هذه الدراسة تقارير أخذ عينات الدم من الوريد الذيل في الفئران باستخدام نظام أنبوب استخراج فراغ مع المكبر النظارات. طريقتنا سهلة لممارسة ويمكن استخدامها لتكرار أخذ عينات الدم في الفئران. يتم وضع فأر في حامل تقييد البلاستيك في البداية.
يتم تنظيف الذيل ومسحها مع 70٪ الإيثانول. ثم يرتدي المشغل المكبر النظارات لتحسين عرض ذيل الماوس. ثم يتم إدخال طرف إبرة الفراشة في أحد الأوردة التيل الجانبي المتوسعة ، ويتم جمع الدم في أنبوب جمع الفراغ من خلال الطرف المطاطي من إبرة الفراشة.
وأخيرا يتم إزالة الإبرة ويتم الانتهاء من عملية جمع الدم. الوريد الذيل هو المكان المفضل لأخذ عينات الدم. ترتبط طريقة أخذ عينات الدم هذه بالحد الأدنى من الإصابات التي لحقت بالفئران ، ولكن الوريد الذيل للفئران رقيق جدًا بحيث يصعب ثقبه أحيانًا ، وهنا نصف طريقة بسيطة لأخذ عينات من الدم الوريدي في اختبار الفئران المختبرية باستخدام نظام أنبوب استخراج الفراغ.
هذه الطريقة بسيطة وفعالة ويمكن استخدامها للحصول على الدم المطلوب بشكل متكرر في الفئران. وسيتم إثبات هذا الإجراء من قبل اثنين من أعضاء المختبر لدينا، شياويان ليو ووسونغ زو لبدء، ونحن نضع حامل تقييد البلاستيك، أنابيب فراغ مع سدادة مطاطية، وإبرة مدببة مزدوجة، والنظارات المكبر على سطح معقمة. بعد ذلك، ضع فأرًا في حامل تقييد البلاستيك.
يجب أن تكون الكفوف الأمامية والند للماوس في وضع مريح. للحصول على عينة الدم، وغسل الذيل بالماء الدافئ 20 إلى 30 درجة مئوية، ومسح الذيل مع 70٪ من كرات القطن المشبعة الإيثانول لتوسيع الوريد. حدد الوريد الذيل الأيمن أو الأيسر لأخذ عينات الدم.
استيعاب الجزء السفلي من الذيل بلطف والحفاظ على الذيل مباشرة أثناء جمع عينة الدم. ارتداء المكبر النظارات لتحسين عرض لتسهيل ثقب الوريد الذيل. أدخل طرف إبرة الفراشة قياس 22 في واحدة من الأوردة التيل الجانبي حوالي نصف من طرف الذيل في زاوية من 10 درجة تقريبا، والانتقال نحو قاعدة الذيل لعينات متعددة.
جمع الدم في أنبوب جمع فراغ عن طريق إدراج نهاية المطاط من إبرة فراشة في أنبوب جمع الدم فراغ. يمكن استخدام ذيل الفئران لعدة مجموعات دم ، كلما لزم الأمر ، وفقًا للبروتوكول المعتمد. ليس من السهل دائما الحصول على كمية كافية من الدم من الوريد الذيل تدفق الدم رقيقة ومنخفضة من الفئران مع الطريقة التقليدية.
طريقتنا بسيطة وفعالة ويمكن استخدامها للحصول على كمية كافية من الدم مرارا وتكرارا في الفئران. وتفيد التقارير أن ما يصل إلى 10٪ من إجمالي حجم الدم يمكن إزالتها بأمان من سليم على فترات أسبوعين، لذلك تم جمع حوالي 175 ميكرولتررز عينة دم من الفئران في كل مرة وفقا لأخلاقيات المبادئ. اثنين ، من الضروري تمديد الذيل لتجنب حركته في عملية أخذ عينات الدم.
من أجل تجنب تخثر الدم في الإبرة، ينبغي اختيار موقف ثقب آخر إذا توقف الدم يتدفق على مدى 15 ثانية. تم تعريف جمع الدم الناجح بأنه الحصول على 175 ميكرولترات الدم في كل مرة. تم تعيين أوقات ثقب القصوى إلى ثلاث تجارب.
إذا كان إجمالي حجم الدم أقل من 175 ميكرولترات بعد الثقب الثالث ، فقد تم تعريفه بأنه فشل في جمع الدم. عندما يتم جمع كمية كافية من العينة، اسحب الإبرة من الوريد والضغط لفترة وجيزة على موقع الإدراج لوقف النزيف. لجمع البلازما، استخدم الأنابيب التي تحتوي على EDTA، وهو مضاد للتخثر، عكس الأنبوب بلطف عدة مرات لخلط مضادات التخثر مع الدم ووضع العينات على الجليد عموديا.
تدور أنابيب جمع عينة الدم كله في أجهزة الطرد المركزي المبردة لمدة 10 دقائق. استخراج البلازما، مع الحرص على عدم إزعاج طبقات خلايا الدم الحمراء والبيضاء. لجمع سيرين، واستخدام أنابيب دون تخثر.
يمكن استخدام كلا النوعين من العينات على الفور أو تخزينها تحت 80 درجة مئوية لمدة تصل إلى سنة واحدة. تهدف هذه الدراسة إلى التحقيق في تفوق جمع عينة الدم المتكررة من الوريد الذيل للفئران من خلال نظام جمع الدم فراغ ومكبر النظارات. المجموعة التجريبية بالمقارنة مع طريقة أخذ عينات الدم التقليدية.
المجموعة التقليدية، من قبل المبتدئين والخبراء على التوالي، حجم الدم الذي تم جمعه ومدة أخذ العينات كانت متشابهة بين مجموعتين للخبراء، ومع ذلك، زيادة حجم الدم الذي تم جمعه وأقصر مدة أخذ العينات شوهدت في مجموعة تجريبية مقارنة مع المجموعة التقليدية للمبتدئين. كما شوهد معدل نجاح أعلى في المجموعة التجريبية مقارنة بالمجموعة التقليدية للمبتدئين. هذه طريقة أخذ عينات الدم من السهل أن إتقانها ولها نسبة نجاح عالية.
ويمكن تخفيض عدد ثقب فشل إلى مقارنة تلك التي من استخدام الطريقة التقليدية. وعلاوة على ذلك هذا الإجراء لا يؤدي إلا إلى الحد الأدنى من الإصابات للفئران، فإنه مجرد شريط الذيل الفئران دون الحاجة إلى التخدير، أن تأثير استجابة الإجهاد في التخدير على عينة الدم يمكن تجنبها.
