Bu çalışmada, gözlük büyüteçli bir vakum ekstraksiyon tüp sistemi kullanan farelerde kuyruk damarından kan örneklemesi raporedilmektedir. Yöntemimiz pratik kolaydır ve farelerde tekrar kan örneklemesi için kullanılabilir. Bir fare ilk başta plastik yasaklama tutucu içine yerleştirilir.
Kuyruk temizlenir ve% 70 etanol ile silinir. Daha sonra operatör fare kuyruğunun görüntülenmesini iyileştirmek için gözlük büyüteçini tadar. Bir kelebek iğne ucu sonra genişlemiş lateral kuyruk damarlarıiçine yerleştirilir, ve kan kelebek iğne kauçuk ucundan vakum toplama tüpü içine toplanır.
Son olarak iğne çıkarılır ve kan alma işlemi tamamlanır. Kuyruk damarı kan örneklemesi için tercih edilen bir yerdir. Bu kan örnekleme yöntemi fareleriçin minimal yaralanma ile ilgilidir, ancak farelerin kuyruk damarı bazen delinmesi zor bu yüzden çok ince, burada bir vakum ekstraksiyon tüp sistemi kullanarak laboratuvar test fareler basit bir kuyruk ven kan örnekleme yöntemi açıklar.
Bu yöntem basit ve verimlidir ve farelerde gerekli kanın elde edilmesi için kullanılabilir. Prosedür bizim laboratuvar, Xiaoyan Liu ve Wusong Zou iki üyesi tarafından başlamak için gösterilecek, biz plastik bir yasaklama tutucu, kauçuk durdurucu vakum tüpleri yerleştirin, ve bir çift sivri iğne, ve gözlük büyüteç steril bir yüzeye. Sonra, plastik kısıtlama tutucu içine bir fare yerleştirin.
Farenin ön ve arka pençeleri rahat bir konumda olmalıdır. Kan örneği elde etmek için, 20 ila 30 santigrat derece ılık su ile kuyruk yıkayın, damar genişletmek için% 70 etanol doymuş pamuk topları ile kuyruk silin. Kan örneklemesi için sağ veya sol kuyruk damarını seçin.
Kuyruğun alt kısmını hafifçe kavrayın ve kan örneği toplama sırasında kuyruğu düz tutun. Kuyruk damarının delinmesini kolaylaştırmak için görüntülemeyi geliştirmek için gözlük büyüteçini takın. 22 gauge kelebek iğne ucunu, kuyruk ucundan yaklaşık 10 derecelik açıyla yarım distal etrafındaki yanal kuyruk damarlarından birine yerleştirin ve birden fazla örnek için kuyruğun tabanına doğru ilerleyin.
Vakum kan toplama tüpü içine kelebek iğne kauçuk ucu ekleyerek vakum toplama tüpü içine kan toplamak. Onaylanan protokole göre, farelerin kuyruğu gerektiğinde birkaç kan toplama için kullanılabilir. Geleneksel yöntemle farelerin ince ve düşük kan akımı kuyruk damarından yeterli kan hacmi elde etmek her zaman kolay değildir.
Yöntemimiz basit ve verimlidir ve farelerde tekrar tekrar yeterli kan hacmi elde etmek için kullanılabilir. Toplam kan hacminin %10'a kadarının iki haftalık aralıklarla sağlıklı bir hayvandan güvenli bir şekilde alınabileceği, bu nedenle her seferinde etik ilkelere uygun olarak yaklaşık 175 mikrolitre fare kan örneği alındığı bildirilmiştir. İki, kan örnekleme sürecinde hareket önlemek için kuyruk uzatmak için hayati önem taşımaktadır.
İğnede kan pıhtılaşmasını önlemek için, kanın 15 saniyeden fazla akması durursa başka bir delinme pozisyonu seçilmelidir. Başarılı kan toplama her seferinde 175 mikrolitre kan elde etmek olarak tanımlandı. Maksimal delinme süreleri üç denemeolarak ayarlandı.
Üçüncü delinmeden sonra toplam kan hacmi 175 mikrolitreden daha düşükse, başarısız kan toplanması olarak tanımlanmıştır. Yeterli numune hacmi toplandığında, iğneyi damardan çekin ve kanamayı durdurmak için ekleme bölgesine kısa bir süre basınç uygulayın. Plazma toplamak için, edta içeren tüpler kullanın, bir antikoagülan, yavaşça kan ile antikoagülan karıştırmak ve dikey buz üzerinde örnekleri yerleştirmek için tüp birkaç kez ters.
10 dakika boyunca buzdolabında santrifüj içinde tam kan örneği toplama tüpleri spin. Kırmızı ve beyaz kan hücresi tabakalarını rahatsız etmemeye özen terek plazmayı ayıklayın. Serin toplamak için, antikoagülan olmadan tüpler kullanın.
Her iki numune türü de hemen kullanılabilir veya bir yıla kadar 80 santigrat derecenin altında saklanabilir. Bu çalışmada, vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç ile farelerin kuyruk ven tekrarlanan kan örneği toplama üstünlüğünü araştırmak amaçlanmaktadır. Geleneksel kan örnekleme yöntemi ile karşılaştırıldığında deneysel grup.
Konvansiyonel grup, yeni başlayanlar ve uzmanlar tarafından sırasıyla toplanan kan hacmi ve örnekleme süresi uzmanlar için iki grup arasında benzer, ancak artan toplanan kan hacmi ve daha kısa örnekleme süresi yeni başlayanlar için konvansiyonel gruba göre deneysel grupta görüldü. Deneysel grupta yeni başlayanlar için konvansiyonel gruba göre daha yüksek başarı oranı da görüldü. Bu kan örnekleme yöntemi ana kolaydır ve yüksek bir başarı oranına sahiptir.
Başarısız delinme sayısı geleneksel yöntem kullanarak karşılaştırıldığında azaltılabilir. Ayrıca bu işlem sadece fareler için minimal yaralanmaya neden olur, bu anestezikler gerek kalmadan farelerin sadece kuyruk bandı, kan örneği üzerinde anesteziklerde stres yanıtı etkisi önlenebilir.
