מחקר זה מדווח על דגימת דם מווריד הזנב בעכברים באמצעות מערכת צינור שאיבת ואקום עם משקפיים מגדלת. השיטה שלנו קלה לתרגול ויתשמש לדגימת דם חוזרת בעכברים. עכבר ממוקם לתוך מחזיק מרסן פלסטיק בהתחלה.
הזנב מנוקה ונמחק עם 70% אתנול. לאחר מכן המפעיל לובש את זכוכית מגדלת המשקפיים כדי לשפר את הצפייה של זנב העכבר. קצה מחט פרפר מוכנס לאחר מכן לתוך אחד מורידי הזנב האודם, והדם נאסף לתוך צינור איסוף הוואקום דרך קצה הגומי של מחט הפרפר.
לבסוף המחט מוסרת ותהליך איסוף הדם הסתיים. וריד זנב הוא מיקום מועדף לדגימת דם. שיטת דגימת דם זו קשורה לפגיעה מינימלית בעכברים, אולם וריד הזנב של העכברים דק מאוד כך שלפעמים קשה לנקב, כאן אנו מתארים שיטת דגימת דם פשוטה של וריד הזנב בעכברי בדיקת מעבדה באמצעות מערכת צינור שאיבת ואקום.
שיטה זו היא פשוטה ויעילה ו ניתן להשתמש בה כדי להשיג דם נדרש שוב ושוב בעכברים. ההליך יוכח על ידי שני חברים במעבדה שלנו, שיאויאן ליו ו-Wusong Zou כדי להתחיל, אנו מניחים מחזיק ריסון פלסטיק, שפופרות ואקום עם פקק גומי, ומחט מחודדת כפולה, ומגדל משקפיים על משטח סטרילי. לאחר מכן, מניחים עכבר לתוך מחזיק מרסן פלסטיק.
כפות הרגליים הקדמיות והבדיעבדות של העכבר צריכות להיות במצב נוח. כדי להשיג דגימת דם, לשטוף את הזנב עם מים חמים 20 עד 30 מעלות צלזיוס, לנגב את הזנב עם 70% אתנול כדורי כותנה רוויים כדי להרחיב את וריד. בחר את וריד הזנב הימני או השמאלי לדגימת דם.
לתפוס חלק נמוך יותר של הזנב בעדינות ולשמור על הזנב ישר במהלך איסוף דגימת דם. ללבוש את המשקפיים זכוכית מגדלת כדי לשפר את הצפייה כדי להקל על לנקב את וריד הזנב. הכנס את קצה מחט הפרפר 22 מד לתוך אחד ורידים זנב מצדדים סביב חצי דיסטלי מקץ הזנב בזווית של כ 10 מעלות, נע לכיוון הבסיס של הזנב עבור דגימות מרובות.
לאסוף דם לתוך צינור איסוף ואקום על ידי החדרת קצה הגומי של מחט הפרפר לתוך צינור איסוף הדם ואקום. הזנב של עכברים יכול לשמש עבור אוספי דם מספר, לעתים קרובות ככל הנדרש, על פי הפרוטוקול שאושר. זה לא תמיד קל להשיג מספיק נפח הדם מן וריד זנב זרימת הדם הדק והנמוך של עכברים עם השיטה המסורתית.
השיטה שלנו היא פשוטה ויעילה ו ניתן להשתמש בה כדי להשיג נפח דם הולם שוב ושוב בעכברים. הוא דיווח כי עד 10% מנפח הדם הכולל ניתן להסיר בבטחה מבעל חיים בריא במרווחי זמן של שבועיים, ולכן כ 175 דגימת דם microliters של עכברים נאסף בכל פעם בהתאם למנהלי האתיקה. שתיים, חיוני להאריך את הזנב כדי למנוע את תנועתו בתהליך של דגימת דם.
על מנת למנוע קרישת דם במחט, יש לבחור תנוחת דקירה אחרת אם הדם מפסיק לזרום החוצה במשך 15 שניות. איסוף דם מוצלח הוגדר כהשגת 175 מיקרוליטרים דם בכל פעם. זמני הדקירה המקסימליים נקבעו לשלושה מבחנים.
אם נפח הדם הכולל היה נמוך יותר מ-175 מיקרוליטרים לאחר הדקירה השלישית, הוא הוגדר כאוסף דם כושל. כאשר נפח מדגם נאות נאסף, למשוך את המחט מן הוריד בקצרה להפעיל לחץ על אתר הכניסה כדי לעצור את הדימום. כדי לאסוף פלזמה, להשתמש צינורות המכילים EDTA, נוגד קרישה, בעדינות להפוך את הצינור מספר פעמים כדי לערבב נוגד קרישה עם הדם ולמקום את הדגימות על קרח אנכית.
לסובב צינורות איסוף דגימת דם שלמים בצנטריפוגה בקירור במשך 10 דקות. לחלץ את הפלזמה, דואג לא להפריע שכבות תאי הדם האדומים והלבנים. כדי לאסוף סרין, השתמש צינורות ללא נוגד קרישה.
ניתן להשתמש בשני סוגי הדגימות באופן מיידי או לאחסן אותן בפחות מ-80 מעלות צלזיוס למשך שנה. מחקר זה נועד לחקור את העליונות של איסוף דגימת דם חוזרת ונשנית מווריד הזנב של עכברים באמצעות מערכת איסוף דם ואקום משקפיים מגדלת. קבוצת ניסוי בהשוואה לשיטת דגימת הדם הקונבנציונלית.
קבוצה קונבנציונלית, על ידי מתחילים ומומחים בהתאמה, נפח הדם שנאסף ומשך הדגימה היו דומים בין שתי קבוצות עבור מומחים, עם זאת, נפח דם שנאסף מוגבר ומשך דגימה קצר יותר נראו בקבוצת הניסוי לעומת הקבוצה הקונבנציונלית למתחילים. שיעור הצלחה גבוה יותר נראה גם בקבוצת הניסוי בהשוואה לקבוצה הקונבנציונלית למתחילים. שיטת דגימת דם זו קלה לשליטה ויש לה שיעור הצלחה גבוה.
ניתן להפחית את מספר הדקירה שנכשלה בהשוואה לזה של שימוש בשיטה מסורתית. יתר על כן הליך זה רק גורם לפגיעה מינימלית בעכברים, זה רק סרט הזנב של העכברים ללא צורך בהרדמה, כי ההשפעה של תגובת מתח בהרדמה על דגימת הדם ניתן להימנע.
