Diese Studie berichtet Blutentnahme aus Schwanzvene bei Mäusen mit einem Vakuum-Extraktionsrohr-System mit Brillenlupe. Unsere Methode ist einfach zu praktizieren und könnte für wiederholte Blutproben bei Mäusen verwendet werden. Eine Maus wird zunächst in den Kunststoffhalter gelegt.
Der Schwanz wird gereinigt und mit 70% Ethanol abgewischt. Dann trägt der Bediener die Brillenlupe, um die Betrachtung des Mausschwanzes zu verbessern. Eine Schmetterlingsnadelspitze wird dann in eine der erweiterten seitlichen Schwanzvenen eingeführt und das Blut wird durch das Gummiende der Schmetterlingsnadel in das Vakuumsammelrohr entnommen.
Schließlich wird die Nadel entfernt und der Blutentnahmeprozess abgeschlossen. Schwanzvene ist ein bevorzugter Ort für die Blutentnahme. Diese Blutentnahmemethode ist mit minimalen Verletzungen von Mäusen verbunden, aber schwanzvene der Mäuse ist sehr dünn, so dass manchmal schwer zu punktieren ist, hier beschreiben wir eine einfache Schwanz Venen Blutprobenahme Methode in im Labor Test Mäuse mit einem Vakuum-Extraktionsrohr-System.
Diese Methode ist einfach und effizient und kann verwendet werden, um das erforderliche Blut wiederholt bei Mäusen zu erhalten. Das Verfahren wird von zwei Mitgliedern unseres Labors, Xiaoyan Liu und Wusong Zou, demonstriert. Als nächstes legen Sie eine Maus in den Kunststoffhalter.
Vorder- und Hinterpfoten der Maus sollten in einer komfortablen Position sein. Um eine Blutprobe zu erhalten, waschen Sie den Schwanz mit warmem Wasser 20 bis 30 Grad Celsius, wischen Sie den Schwanz mit 70% Ethanol gesättigten Baumwollkugeln, um die Vene zu erweitern. Wählen Sie die rechte oder linke Schwanzvene für die Blutentnahme aus.
Greifen Sie den unteren Teil des Schwanzes sanft und halten Sie den Schwanz gerade während der Blutprobenentnahme. Tragen Sie die Brillenlupe, um die Sicht zu verbessern, um die Punktion der Schwanzvene zu erleichtern. Setzen Sie die 22 Gauge Schmetterlingsnadelspitze in eine der seitlichen Schwanzvenen etwa eine Hälfte distal von der Spitze des Schwanzes in einem Winkel von etwa 10 Grad, in Richtung der Basis des Schwanzes für mehrere Proben bewegen.
Sammeln Sie Blut in das Vakuum-Sammelrohr, indem Sie das Gummiende der Schmetterlingsnadel in das Vakuum-Blutentnahmeröhrchen einlegen. Der Schwanz von Mäusen kann für mehrere Blutsammlungen verwendet werden, so oft wie nötig, nach dem genehmigten Protokoll. Es ist nicht immer einfach, mit der traditionellen Methode genügend Blutvolumen aus der dünnen und niedrigen Durchblutungs-Schwanzvene von Mäusen zu erhalten.
Unsere Methode ist einfach und effizient und kann verwendet werden, um ein ausreichendes Blutvolumen wiederholt bei Mäusen zu erhalten. Es wird berichtet, dass bis zu 10% des gesamten Blutvolumens von einem gesunden Tier in zwei Wochen in Abständen sicher entfernt werden können, so dass etwa 175 Mikroliter Blutprobe von Mäusen jedes Mal in Übereinstimmung mit Ethik-Prinzipien gesammelt wurde. Zweitens ist es wichtig, den Schwanz zu verlängern, um seine Bewegung im Prozess der Blutentnahme zu vermeiden.
Um eine Blutgerinnung in der Nadel zu vermeiden, sollte eine weitere Punktionsposition ausgewählt werden, wenn das Blut über 15 Sekunden nicht mehr abfließt. Erfolgreiche Blutentnahme wurde definiert als die Beschaffung von 175 Mikroliter Blut jedes Mal. Die maximalen Punktionszeiten wurden auf drei Versuche festgelegt.
Wenn das Gesamtblutvolumen nach der dritten Punktion um 175 Mikroliter niedriger war, wurde es als fehlgeschlagene Blutentnahme definiert. Wenn ein ausreichendes Probenvolumen gesammelt wurde, ziehen Sie die Nadel aus der Vene und nehmen Sie kurz Druck auf die Einsteckstelle, um die Blutung zu stoppen. Um Plasma zu sammeln, verwenden Sie Röhren, die EDTA, ein Antikoagulans enthalten, die Röhre mehrmals sanft umkehren, um Gerinnungsmittel mit dem Blut zu mischen und die Proben vertikal auf Eis zu legen.
Drehen Sie Vollblutproben-Entnahmeröhrchen in der gekühlten Zentrifuge für 10 Minuten. Extrahieren Sie das Plasma, wobei Darauf zu achten ist, die roten und weißen Blutkörperchen nicht zu stören. Um Serin zu sammeln, verwenden Sie Tuben ohne Gerinnungsmittel.
Beide Arten von Proben können sofort verwendet oder bei unter 80 Grad Celsius für bis zu einem Jahr gelagert werden. Diese Studie zielte darauf ab, die Überlegenheit der wiederholten Blutprobenentnahme von Mäusen durch Vakuum-Blutentnahmesystem und Brillenlupe zu untersuchen. Experimentelle Gruppe im Vergleich zur herkömmlichen Blutentnahmemethode.
Die konventionelle Gruppe, von Anfängern bzw. Experten, das gesammelte Blutvolumen und die Probendauer waren zwischen zwei Gruppen für Experten ähnlich, jedoch wurden erhöhte blutgesammelte Blutmengen und kürzere Probendauer in der experimentellen Gruppe im Vergleich zur konventionellen Gruppe für Anfänger beobachtet. Eine höhere Erfolgsquote zeigte sich auch in der Versuchsgruppe im Vergleich zur konventionellen Gruppe für Anfänger. Diese Blutentnahmemethode ist einfach zu meistern und hat eine hohe Erfolgsrate.
Die Anzahl der fehlgeschlagenen Punktion konnte auf einen Vergleich mit der traditionellen Methode reduziert werden. Darüber hinaus verursacht dieses Verfahren nur minimale Verletzungen an Mäusen, es ist nur das Schwanzband der Mäuse ohne die Notwendigkeit von Anästhetika, dass der Einfluss der Stressreaktion bei Anästhetika auf die Blutprobe vermieden werden könnte.
