פרוטוקול זה יכול לעזור למדענים לחקור תוצאות לאחר פגיעה בעצב הפנים ושיטות לשיפור ההתחדשות על פני פרמטרים רבים ושונים. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא כי האנטומיה של החולדה מאפשרת גישה קלה לעצב הפנים, ואת קנה המידה הגדול שלה מאפשר לנו ללמוד את כל דפוסי הפציעה הרלוונטיים. היישומים של טכניקה זו להרחיב לקראת שיקום של המטופלים לאחר פגיעה עצבית בפנים.
כפוטנציאל הרגנרטיבי החולדה מספקת מודל ניסיוני מתרבה ותמציתי. שיטה זו יכולה לספק תובנה על טיפולים כירורגיים ורפואיים עבור ניתוח עצב הפנים או שיתוק. וזה ניתן לתרגום לדגמי ראש וצוואר אחרים או לעצבים היקפיים אחרים.
לפעול תחת מיקרוסקופ באמצעות שתי הידיים יכול להיות מאתגר. אני ממליץ להתאמן באמצעות גרסה משקפת תחת המיקרוסקופ לפני שתנסה ניתוח עצב הפנים. לאחר אישור חוסר תגובה קמצוץ בוהן, להחיל משחה על העיניים של החולדה לגלח את האזור הכירורגי.
להקים שיטה לזיהוי חולדה ולה מניחים גליל גזה מתחת לצוואר. לחטא את העור החשוף עם שלושה כלורקסידין לסירוגין ו 70% קרצוף אתנול ולהניח את החולדה תחת מיקרוסקופ סטריאו. לתפעל את האוזן ipsilateral בכיוון אחורי-anterior כדי לקבוע את הקיפול הטבעי של העור postauricular.
השתמש בלהב מספר 15 כדי לבצע חתך של שניים עד שלושה מילימטרים בקמט הפוסט-אורקולרי. התכנון ומיקום החתך הם הצעדים הקריטיים ביותר להבטחת זיהוי אמין של עצב הפנים תוך מזעור גודל הפצע. לנתח בבוטות דרך fascia תת עורי מיידית ולה מניחים מפשק מיקרו-Weitlaner כדי לשפר את החשיפה לרקמות.
זהה את שריר digastric לפני שהוא נע בכיוון נחות עד מעולה לכיוון החדרתו לאורך בסיס הגולגולת. מורחים בעדינות דרך בטן השריר לאורך נקודת החדרת השריר כדי לחשוף את הגיד של הבטן digastric לפני. הגיד יופיע כתהליך לבן מצולם שנושר מהשריר עם הכנסה מוצקה לבסיס הגולגולת.
לאחר זיהוי של שריר digastric anterior והגיד שלה, להתאים את מפשק Weitlaner כדי להמשיך לסגת בטן השריר. האזור החשוף הוא החלל התלת מימדי שבו נמצא הגזע הראשי של עצב הפנים. לנתח לאורך העצב בכיוון נחות distally מהיציאה של foramen stylomastoid.
כדי לגרום לדפוס פגיעה במחוץ, השתמש במדפים של תכשיטן חלק כדי לתפוס היטב ולדחוס את העצב החלת לחץ קבוע לשחזור במשך 30 שניות כדי להבטיח פציעת ריסוק מתאימה. עבור transection פשוט, לתפוס את האפינוריום המיידי overlying העצב עם מטלאים דק שיניים, ולהשתמש microscissors חדים כדי לחתוך את העצב בצורה נקייה בנקודה הרצויה עם חתך אחד. עבור מודל פער עצבי, השתמש calipers מתכוונן כדי להגדיר את אורך פער העצבים הרצוי כדי להבטיח דפוסי פציעה דומים בין בעלי חיים ולהפוך את העצב כפי שהוכח רק.
לאחר הפציעה הניסיונית נמסר, להשקות את הפצע עם מלוחים סטריליים ולייבש את הרקמה עם גזה סטרילית. לפני סגירת חתך העור על פי הנחיות מוסדיות. כאן, הדמיה חיה של תא המטען הראשי של עצב הפנים עם פציעת ריסוק בערך שניים עד שלושה מילימטרים דיסטלי עד לנקודת הענף של PES הראשון בחולדת Thy1-GFP מהופנטת בוגרת מוצגת.
הערכה של החזרה ההדרגתית של פלואורסצנטיות בשבוע אחד, שניים, שלושה וארבעה שבועות לאחר פציעה יכולה לשמש כסמן לניטור התחדשות העצבים בבעלי חיים מהו מהומנים אלה. ניתוח היסטומורפי ניתן להשתמש כדי להשיג תמונות חתך של חלוקת הלסת השולית המאפשר כימות של קוטר האקסונאלי, כמות פסולת, סיבי עצב, אחוז העצב, ומדידות צפיפות. חשוב לעתים קרובות להתאים את המיקום של המפשק לפי הצורך כדי להבטיח כי העצבים האנטומיים הרלוונטיים גלויים בעת זיהוי עצב הפנים.
בעקבות הליך זה ניתן לקצור את העצבים והשרירים הרלוונטיים לניתוח אימונוהיסטוכימי כדי להעריך את מידת ההתחדשות ביחס לקבוצות ניסיוניות אחרות. בעקבות התפתחותה, טכניקה זו סללה את הדרך לחוקרים בחקר התוצאות התפקודיות לאחר פגיעה בעצב הפנים. באופן ספציפי, כיצד להשפיע על תופעת הסינקינזה.
