מתודולוגיה זו יכולה לשמש כדי לשכפל גידולים בשלפוחית השתן באמצעות המסרבן BBN כדי דימוי הגודל וההרחבה של נטל הגידול בשלפוחית השתן באמצעות MRI. טכניקה זו משתמשת בגישה של הדמיה מהירה עצמאית של מפעיל עם זמני רכישה קצרים באיכות אבחון גבוהה כדי לבצע בדיקות תפוקה גבוהה של עכברים בשלבי ביניים של התפתחות הגידול. כדי לגרום להיווצרות גידול סרטן שלפוחית השתן, להוסיף 0.05%BBN למיכל מי שתייה אטום ולספק את המים 6 שבועות שחור C57 שישה עכברים עד ליביום.
לאחר מכן לפקח על בעלי החיים פעמיים בשבוע עבור סימן של מצוקה הקשורים גידולים בשלפוחית השתן בהתאם להנחיות IACUC המקומי. 16 עד 24 שבועות לאחר החשיפה, לטעון מזרק מיליליטר אחד מצויד מחט 25 כדי 27 מד עם 100 כדי 200 microliters של מלוחים סטריליים ולהזריק את מלוחים תת עורית לתוך בעל חיים שטופלו BBN. לאחר 10 דקות, להעביר את העכבר לתוך מחזיק ההדמיה של דימוי תהודה מגנטית ולהכניס בדיקה טמפרטורה רקטלי מחובר למחשב הקלטה פיזיולוגית כדי לפקח על טמפרטורת הגוף של החיה.
לאחר מכן, מניחים סליל מקלט מרובע 4 ערוצים מעל הבטן התחתונה של העכבר וליזום התאמות אוטומטיות בתוכנת ההדמיה המשולבת כדי לרכוש קבוצה טריאקסיאלית של תמונות של גוף העכבר כולו. מערכת התייחסות זו של תמונות, לזהות את האזור של עניין לרכוש שלושה סטים של תמונות חתוכים אורתוגונל לאורך המישורים הסרסיאליים, קורונל, sagittal. באמצעות ההדמיה המהירה האמיתית עם רצף דימות התקדמות במצב קבוע, הגדר את ה- TR ל- 900 אלפיות שניה, את ה- TE לשתי אלפיות שניה ואת ה- FA ל- 70, 14 ממוצעים.
לאחר מכן בחר את הפרמטרים הגיאומטריים המתאימים בתוכנת פלטפורמת ההדמיה כדי לקבל סדרה של פרוסות על פני כל שלפוחית השתן בעובי של 0.5 מיליליטר ורזולוציה בתוך המטוס של 0.148 מילימטרים. כאשר כל התמונות הושגו, לייצא את קבוצה של פרוסות המכסה את שלפוחית השתן כולה כדי תוכנה לניתוח תמונה רפואית מתאימה לגלול דרך התמונות שנוצרו כדי לאתר פרוסה במרכז שלפוחית השתן המאפשרת הדמיה של קיר שלפוחית השתן ולומן לבחור את התצוגה האקסיאלית המייצגת במרכז שלפוחית השתן לניתוח כמותי. לאחר מכן עקבו אחר הגבולות סביב הקצה החיצוני והלומן הפנימי של שלפוחית השתן כדי לתייג בזהירות את אזור העניין בתוך התצוגה האקסיאלית הייצוגית שנבחרה ולהחסיר את הלומן הפנימי מהקצה החיצוני כדי לחשב את שטח הפנים של קיר שלפוחית השתן.
20 שבועות לאחר החשיפה BBN, לנקות את האזור של חתך עם 70% אתנול ולהשתמש מדפים כדי להרים את עור דופן הבטן. בצע חתך קו האמצע מן הסימפיזיס הערווה לתהליך xiphoid ולתפוס את peritoneum כדי לאפשר חתך חד של חלל הלידה. זהה את שלפוחית השתן בבטן התחתונה של קו האמצע, תוך שימוש במדפים כדי לתפוס את כיפת שלפוחית השתן.
לנתח את שלפוחית השתן מן המבנים שמסביב כולל שלפוחיות שלפוחית, פי הטבעת, ושומן. חותכים את הרצועה הטבורית החציונית המחברת את כיפת שלפוחית השתן לקיר הטבור והבטן. חותכים את השופכים קרוב לשלפוחית השתן ומרימים את צפלאד שלפוחית השתן, חותכים את השופכה כדי להסיר את שלפוחית השתן.
לאחר מכן לשטוף את שלפוחית השתן excised עם PBS ומיד לשקול את הרקמה על איזון. כאן, הדמיה מהירה אמיתית מייצגת עם תמונות תהודה מגנטית של התקדמות מצב יציב של שחזורים תלת-ממדיים של קיר שלפוחית השתן ותמונות פתולוגיות של עכבר עם גידול גדול ועכבר בקרה ללא גידול מוצגות. עובי קיר שלפוחית השתן כפי שנגזר מהדמיית התהודה המגנטית מתואם מדי שבוע עם מדידות משקל שלפוחית השתן שהושגו לשעבר.
בדיקה של עובי קיר שלפוחית השתן הנגזרת MRI ונתונים לשעבר vivo קיבל משקל שלפוחית השתן גם להדגים קשר עם שלב הגידול, כמו גם קשר כאשר ריבוד הפתולוגיה על ידי סרטן שלפוחית השתן פולשנית שאינם שרירים וסרטן שלפוחית השתן פולשנית שריר. זכור כי עדיף לרכוש את התמונות בעכברים כאשר יש להם שלפוחית מלאה. בעקבות הדמיית MR של גידולים בשלפוחית השתן, ניתן לפצל עכברים לקוהורטות עם מאפייני גידול דומים, בהתאם לצורך.
טכניקה זו מאפשרת לחוקרים לחקור immunotherapies חדשים וטיפולים אחרים כדי לשפר את התוצאות עבור המטופלים שלנו. חשוב לזכור כי BBN הוא מסרטן, כי אמצעי הזהירות המתאים תמיד יש לנקוט בעת טיפול במתחם זה.
