ניקור ורידים תת-סלאבי כשיטה חלופית לאיסוף דגימות דם בחולדות. לאחר הרדמה כללית, מניחים חולדות בתמונת סופין ומעקרים את המרחב התת-רקלבי עם 75% אתנול. זהה אופוסה חמורה מעולה לפני הנקב.
אתר את אתר הניקוב, caudal לאזור החיצוני שליש של עצם הבריח באותו צד. כיוון המחט היה ממוקם לכיוון פוסה החזה מעולה צריך כמעט במקביל עצם הבריח, רק האחורי אליו. לאחר איסוף הדם, לחץ על אתר הדקירה למשך שעה עד שתי דקות, כדי להפסיק את הדימום.
איסוף דם עם נפח מספיק נדרש תמיד בניסויים בבעלי חיים. איסוף דם מוריד הזנב של חולדות הוא פופולרי ופחות מלחיץ מכמה שיטות אגרסיביות כגון אוסף מדגם מקלעת מסלולית רטרו. עם זאת, שיטה זו מוגבלת על ידי שיעור ההצלחה.
כאן, אנו מציגים את השיטה שלנו לאיסוף דם עם נפח הדם הרצוי מן הווריד התת-חלבי. התוצאות שלנו מראות כי שיטה זו היא בטוחה ומעשית, והוא עשוי להיחשב במקרה דגימת דם מוריד הזנב נכשל. כדי להתחיל, להכין סרט דבק, סוכן epilating, 75%אתנול, צינור איסוף דם, שתי נקודות חמש מזרק מיליליטר, מכונת גילוח שיער, קנה מידה אלקטרוני, הפרין, ותמיסת מלח פיזיולוגית.
חולדות בית בתנאים סטנדרטיים, עם גישה חופשית למזון ומי שתייה, נשמרו בכלובים של 530 ס"מ רבועים עם מצעי גילוח עץ. לגרום הרדמה כללית בכל בעלי החיים באמצעות הזרקה תוך-חיים לפני הנקב. מניחים את החולדה בתנוחה על-חושית, מתקנים את הגפיים האחוריות בתנוחה נוחה, ומתקן את הגפיים העליונות במקביל לגוף, ממש ליד תא המטען.
נקה את שני צידי החלל infraclavicular כדי להסיר את הפרווה וכל לכלוך גלוי. מנגבים את הצוואר ואת עור בית החזה עם 75% אתנול, ולשמור על האזור נקי ויבש עם גזה. שני הצדדים של וריד subclavian מתאימים לנקב, וכאן, אנו בוחרים את הצד הנכון לנקב.
זהה את המיקום ואת הכיוון של עצם הבריח הימנית עם האגודל השמאלי של המפעיל, ואתר את פוסה עצם החזה מעולה בעדינות עם האצבע המורה. יש לשטוף את המזרק שלנו בתת פתרון הפרין של 10 יחידות למיליליטר. אתר את אתר הדקירה, הצבע חמישה מילימטרים caudal לאזור החיצוני שליש של עצם הבריח הימנית.
מעבירים את המזרק בעדינות לתוך העור של אתר הדקירה. לאחר המחט נכנס לעור infraclavicular, להחיל לחץ פעיל דרך יד ימין של המפעיל. כיוון המחט ממוקם לכיוון פוסה החזה מעולה, וצריך כמעט במקביל עצם הבריח, רק האחורי אליו.
בדרך כלל, וריד subclavian ניתן להגיע על ידי החדרת המחט במשך כשני מילימטרים בכיוון זה. ברגע המחט נכנסת לווריד, הדם ייכנס למזרק תחת לחץ פעיל. אז לחץ פעיל חייב להישמר עד נפח נכון של דם נמשך.
לאחר איסוף הדם, להסיר את מחט לנקב, ולחץ על אתר לנקב במשך 1 עד 2 דקות כדי לעצור את הדימום. שימו לב: הלחץ חייב להיות עדין מאוד כדי למנוע חנק. להעביר את דגימת הדם לתוך שפופרת ואקום נגד קרישה עם EDTA וצנטריפוגה ב 1600G במשך 10 דקות כדי לאסוף פלזמה.
שאף את העל-טבעי לנקות מחדש את הצינור ולאחסן במינוס 18 מעלות צלזיוס. כדי להשוות את שיעור ההצלחה בין המפעילים המיומנים למתחילים, 20 חולדות SD חולקו לשתי קבוצות באופן אקראי. התוצאות מראות כי באמצעות וריד subclavian הנכון, תשע חולדות בקבוצה מיומנת שמונה חולדות בקבוצה למתחילים הצליחו, בהתאמה.
ואז איסוף הדם משלושת החולדות הנותרות הצליח דרך הצד השמאלי. שיעור ההצלחה לא היה הבדל משמעותי בין שתי הקבוצות הללו. מסלול הזמן היה שונה במקצת בשתי הקבוצות הללו.
לא התרחשו סיבוכים חמורים, כגון pneumothorax, hemopneumothorax ודימום במהלך הניתוח או אחריו. כל החיות שרדו אחרי דגימת הדם. כדי להדגים את הקשיים של לימוד הליך הניקוב, השווינו עוד יותר את מספר המשיכות בין הקבוצות המיומנים למתחילים.
כפי שמוצג בטבלה 2, מספר המשיכות הממוצע בקבוצה מיומנת נמוך במקצת מהמתחילים, אך אין מובהקות סטטיסטית. לסיכום, התוצאות שלנו מראות כי אסטרטגיית ניקור ורידים subclavian לאיסוף דם הוא בטוח וישים בחולדות. שיטה זו היא בעלת ערך, במיוחד במקרים שבהם יש צורך בכמות גדולה של דם.
שיטה זו עשויה להיות חלופה אופטימלית אם דגימת הדם הקונבנציונלית נכשלת.
