ניתן להשתמש בטכניקת בידוד זו כדי לחקור אם תאי גזע של שומן יכולים לסייע למטופלים לחדש את תפקוד הזיקפה לאחר כריתת ערמונית רדיקלית. שיטה זו אינה מוגבלת למחלה מסוימת. ניתן להשתמש בו בכל תחומי המחקר בתאי גזע השומן.
תאי הגזע המבודדים משמשים לטיפול בבעיות זיקפה, אך טכניקת הבידוד היא הליך כללי ותאי הגזע יכולים להיות שימושיים בתחומים אחרים בחקר תאי גזע. התחילו בחיטוי עור הבטן ושק האשכים עם 0.5% כלורהקסידין. השתמש בסמן כירורגי כדי לצייר את האזורים על הבטן שבהם שאיבת שומן הולך להתבצע, בדרך כלל את האזור בין הסינתזה לבין הטבור.
לעשות שני חתכים ברוחב שישה מילימטרים בעור הבטן עם מספר 11 אזמל. מקם את החתכים בצורה סימטרית ולרוחבית מהאזור המצויר למעלה של שאיבת שומן. מניחים מעט חומר סיכה על החתכים כדי לוודא שצינורית ההחדרה מחליקה פנימה והחוצה מהחתכים בקלות במהלך שאיבת השומן.
לאחר מכן הציגו צינורית חדירה במד מידה 14 דרך החתכים בעור. הזריקו תמיסת קליין שונה באופן תת-עורי באזורים המסומנים המקבילים לפני העור עד שהרקמה הממוקדת הופכת לנפוחה ומוצקת או חמצמצית. הזריקו נפח של תמיסת קליין שעברה שינוי ביחס של אחד לאחד לרקמת השומן.
המתן במשך 10 דקות כדי למקסם את ההשפעות של אדרנלין, ולהפחית את כמות הדם ברקמת השומן שנקטפה. בצע שאיבת שומן עירוי סילון סטנדרטית כדי לקצור 200 עד 300 מילימטרים של רקמת שומן. השתמש בצינוריות קהות שהן חלולות עם צינור עירוי משולב וזרבובית.
חברו את הצינורית למכשיר יניקה לשאיבת שומן. הציגו מזרק של שלושה מילימטרים עם קצה קהה דרך החתכים בבטן ואספו את רקמת השומן באספן ליפו כדי לשמר את הליפואספיראט בסביבה סטרילית. ה lipoaspirate יתחיל להיפרד משלב המים.
השתמשו במזרקים סטריליים של 50 מיליליטר כדי לשאוב את הליפואספיראט מה-LipoCollector, ובכך למזער את נפח המים הנשאבים במזרקים. הברג תקע בקצה המזרקים כדי לשמור על רקמת השומן סטרילית. מניחים מזרקים עם קצה כלפי מטה בשקית ניילון סטרילית כדי להתחיל בהפרדת ליפו-אספראט משלב המים.
לאחר מכן מניחים את השקית במיכל סטרילי. כסו את המיכל בוילון סטרילי כדי לאבטח את הסביבה הסטרילית במהלך ההובלה. סגור את חתכי העור עם חומר התפר המועדף על המנתח.
מניחים בגד דחיסה סביב הבטן כדי להפחית בצקת לאחר הניתוח. כדי ליצור בלוק פין, להזריק את bupivacaine בשני אתרים, אחד ממוקם גחון והשני dorsally. הכניסו את כל המחט לרקמה התת עורית, הצביעו עליה לרוחב ימינה, והזיקו את ההרדמה כשהמחט נסוגה.
חזור על ההזרקה, והפנה את המחט שמאלה. הניחו את כל החומרים המתכלים והאנזימים באופן ספקני על השולחן המכוסה במגבת כירורגית חד פעמית סטרילית. נגבו את המכשיר עם אתנול וטענו את הסט המתכלה.
לאחר מכן חברו שקית של מצלצלים מניקים למערכת. בצע את סדרת הבדיקות האוטומטיות למחצה לפני הוספת הליפופיאוראט. בזמן שהמכשיר מוכן, תנו לליפופאספיראט לעמוד בצינור 50 מיליליטר כדי לאפשר לשומן להיפרד מהפאזה הנוזלית.
שים לב לכמות הכוללת של רקמת השומן והשתמש בה כדי להבטיח שהכמות הכוללת של השומן הטעון תהיה בטווח קיבולת המכשיר. טען את הרקמה כאשר המכשיר התבקש לעשות זאת. המכונה תנקז עודפי נוזלים.
שקלו את כמות רקמת השומן ושטפו אותה עם צלצולים מניקים. לאחר שהרקמה נשטפה ונוקזה, חברו שקית עירוי חדשה עם צלצולים מניקים של 37 עד 39 מעלות צלזיוס. בנה מחדש את האנזים הזמין מסחרית המכיל תערובת קולגן ופרוטאזות בחמישה מיליליטרים מניקים.
ודא שהמכשיר מציג את כמות האנזים כדי להזריק לתוך המכל עם רקמת השומן. לאחר הזרקת העיכול האנזימטי יימשך כ -20 דקות. לאחר עיכול רקמות, בדקו שהתכולה מופרדת לשומנים עליונים המכילים פאזה צהובה ולשכבה ורודה תחתונה המכילה את התאים הרגנרטיביים שמקורם בשומן, או ADRCs.
תנו לשכבה הוורודה להתנקז לתוך תא עיבוד התאים של הסט המתכלה, והשאירו את שכבת השומנים מאחור. אפשרו ל-ADRCs להתרכז בתא עיבוד התאים במהלך סבבים מרובים של צנטריפוגה. לאחר מכן להוסיף 10 מיליליטרים של intrabase משוחזרים בצלצולים מניקים.
התגובה האנזימטית נמשכת 10 דקות וה-ADRCs נשטפים לאחר מכן. כאשר הבידוד של ADRCs הושלם, להשעות מחדש את התאים בחמישה מיליליטרים של לקטט של רינגר ולשאוף את התמיסה למזרק של חמישה מיליליטר. הרכיבו מנעול נקבת לואר תלת-כיווני על המזרק ושאפו ארבעה מיליליטרים של ADRCs למזרק סטרילי נוסף של חמישה מיליליטרים.
העבר את מיליליטר אחד האחרון של ADRCs למזרק מיליליטר אחד. השתמש באליקווט זה לניתוחי אפיון ADRC, כגון ספירת תאים, כדאיות תאים, ניתוח סמני פני השטח לפי ציטומטריית זרימה ויכולת התמיינות ADRC. שים מחט של 25 מדים על מזרק חמשת המיליליטרים המכיל את ארבעת המיליליטרים של ADRCs.
לאחר מכן ארזו אותו בוילון סטרילי. תמיסה זו של ADRCs תוזרק למושתל ותכיל בממוצע 8.4 עד 32.7 מיליון תאים. וודאו שהתמיסה של ADRCs נשארת הומוגנית על ידי הטיית המזרק בעדינות עד שהוא מוזרק למערת קורפורה.
מניחים עטיפת צמצם על הפין. וחוסם עורקים בשורש הפין עם לולאת כלי סיליקון. הידקו את הלולאה והדקו אותה עם מלקחיים, מה שהופך את חוסם העורקים חזק מספיק כדי לעצור את זרימת הדם מהפין.
השתמש בשני ספוגיות חיטוי כדי לחטא את עור הפין באתר ההזרקה. לאחר מכן הזריקו מיליליטר אחד של תמיסת ה-ADRC בזווית ישירה לתוך הקורפורה cavernosum, בצד ימין בשני מקומות שונים. חזור על שלב זה במערות קורפורה השמאלית, תוך הזרקת נפח כולל של ארבעה מיליליטרים.
שיטה זו נבחנה בניסוי קליני שלב 1 עם תווית פתוחה על 21 גברים עם גיל ממוצע של 60 שנה וזקפה רגילה וחיי מין פעילים לפני כריתת ערמונית רדיקלית. שישה מהגברים סבלו גם הם מבריחת שתן. כל הגברים קיבלו זריקה בין-מערותית אחת של ADRCs מבודדים ולאחר מכן הגיעו לארבעה ביקורים במרפאת החוץ בשעה 1, 3, 6 ו-12 חודשים לאחר ההזרקה.
לא התרחשו אירועים חמורים בזמן התצפית. שמונה גברים דיווחו על אדמומיות ונפיחות חולפות באתרי ההזרקה, ושלושה דיווחו על תגובה באזור הפין. שמונה גברים חוו אירועים קלים הפיכים הקשורים לשאיבת שומן, כגון אי נוחות קלה בבטן והמטומות קלות בבטן.
אף מטופל לא דיווח על אי נוחות במעקב של חודש אחד. התפקוד המיני שלהם הוערך עם המדד הבינלאומי של תפקוד הזיקפה חמש וציון קשיות הזקפה. שמונה מתוך 15 גברים בקבוצת היבשת דיווחו שתפקוד הזיקפה שלהם הספיק לקיום יחסי מין בגיל 12 חודשים.
הקבוצה של שישה גברים חסרי שליטה לא הראתה כל שיפור בתפקוד הזיקפה בעת ניסיון פרוטוקול זה, יש לזכור כי האנזימים המשמשים במהלך הליך הבידוד יש להוציא מהמקפיא או המקרר שעתיים לפני תחילת ההליך. התוצאות של טכניקה זו סללו את הדרך ל-RCT שבו נחקרות ההשפעות של תאי גזע של שומן בקנה מידה גדול יותר.
