מטרת השיטה היא להעריך את ההשלכות התפקודיות של השתלת רקמת לב מהונדסת במודל קריו-ינfarction של בעלי חיים קטנים. היתרון של שיטה זו הוא שהיא מאפשרת אינדוקציה של אוטם שריר הלב לשחזור יחסית עם גדלי אוטם יציבים. לאחר אישור חוסר תגובה לצביטת בוהן, מניחים את שפן הניסיונות הרדמה על פלטפורמת התחממות של 40 עד 42 מעלות צלזיוס בתצב סופין.
החל משחת עיניים לגלח ולרוקן את בית החזה. החל 25 מעלות צלזיוס אולטרסאונד ג'ל מתמר על העור החשוף ולמקם את המתמר ממערכת echocardiography על בית החזה לרכוש תצוגות ציר ארוך parasternal דו מימדי במצב B מן הצוואר הימני לכיוון הרגל השמאלית במישור של שסתום אבי העורקים עם הדמיה בו זמנית של ההדמיה של ההדמיה בחדר השמאלי כדי לחקור את תפקוד החדר השמאלי לפני הניתוח. לאחר מכן להפוך את מתמר 90 מעלות כדי לקבל תצוגת מצב B ציר קצר ברמה papillary באמצע.
לאחר התמונה האחרונה הושגה, להעביר את שפן הניסיונות לשולחן הניתוחי קלטת הגפיים בתקרת נשר להתפשט. לחטא את העור החשוף עם שני רציף מבוססי יוד ו 80% קרצוף אתנול ולעשות חתך אנכי 1.5 ס"מ באזור קנה הדרך. לנתח בבוטות את השרירים המכסים את קנה הנשימה.
כאשר ניתן לראות את קנה הנשימה, לנקב את צינור האוויר עם 18 מד IV cannula ולהכניס את החלק הגמיש של הצינור כצינור קנה הנשימה. חבר את צינור קנה הנשימה למכונת הנשמה של בעלי חיים לאוורור מתמשך במהלך ההליך וספירת חללי הצלעות החל מהחלל הבין-קומתי הראשון כדי לאתר את החלל הבין-קומתי החמישי. בצע חתך אופקי של שני סנטימטרים על החלל הבין-צלטלי החמישי בצד שמאל של שפן הניסיונות והסר את הרקמות התת עוריות לפני ניתוח השרירים באמצעות אלקטרוקוטריה עד שהשרירים הבין-צלמיים מגיעים.
לנתח בעדינות את השרירים הבין-קוטביים עם פינצטה ומספריים קטנים עד שהמרחב הפלורלי מגיע ונוצות הריאה השמאלית ניתן לדמיין. הכנס מפשק בין הצלעות ולפתוח את המפשק בזהירות עד נוף טוב של הלב מתקבל. פתח את pericardium כ סנטימטר אחד באזור הקיר החדר השמאלי קדמי ולהמקם דחיסה על הריאה השמאלית כדי להגן על הריאה מפני נזק כאשר גרימת cryoinjury של החדר השמאלי.
לאחר מכן, לקרר את קצה חותמת מתכת נשחקת עם קוטר חתך של 0.5 ס"מ בחנקן נוזלי במשך שלוש דקות לפני לחיצה על החללית על הקיר השמאלי של הלב במשך 30 שניות. לאחר מכן מניחים ברזל הלחמה חשמלי 200 מעלות צלזיוס בתוך החותמת כדי לחמם את החותמת, כך המתכת ניתן להסיר מן הרקמה. לאחר יישום הבול השלישי, להסיר את המפשק מהחלל הבין-קוסטלי ומהדק את צינור הזרימה של מכונת ההנשמה במשך שתי שניות כדי לנפח את הריאות עם לחץ מקסימלי כדי למנוע אטלקזיס של הריאה.
לאחר מכן לסגור את הצלעות עם שני תפרים 4-0, השרירים מעל הצלעות עם תפר פועל 5-0 ואת העור עם 5-0 תפר יחיד. לאחר הסרת צינור קנה הנשימה, השתמש יחיד 8-0 תפר כדי לסגור את אתר הדקירה בקנה הנשימה ולסגור את הפצע עם שלושה תפר יחיד 5-0 תפרים. שבעה ימים לאחר cryoinjury, להסיר תפרים ולעשות חתך עור אופקי שני ס"מ באזור הצלקת של הצד הצדדי השמאלי ולהשתמש אלקטרוקוטריה לנתח בעדינות את הידבקויות pleural נוסף.
בזהירות לפתוח את החלל pleural עם מספריים ולהכניס מפזר צלעות כדי לחשוף את הלב. חזותית לזהות את האזור של אוטם על ידי צבע חיוור שלה לעומת שריר הלב שמסביב בריא למקם תיקון רקמת לב מהונדסת מעל אזור אוטם. אבטח את התיקון עם שני 8-0 תפרים משני הצדדים באזור הלא אוטם של הלב לנפח את הריאות עם לחץ כדי למנוע אטקטריזה של הריאות.
לאחר מכן הסר את המפשק מהחלל הבין-שלטלי וסגור את החיה כפי שהוכח. ארבעה שבועות לאחר השתלת רקמת לב מהונדסת, לבצע אקו-קרדיוגרפיה transthoracic כפי שהוכח כדי להעריך שינויים בתפקוד החדר השמאלי שעות נוספות. מייסון trichrome מכתים ארבעה שבועות לאחר cryoinjury מגלה צלקות טרנסמורלי גדול מעל 25% של שריר הלב בחדר השמאלי בממוצע.
כתמי דיסטרופין מדגימים שתלים גדולים בשריר הלב אשר שריריים חלקית את הצלקת ואת הכתמים עבור Ku80 האנושי המאשר את המקור האנושי של שריר הלב שזה עתה נוצר. ניטור אקו-קרדיוגרפיה טרנסתורצ'יקית של רקמת הלב המהונדסת המושתלת חושף שיפור בשבר הפליטה השמאלית בחדר, קיצור שטח חלקי וירידה בקוטר החדר השמאלי והדיאסטאלי. זה חיוני כדי לפתוח בזהירות את חלל pleural בסוג זה של פעולה לעשות מחדש כמו הידבקויות בין קיר בית החזה החדר השמאלי יכול להיות נוכח ויש סיכון מסוים כדי לפגוע בשריר הלב בחדר השמאלי.
לאחר ההשתלה של רקמת הלב המהונדסת האנושית, ניתן להשתמש במספר שיטות כדי לפקח על שינויים בשבר הפליטה בחדר השמאלי. מלבד אקו לב, מדידה פולשנית של לולאות עוצמת לחץ יכולה לשמש כדי לפקח על שינויים אלה. שיטה זו מאפשרת לחקור את כל ההיבטים של השתלת רקמות מהונדסות אנושיות.
השלכות תפקודיות, כמו גם סיכונים פוטנציאליים כמו הפרעות קצב ניתן להעריך במודל זה בעלי חיים קטנים.
