שיטה זו יכולה לשמש כדי לענות על שאלות מפתח על התפקיד של מיקרו-סביבה מח העצם ואת ההישרדות של גידולים מיאלומה חריטה. היתרון העיקרי של הליך זה הוא שניתן ליישם אותו על מחקרים אנטי-תרופתיים אורך ושמש כדי לסמן מסלולים ביוכימיים מרובים באופן לא פולשני. ביום הניסוי לשטוף לראשונה את 8226 תאים transfacted לוציפראז שלוש פעמים ב PBS קר כקרח ב 200 RCF במשך חמש דקות צנטריפוגה ו resuspend את גלולה בקרח טרי קר PBS בחמש פעמים עשרה לתאים השישי לכל 200 microliters של קרח קר PBS לכל עכבר.
הבא לאשר חוסר תגובה קמצוץ בוהן בעכבר NOG הרדמה בן ארבעה עד שישה שבועות ולהחיל משחה עיניים על העיניים של החיה. לטעון את התאים לתוך מזרק אינסולין מיליליטר אחד מצויד מחט 26 מד. להזריק את כל נפח התאים לתוך וריד הזנב של החיה, לפני החזרת העכבר לכלוב שלו, ניטור עד התאוששות מלאה.
עשרה עד עשרים יום לאחר האתגר, להזריק כל חיה חרוטה עם 200 microliters של מצע D-luciferin כיתה ויוו ב תמיסת מלח סטרילית תוך-אפית. מניחים את בעלי החיים הרדמה במצב סופין במערכת הדמיה של בעלי חיים קטנים בתוך 5 עד 10 דקות של הזריקה. למדוד את הזוהר הממוצע באזורים נבחרים של עניין בתוך תוכנת ההדמיה המתאימה.
לטיפול ממוקד של 8226 גידולים Luciferase, לאחר מדידת הביולומינציה הבסיסית בכל בעל חיים כפי שהוכח רק, אקראי את בעלי החיים לקבוצות טיפול ולטפל בכל עכבר עם סדרה של 200 הזרקת IP מיקרוליטר של Temsirolimus או שליטה מלוחה. למדוד את פעילות לוציפראז פעמיים בשבוע ולתכנן את השינויים בבילומינציה לאורך זמן. כדי למדוד שינויים בחילוף החומרים של הגידול, תחילה להסיר את המזון מכלוב הבית של העכברים במשך 24 שעות, כדי למנוע ספיגת radiolabeled רדיואקטיבי עודף Fludeoxyglucose.
למחרת לדלל 500 כדי 100 microcuries של 18 פלואור radiolabeled Fludeoxyglucose בדיקה מלוחים סטריליים לנפח סופי של 100 microliters לכל עכבר ולהקליט את הזמן והפעילות של הבדיקות עם כיול מנה. כאשר הבדיקות מוכנות למקם את החיה הראשונה הרדמה על כרית חימום עם הראש פונה משם ולהשתמש מזרק אינסולין אחד מיליליטר מוגן מצויד מחט 26 מד להזריק 100 microliters של החללית לתוך וריד הזנב. למדוד את רדיואקטיביות שיורית המחט ואת המזרק עם כיול המינון ולציין את הפעילות ואת הזמן.
לאחר מכן למדוד את פעילות Fludeoxyglucose radiolabeled באזורים נבחרים של עניין התואמים את הגידולים חריטה במערכת הדמיה PET CT בעלי חיים קטנים. חריטה מוצלחת של גידול במח העצם יכולה להיות מאושרת על ידי הדמיית ביולומינציה כפי שהוכח. הדמיה סדרתית של בעלי חיים מרובים יכולה לשמש כדי לדמיין את ההפצה של מח העצם חריטה גידולים מיאלומה נפוצה.
בנוסף ניתוח רנטגן הדמיה אופטי מראה קביעה מהירה ולא פולשנית של המיקום המדויק והפצה של גידולי מיאלומה מרובים בתוך שלד העכבר. הביולומינציה המיוצרת על ידי תאים סרטניים חריטים אלה יכולה להימדד באופן סדרתי ולא פולשני כדי להעריך שינויים בצמיחת הגידול. יתר על כן, ההישרדות של עכברים שטופלו מעכבי mTOR Temsirolimus ניתן לפקח פליטת פוזיטרונים וניתוח טומוגרפיה ממוחשבת עבור ספיגת Fludeoxyglucose radiolabeled הגידול יכול לשמש כדי להדגים Temsirolimus מתווך שינויים בחילוף החומרים של גלוקוז.
בעת ביצוע הליך זה חשוב להזריק את התאים IEV. מצאנו כי כישלון להזריק את התאים לתוך הווריד תוצאות היווצרות של תאים סרטניים שאינם מח עצם חריטה ליד אתר ההזרקה. בעקבות הליך זה, ניתן להשתמש בשיטות אחרות כמו אימונוהיסטוכימיה ומיקרו-CT כדי לענות על שאלות לגבי השפעת הגידולים על ארכיטקטורת העצם ועל הרכיבים התאיים והמולקולריים שאינם גידולים של סביבת מח העצם.
