这种分离技术可用于探索脂肪干细胞是否可以帮助患者在根治性前列腺切除术后再生勃起功能。这种方法不限于特定疾病。它可以用于脂肪干细胞研究的所有领域。
分离的干细胞用于治疗勃起功能障碍，但分离技术是一种通用程序，干细胞可用于干细胞研究的其他领域。首先用0.5%氯己定消毒腹部和阴囊的皮肤。使用手术标记来绘制腹部将要进行抽脂的区域，通常是合成和脐带之间的区域。
用11号手术刀在腹部皮肤上做两个六毫米宽的切口。从抽脂的上拉区域对称和横向放置切口。在切口上放一点润滑剂，以确保浸润套管在抽脂过程中容易地滑入和滑出切口。
然后通过皮肤上的切口引入14号规格的渗透套管。在与皮肤表面平行的标记区域皮下注射改良的Klein溶液，直到目标组织变得肿胀和紧致或肿胀。以一比一的比例向脂肪组织注射一体积的改性Klein溶液。
等待10分钟，以最大限度地发挥肾上腺素的作用，并减少收获的脂肪组织中的血液量。执行标准的喷射输液抽脂术，以收获200至300毫米的脂肪组织。使用带有集成输液管和喷嘴的中空钝插管。
将套管连接到抽吸装置上进行抽脂。引入一个三毫米注射器，其钝尖端穿过腹部的切口，并将脂肪组织收集在Lipo收集器中，以在无菌环境中保存脂肪吸汗物。脂肪代汗液将开始与水相分离。
使用50毫升无菌注射器从LipoCollector中吸收脂质吸汗，最大限度地减少注射器中吸收的水量。拧紧注射器尖端的塞子，以保持脂肪组织无菌。将尖端向下的注射器放在无菌塑料袋中，以开始将脂肪吸气剂与水相分离。
然后将袋子放在无菌容器中。用无菌垂布覆盖容器，以确保运输过程中的无菌环境。用外科医生首选的缝合材料关闭皮肤切口。
在腹部周围放置一件加压衣，以减少术后水肿。为了制造阻滞，在两个部位注射布比卡因，一个放在腹侧，另一个放在背部。将整根针头引入皮下组织，将其横向指向右侧，并在针头缩回时注射麻醉剂。
重复注射，将针头指向左侧。将所有耗材和酶无菌地放在桌子上，用无菌的一次性手术巾覆盖。用乙醇擦拭设备并装入耗材组。
然后将一袋乳酸铃声连接到系统。在添加脂肪吸气剂之前进行一系列半自动测试。在制备设备时，让脂肪吸气剂站在50毫升管中，以使脂肪与液相分离。
注意脂肪组织的总量，并使用它来确保负载脂肪的总量将在设备容量的范围内。在设备提示时加载组织。机器将排出多余的液体。
称量脂肪组织的量，并用乳酸铃声清洗。当组织被清洗和排干后，将一个新的输液袋与37至39摄氏度的乳酸振铃器连接。在五毫升乳酸铃声中重建含有胶原酶和蛋白酶混合物的市售酶。
确保设备显示与脂肪组织一起注射到罐中的酶的量。注射后，酶消化将持续约20分钟。组织消化后，检查内容物是否被分离成含有黄色相的上脂质和含有脂肪衍生再生细胞或ADRC的下部粉红色层。
让粉红色层排入耗材组的细胞处理室，留下脂质层。在多轮离心过程中，允许ADRC浓缩在细胞处理室中。然后加入10毫升在乳酸铃声中重组的碱基内。
酶促反应持续10分钟，然后洗涤ADRC。当ADRC的分离完成后，将细胞重新悬浮在五毫升的Ringer乳酸盐中，并将溶液吸入五毫升注射器中。在注射器上安装一个三通旋塞阀雌性鲁尔锁，并将四毫升ADRC吸入另一个五毫升无菌注射器中。
将最后一毫升ADRC转移到一毫升注射器中。将此等分试样用于 ADRC 表征分析，例如细胞计数、细胞活力、流式细胞术分析表面标志物以及 ADRC 分化能力。将一个25号针头放在含有四毫升ADRC的五毫升注射器上。
然后将其包装在无菌垂坠中。这种ADRC溶液将被注射到受体中，平均应包含840万至3270万个细胞。通过轻轻倾斜注射器，直到将其注入海绵体，确保ADRC的溶液保持均匀。
在阴茎上放置一个光圈。阴茎根部的止血带，带有硅胶血管环。收紧环并用镊子固定，使止血带足够紧，以阻止血液从阴茎流出。
使用两个消毒棉签对注射部位的皮肤进行消毒。然后将一毫升ADRC溶液以直接角度注入海绵体，在右侧的两个不同位置。在左侧海绵体中重复此步骤，总体积为四毫升。
这种方法在开放标签的第一阶段临床试验中对21名男性进行了测试，平均年龄为60岁，并且在根治性前列腺切除术前正常勃起和活跃的性生活。其中六名男子也患有尿失禁。所有男性均接受一次海绵间注射分离的ADRC，并在注射后1，3，6和12个月在门诊进行四次随访。
在观察期间没有发生严重事件。八名男性报告注射部位出现短暂的发红和肿胀，三名患者报告区域出现反应。八名男性经历了与抽脂相关的可逆性轻微事件，如轻微的腹部不适和轻微的腹部血肿。
在一个月的随访中，没有患者报告不适。用国际勃起功能指数五和勃起硬度评分评估他们的性功能。该大陆组中 15 名男性中有 8 名报告说，他们的勃起功能足以在 12 个月时进行。
六名失禁男性组在尝试此方案时没有显示出勃起功能的任何改善，请记住，隔离过程中使用的酶必须在手术开始前两小时从冰箱或冰箱中取出。这项技术的结果为RCT铺平了道路，在RCT中，脂肪干细胞的影响在更大范围内得到探索。
