאי אנדותל, תאי השריר החלק בכלי הדם, fibroblasts, אדיפוז נגזר תאי גזע (ADSCs) יחד עם תאי גזע hematopoietic6. אוכלוסייה הטרוגנית תא זו נחשבת Adipose-Derived התחדשות תאים (ADRCs) או SVF, ניתן להשיג את lipoaspirate על ידי מערכת הבידוד (ראה טבלה של החומרים), ריאגנט אנזים יישומית (ראה טבלה של חומרים )7. מנגנון הפעולה המדויק עדיין לא לגמרי מובנת; עם זאת, SVF שויכה שיפורים אנגיוגנזה, immunomodulation, בידול, הפרשת מטריצה חוץ-תאית8.
האוכלוסייה מרוכזת תא SVF מתווסף השתל שומן במטרה להקטין את קצב ספיגת וכדי להגדיל את פוטנציאל הרגנרציה של השתל השמן, כמו מחקרים שנעשו לאחרונה חשף relapse כאב לאחר 12 חודשים עם הרכבה שומן ללא SVF הוסיף 5. יתר על כן, הפעולה הביולוגית מספק גם השפעות מועילות על העצב עצמו על-ידי הפחתת עצב לא מאורגן הלבלוב של הגדם9 , adherences צלקת עוקבות אשר עלול לגרום עצב מלכוד.
המחקר הקליני הראשון לתאר מועשרת SVF הרכבה השמן האופציה הכירורגית חדשניים לטיפול סימפטומטי סוף-neuromata של SBRN כבר פרסם לאחרונה10. באופן כללי, הטכניקה ניתן ליישם כל נירומה המתרחשים לאחר פגיעה בשוגג או iatrogenic עצב. מטרת המחקר הבאים הנוכחי היא להמחיש באופן שיטתי את ההיבטים הטכניים של הליך זה.

<table><tbody><tr><td>Cytori Celution System</td><td>Cytori</td><td></td><td>isolation system</td></tr><tr><td>Celase</td><td>Cytori</td><td></td><td>enyzme reagent</td></tr><tr><td>liposuction system</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>tumescent solution (500 ml Lactated Ringers, 20 ml of 1% lidocaine and 1 mg epinephrine)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>14-gauge infiltrator</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>3 mm-collecting cannula (15, 26, 32 cm)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>60 mL Tommey syringes</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>mosquito clamp</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Toomey syringe stand</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>4 cannulas (fat injecting cannulas 1.5 mm, syringe NO.2, 90 mm)</td><td>Chalybs</td><td></td><td></td></tr><tr><td>10 mL syringes</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>connecting device for syringes</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>#11- and #15-blade scalpel</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>stevens scissors</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>pins pincette</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>bipolar electrocautery</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>suture material</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>adhesive dressing</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>binocular loupes magnifier glasses (2.5-3.5x)</td><td>Carl Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Statistical Package for Social Sciences, version 22</td><td>IBM</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

stromal vascular fraction-enriched fat grafting for the treatment of symptomatic end-neuromata

מטרת מחקר זה הייתה להמחיש באופן שיטתי והצל את השלבים מכריע של השבר בכלי הדם סטרומה (SVF)-מועשר ושמן הארכת כטיפול הרומן של סוף סימפטומטי-neuromata של העצבים החישה היקפיים, במחקר זה, במיוחד הסניף שטחית של עצב רדיאלי (SBRN). למרות שפע של טיפולים קיימים, כאב לאחר הניתוח מתמשך relapse כאב נפוצים הם עדיין נפוץ מאוד, עצמאית של ההליך העריך. נירומה הוא פרוטוקול בהתאם ל מתוקננת נכרת מתחת ללשון. במקום המעבר של הגדם עצב ההתחדשות שכנות מבנים אנטומיים, כגון שרירים או עצמות, השתלה השמן הוא perifocally יישומית, משמש כמחסום מכני. על מנת להקטין את קצב ספיגת שומן, להגביר את פוטנציאל הרגנרציה של השתל, משולב של SVF מרוכז משתילים. SVF מופרד מן השומן התת עורית על ידי הפרדת lipoaspirate על-ידי מערכת הבידוד מסחריים ספציפיים אנזימטיות, מכונאי. השתל השמן מועשר SVF מספק מחסום מכני וגם השפעות ביולוגיות שונות ברמה התאית, כולל שיפור אנגיוגנזה, דלקת, פיברוזיס. אפקטים מכני וגם וחיסונים לעזור להפחית את תוצר עצב לא מאורגן של הגדם עצב במהלך התחדשות העצבים ולכן למנוע הישנות של סוף כואב-neuromata.

הנתונים נותחו באמצעות תוכנה סטטיסטית והציג כפי שאומר סטיות תקן ±. מבחן קולמוגורוב-סמירנוב הוחלה כדי לאמת את ההתפלגות nonparametric מאוכלוסיית המחקר ואישר התפלגות אמפירי שלילי. בהתבסס על האופי nonparametric של אוכלוסיית המחקר, לבדיקת של Wilcoxon דגימות קשורים הועסק כדי להשוות בין תוצאות...

Watch this Scientific Journal Video about Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata at JoVE.com

Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata

סטרומה כלי דם מועשר שבר השמן הרכבה לטיפול סימפטומטי סוף-neuromata

מטרת המחקר היא כדי להמחיש את ההליך הטכני של השבר בכלי הדם סטרומה (SVF)-מועשר הרכבה שמנה כמו טיפול הרומן של סוף סימפטומטי-neuromata. טכניקה זו מספקת יתרונות של המכשול מכני וגם הפעולה ביולוגית ברמה התאית על ידי SVF מעובד ומרוכז.

The purpose of this study was to methodically illustrate and highlight the crucial steps of stromal vascular fraction (SVF)-enriched fat grafting as a ...

stromal-vascular-fraction-enriched-fat-grafting-for-treatment

Research

JoVE Journal

Medicine

7.6K Views.  University Hospital Zurich. מטרת המחקר היא כדי להמחיש את ההליך הטכני של השבר בכלי הדם סטרומה (SVF)-מועשר הרכבה שמנה כמו טיפול הרומן של סוף סימפטומטי-neuromata. טכניקה זו מספקת יתרונות של המכשול מכני וגם הפעולה ביולוגית ברמה התאית על ידי SVF מעובד ומרוכז.

Video: Stromal Vascular Fraction-enriched Fat Grafting for the Treatment of Symptomatic End-neuromata

A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper vessel development and homeostasis. However, studies on endothelial lineage hierarchy remain elusive due to the lack of tools to gain access as well as to directly evaluate their behavior in vivo. To address this shortcoming, a new tissue model to study angiogenesis using the mammary fat pad has been developed. The mammary gland develops mostly in the postnatal stages, including puberty and pregnancy, during which robust epithelium proliferation is accompanied by extensive vascular remodeling. Mammary fat pads provide space, matrix, and rich angiogenic stimuli from the growing mammary epithelium. Furthermore, mammary fat pads are located outside the peritoneal cavity, making them an easily accessible grafting site for assessing the angiogenic potential of exogenous cells. This work also describes an efficient tracing approach using fluorescent reporter mice to specifically label the targeted population of vascular endothelial stem cells (VESCs) in vivo. This lineage tracing method, coupled with subsequent tissue whole-mount microscopy, enable the direct visualization of targeted cells and their descendants, through which the proliferation capability can be quantified and the differentiation commitment can be fate-mapped. Using these methods, a population of bipotent protein C receptor (Procr) expressing VESCs has recently been identified in multiple vascular systems. Procr+ VESCs, giving rise to both new ECs and pericytes, actively contribute to angiogenesis during development, homeostasis, and injury repair. Overall, this manuscript describes a new mammary fat pad transplantation and in vivo lineage tracing techniques that can be used to evaluate the stem cell properties of VESCs.

This work demonstrates a novel approach to assess the proliferation, differentiation, and vessel-forming potential of vascular endothelial stem cells (VESCs) through mammary fat pad transplantation followed by whole-mount tissue preparation for microscopic observation. A lineage tracing strategy to investigate the behavior of VESCs in vivo is also presented.

רומן חדש פאט שומן טכניקת השתלת לדמיין את כלי השיט הדור של כלי הדם בתאי גזע אנדותל

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper ...

Developmental Biology

Assessment of Viability of Human Fat Injection into Nude Mice with Micro-Computed Tomography

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft tissue filler as it is readily available, easily obtained, inexpensive, and inherently biocompatible.1 However, despite its burgeoning popularity, fat grafting is hampered by unpredictable results and variable graft survival, with published retention rates ranging anywhere from 10-80%. 1-3
To facilitate investigations on fat grafting, we have therefore developed an animal model that allows for real-time analysis of injected fat volume retention. Briefly, a small cut is made in the scalp of a CD-1 nude mouse and 200-400 &#181;l&#160;of processed lipoaspirate is placed over the skull. The scalp is chosen as the recipient site because of its absence of native subcutaneous fat, and because of the excellent background contrast provided by the calvarium, which aids in the analysis process. Micro-computed tomography (micro-CT) is used to scan the graft at baseline and every two weeks thereafter. The CT images are reconstructed, and an imaging software is used to quantify graft volumes.
Traditionally, techniques to assess fat graft volume have necessitated euthanizing the study animal to provide just a single assessment of graft weight and volume by physical measurement ex vivo. Biochemical and histological comparisons have likewise required the study animal to be euthanized. This described imaging technique offers the advantage of visualizing and objectively quantifying volume at multiple time points after initial grafting without having to sacrifice the study animal. The technique is limited by the size of the graft able to be injected as larger grafts risk skin and fat necrosis. This method has utility for all studies evaluating fat graft viability and volume retention. It is particularly well-suited to providing a visual representation of fat grafts and following changes in volume over time.

Fat grafting is an essential technique for reconstructing soft tissue deficits. However, it remains an unpredictable procedure characterized by variable graft survival. Our goal was to devise a mouse model that utilizes a novel imaging method to compare volume retention between differing techniques of fat graft preparation and delivery.

הערכה של יכולת הקיום של הזרקת שומן האנושי בעכברי עירום עם מיקרו-טומוגרפיה ממוחשבת

Lipotransfer is a vital tool in the surgeon&#8217;s armamentarium for the treatment of soft tissue deficits of throughout the body. Fat is the ideal soft ...

A Patient-Derived Xenograft Model for Venous Malformation

Venous malformation (VM) is a vascular anomaly that arises from impaired development of the venous network resulting in dilated and often dysfunctional veins. The purpose of this article is to carefully describe the establishment of a murine xenograft model that mimics human VM and is able to reflect patient heterogeneity. Hyper-activating non-inherited (somatic) TEK (TIE2) and PIK3CA mutations in endothelial cells (EC) have been identified as the main drivers of pathological vessel enlargement in VM. The following protocol describes the isolation, purification and expansion of patient-derived EC expressing mutant TIE2 and/or PIK3CA. These EC are injected subcutaneously into the back of immunodeficient athymic mice to generate ectatic vascular channels. Lesions generated with TIE2 or PIK3CA-mutant EC are visibly vascularized within 7&#8210;9 days of injection and recapitulate histopathological features of VM patient tissue. This VM xenograft model provides a reliable platform to investigate the cellular and molecular mechanisms driving VM formation and expansion. In addition, this model will be instrumental for translational studies testing the efficacy of novel drug candidates in preventing the abnormal vessel enlargement seen in human VM.

We present a detailed protocol to generate a murine xenograft model of venous malformation. This model is based on the subcutaneous injection of patient-derived endothelial cells containing hyper-activating TIE2 and/or PIK3CA gene mutations. Xenograft lesions closely recapitulate the histopathological features of VM patient tissue.

מודל קסנוגרפט נגזר ממטופל למום ורדי

Venous malformation (VM) is a vascular anomaly that arises from impaired development of the venous network resulting in dilated and often dysfunctional ...

Isolation of Murine Adipose Tissue-derived Microvascular Fragments as Vascularization Units for Tissue Engineering

A functional microvascular network is of pivotal importance for the survival and integration of engineered tissue constructs. For this purpose, several angiogenic and prevascularization strategies have been established. However, most cell-based approaches include time-consuming in vitro steps for the formation of a microvascular network. Hence, they are not suitable for intraoperative one-step procedures. Adipose tissue-derived microvascular fragments (ad-MVF) represent promising vascularization units. They can be easily isolated from fat tissue and exhibit a functional microvessel morphology. Moreover, they rapidly reassemble into new microvascular networks after in vivo implantation. In addition, ad-MVF have been shown to induce lymphangiogenesis. Finally, they are a rich source of mesenchymal stem cells, which may further contribute to their high vascularization potential. In previous studies we have demonstrated the remarkable vascularization capacity of ad-MVF in engineered bone and skin substitutes. In the present study, we report on a standardized protocol for the enzymatic isolation of ad-MVF from murine fat tissue.

We present a protocol to isolate adipose tissue-derived microvascular fragments that represent promising vascularization units. They can be rapidly isolated, do not require in vitro processing and, thus, may be used for one-step prevascularization in different fields of tissue engineering.

בידוד של נגזרות רקמה שומנית Murine כלי דם שבר כיחידות כלי דם של הנדסת רקמות

A functional microvascular network is of pivotal importance for the survival and integration of engineered tissue constructs. For this purpose, several ...

Bioengineering

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration

Dorsal root ganglia (DRG) neurons, located in the intervertebral foramina of the spinal column, can be used to create an in vitro system facilitating the study of nerve regeneration and myelination. The glial cells of the peripheral nervous system, Schwann cells (SC), are key facilitators of these processes; it is therefore crucial that the interactions of these cellular components are studied together. Direct contact between DRG neurons and glial cells provides additional stimuli sensed by specific membrane receptors, further improving the neuronal response. SC release growth factors and proteins in the culture medium, which enhance neuron survival and stimulate neurite sprouting and extension. However, SC require long proliferation time to be used for tissue engineering applications and the sacrifice of an healthy nerve for their sourcing. Adipose-derived stem cells (ASC) differentiated into SC phenotype are a valid alternative to SC for the set-up of a co-culture model with DRG neurons to study nerve regeneration. The present work presents a detailed and reproducible step-by-step protocol to harvest both DRG neurons and ASC from adult rats; to differentiate ASC towards a SC phenotype; and combines the two cell types in a direct co-culture system to investigate the interplay between neurons and SC in the peripheral nervous system. This tool has great potential in the optimization of tissue-engineered constructs for peripheral nerve repair.

Dorsal Root Ganglia Neurons and Differentiated Adipose-derived Stem Cells: An In Vitro Co-culture Model to Study Peripheral Nerve Regeneration

Dorsal root ganglia (DRG) are structures containing the sensory neurons of the peripheral nervous system. When dissociated, they can be co-cultured with SC-like adipose-derived stem cells (ASC), providing a valuable model to study in vitro nerve regeneration and myelination, mimicking the in vivo environment at the injury site.

גב שורש הגרעינים עצב ותאי גזע שמקורם בשומן Differentiated:<em&gt; במבחנה</em&gt; משותף תרבות דגם לחקר התחדשות של עצבים היקפיים

Dorsal root ganglia (DRG) neurons, located in the intervertebral foramina of the spinal column, can be used to create an in vitro system facilitating the ...

Neuroscience

Transplantation of Schwann Cells Inside PVDF-TrFE Conduits to Bridge Transected Rat Spinal Cord Stumps to Promote Axon Regeneration Across the Gap

Among various models for spinal cord injury in rats, the contusion model is the most often used because it is the most common type of human spinal cord injury. The complete transection model, although not as clinically relevant as the contusion model, is the most rigorous method to evaluate axon regeneration. In the contusion model, it is difficult to distinguish regenerated from sprouted or spared axons due to the presence of remaining tissue post injury. In the complete transection model, a bridging method is necessary to fill the gap and create continuity from the rostral to the caudal stumps in order to evaluate the effectiveness of the treatments. A reliable bridging surgery is essential to test outcome measures by reducing the variability due to the surgical method. The protocols described here are used to prepare Schwann cells (SCs) and conduits prior to transplantation, complete transection of the spinal cord at thoracic level 8 (T8), insert the conduit, and transplant SCs into the conduit. This approach also uses in situ gelling of an injectable basement membrane matrix with SC transplantation that allows improved axon growth across the rostral and caudal interfaces with the host tissue.

This article describes a technique to insert a hollow conduit between the spinal cord stumps after complete transection and fill with Schwann cells (SCs) and injectable basement membrane matrix in order to bridge and promote axon regeneration across the gap.

השתלת של שוואן תאים בתוך תעלות PVDF-TrFE לגשר עכברוש Transected גדמי חוט השדרה כדי לקדם התחדשות האקסון על פני הפער

Among various models for spinal cord injury in rats, the contusion model is the most often used because it is the most common type of human spinal cord ...

Mechanical Micronization of Lipoaspirates for Regenerative Therapy

Stromal vascular fraction (SVF) has become a regenerative tool for various diseases; however, legislation strictly regulates the clinical application of cell products using collagenase. Here, we present a protocol to generate an injectable mixture of SVF cells and native extracellular matrix from adipose tissue by a purely mechanical process. Lipoaspirates are put into a centrifuge and spun at 1,200 x g for 3 min. The middle layer is collected and separated into two layers (high-density fat at the bottom and low-density fat on the top). The upper layer is directly emulsified by intersyringe shifting, at a rate of 20 mL/s for 6x to 8x. The emulsified fat is centrifuged at 2,000 x g for 3 min, and the sticky substance under the oil layer is collected and defined as the extracellular matrix (ECM)/SVF-gel. The oil on the top layer is collected. Approximately 5 mL of oil is added to 15 mL of high-density fat and emulsified by intersyringe shifting, at a rate of 20 mL/s for 6x to 8x. The emulsified fat is centrifuged at 2,000 x g for 3 min, and the sticky substance is also ECM/SVF-gel. After the transplantation of the ECM/SVF-gel into nude mice, the graft is harvested and assessed by histologic examination. The result shows that this product has the potential to regenerate into normal adipose tissue. This procedure is a simple, effective mechanical dissociation procedure to condense the SVF cells embedded in their natural supportive ECM for regenerative purposes.

Here, we present a protocol to obtain stromal vascular fraction from adipose tissue through a series of mechanical processes, which include emulsification and multiple centrifugations.

Micronization מכני של Lipoaspirates לטיפול רגנרטיבית

Stromal vascular fraction (SVF) has become a regenerative tool for various diseases; however, legislation strictly regulates the clinical application of ...

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular disease is the development of ischemia. In severe cases, patients can develop critical limb ischemia in which they experience constant pain and an increased risk of limb amputation. Current therapies for peripheral ischemia include bypass surgery or percutaneous interventions such as angioplasty with stenting or atherectomy to restore blood flow. However, these treatments often fail to the continued progression of vascular disease or restenosis or are contraindicated due to the overall poor health of the patient. A promising potential approach to treat peripheral ischemia involves the induction of therapeutic neovascularization to allow the patient to develop collateral vasculature. This newly formed network alleviates peripheral ischemia by restoring perfusion to the affected area. The most frequently employed preclinical model for peripheral ischemia utilizes the creation of hind limb ischemia in healthy rabbits through femoral artery ligation. In the past, however, there has been a strong disconnect between the success of preclinical studies and the failure of clinical trials regarding treatments for peripheral ischemia. Healthy animals typically have robust vascular regeneration in response to surgically induced ischemia, in contrast to the reduced vascularity and regeneration in patients with chronic peripheral ischemia. Here, we describe an optimized animal model for peripheral ischemia in rabbits that includes hyperlipidemia and diabetes. This model has reduced collateral formation and blood pressure recovery in comparison to a model with a higher cholesterol diet. Thus, the model may provide better correlation with human patients with compromised angiogenesis from the common co-morbidities that accompany peripheral vascular disease.

We describe a surgical procedure used to induce peripheral ischemia in rabbits with hyperlipidemia and diabetes. This surgery acts as a preclinical model for conditions experienced in peripheral artery disease in patients. Angiography is also described as a means to measure the extent of introduced ischemia and recovery of perfusion.

המודל הקליני של איסכמיה הגפיים האחוריות בארנבים סוכרתית

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

<meta charset="utf8"></head><body>מקטע כלי דם מכני סטרומה בפיברין הידרוג'ל לרפואה רגנרטיבית

The Combination of Mechanically Isolated Stromal Vascular Fraction and Fibrin Hydrogel: A Processing Protocol

The regenerative potential of adipose-derived stromal cells (ASCs) has gained significant attention in regenerative and translational research. In the past, the extraction of these cells from adipose tissue required a multistep enzyme-based process, resulting in a heterogenous cell mix consisting of ACSs and other cells, which are jointly termed the stromal vascular fraction (SVF). More recently introduced mechanical SVF (mSVF) isolation protocols are less time-consuming and bypass regulatory concerns. We recently proposed a protocol that generates mSVF rich in stromal cells based on a combination of emulsification and centrifugation. One current issue in mSVF application for wound therapy application is the lack of a scaffold providing protection from mechanical manipulation and desiccation. Fibrin hydrogels have been shown to be a useful adjunct in cell transfer for wound healing purposes in the past. In the work herein, we delineate the preparation steps of an mSVF-fibrin hydrogel construct as a novel approach for translational research and clinical application.

<meta charset="utf8"></head><body>מחבר זרקור: חקר הפוטנציאל של מקטע כלי דם סטרומה שמקורו בשומן לריפוי פצעים

Mechanically isolated stromal vascular fraction (SVF) in combination with a fibrin hydrogel offers an easy and efficient carrier for viable adipose-derived stromal cells for various indications, including tissue engineering and or wound healing purposes. Here, we present the preparation of a mechanical SVF (mSVF)-fibrin hydrogel construct for translational research and clinical application.

השילוב של מקטע כלי דם סטרומה מבודד מכנית והידרוג'ל פיברין: פרוטוקול עיבוד

The regenerative potential of adipose-derived stromal cells (ASCs) has gained significant attention in regenerative and translational research. In the ...

סטרומה כלי דם מועשר שבר השמן הרכבה לטיפול סימפטומטי סוף-neuromata

Summary

Explore More Videos

Chapters in this video

רומן חדש פאט שומן טכניקת השתלת לדמיין את כלי השיט הדור של כלי הדם בתאי גזע אנדותל

הערכה של יכולת הקיום של הזרקת שומן האנושי בעכברי עירום עם מיקרו-טומוגרפיה ממוחשבת

מודל קסנוגרפט נגזר ממטופל למום ורדי

בידוד של נגזרות רקמה שומנית Murine כלי דם שבר כיחידות כלי דם של הנדסת רקמות

גב שורש הגרעינים עצב ותאי גזע שמקורם בשומן Differentiated:

השתלת של שוואן תאים בתוך תעלות PVDF-TrFE לגשר עכברוש Transected גדמי חוט השדרה כדי לקדם התחדשות האקסון על פני הפער

Micronization מכני של Lipoaspirates לטיפול רגנרטיבית

המודל הקליני של איסכמיה הגפיים האחוריות בארנבים סוכרתית

השילוב של מקטע כלי דם סטרומה מבודד מכנית והידרוג'ל פיברין: פרוטוקול עיבוד

השילוב של מקטע כלי דם סטרומה מבודד מכנית והידרוג'ל פיברין: פרוטוקול עיבוד