Bu protokol bilim adamları yüz sinir yaralanması ve yöntemleri birçok farklı parametreler arasında rejenerasyon geliştirmek için sonuçları çalışma yardımcı olabilir. Bu tekniğin ana avantajı sıçan anatomisi yüz sinir kolay erişim sağlar, ve büyük ölçekli bize ilgili yaralanma desenleri tüm çalışma sağlar. Bu tekniğin uygulamaları yüz sinir yaralanması sonrası hastaların rehabilitasyonuna doğru uzanır.
Rejeneratif potansiyel olarak sıçan tekrarlanabilir ve özlü deneysel bir model sağlar. Ve bu yöntem yüz sinir pazesisi veya felç için cerrahi ve tıbbi tedaviler içine fikir sağlayabilir. Ve diğer baş ve boyun modellerine ya da diğer çevresel sinirlere aktarılabilir.
Her iki el kullanarak mikroskop altında çalışma zor olabilir. Ben bir yüz sinir diseksiyonu denemeden önce mikroskop altında dürbün sürümünü kullanarak pratik öneririz. Parmak sıkışmasına yanıt eksikliğini doğruladıktan sonra, farenin gözlerine merhem uygulayın ve cerrahi bölgeyi tıraş edin.
Fare tanımlama için bir yöntem belirleyin ve boynun altına gazlı bez yerleştirin. Üç alternatif klorheksidin ve% 70 etanol scrubs ile maruz kalan cilt dezenfekte ve bir stereo mikroskop altında sıçan yerleştirin. Postauriküler derinin doğal katlanabilirliğini belirlemek için ipsilateral kulağı ön-posterior yönde manipüle edin.
Postauriküler kırışıklıkta 2-3 milimetrelik bir kesi yapmak için 15 numaralı bıçağı kullanın. Kesilerin planlanması ve yerleştirilmesi, yara boyutunu en aza indirirken yüz sinirinin güvenilir bir şekilde tanımlanmasını sağlamak için en kritik adımlardır. Bluntly ani deri altı fasya ile diseksiyon ve doku maruziyetini artırmak için bir mikro-Weitlaner retraktör yerleştirin.
Kafatası tabanı boyunca yerleştirilmesi doğru bir alt-üst yönde seyahat olarak ön digastrik kas tanımlayın. Anterior digastrik karın tendonunu ortaya çıkarmak için kas ekleme noktası boyunca kas göbeği boyunca hafifçe yayılır. Tendon kafatası tabanına sağlam bir ekleme ile kas yayılan bir filmbeyaz süreç olarak görünecektir.
Anterior digastrik kas ve tendon belirlenmesinden sonra, daha fazla kas göbek geri çekmek için Weitlaner retractor ayarlayın. Maruz kalan bölge, fasiyal sinirin ana gövdesinin yattığı üç boyutlu uzaydır. Stylomastoid foramen çıkışından distal bir alt yönde sinir boyunca diseksiyon.
Bir ezilme yaralanması paterni ikna etmek için, uygun bir ezilme yaralanması sağlamak için 30 saniye boyunca sabit ve tekrarlanabilir basınç uygulayarak sinirsıkıca kavramak ve sıkıştırmak için düzgün yüzeyli kuyumcu forseps kullanın. Basit bir transeksiyon için, ince dişli forseps ile sinir örten hemen epineurium kavramak ve temiz tek bir kesim ile istenilen noktada sinir transect için keskin mikroskasorskullanın. Bir sinir boşluğu modeli için, hayvanlar arasında benzer yaralanma desenleri sağlamak ve az önce gösterildiği gibi sinir transect sağlamak için istenilen sinir boşluğu uzunluğu ayarlamak için ayarlanabilir kaliperler kullanın.
Deneysel yaralanma teslim edildikten sonra, steril salin ile yara sulama ve steril gazlı bez ile doku kuru. kurumsal kurallara göre deri kesisini kapatmadan önce. Burada, bir ezilme yaralanması ile fasiyal sinirin ana gövdesinin canlı görüntülenmesi ile erişkin transgenik THY1-GFP sıçanDa ilk PES'in dal noktasına kadar yaklaşık 2-3 milimetre distal gösterilmektedir.
Bir, iki, üç ve dört haftalık floresan dönüşlerinin değerlendirilmesi bu transgenik hayvanlarda sinir rejenerasyonunun izlenmesi için bir belirteç olarak kullanılabilir. Histomorfometrik analiz, aksonal çapın nicelleştirilmesine, enkaz miktarına, sinir lifine, sinir yüzdesinin ve yoğunluk ölçümlerinin ölçülmesine olanak tanıyan marjinal mandibular bölünmenin kesitsel görüntülerini elde etmek için kullanılabilir. Fasiyal siniri tanımlarken ilgili anatomik sinirlerin görünür olmasını sağlamak için retraktörün yerleşimini sıklıkla ayarlamak önemlidir.
Bu prosedürü takiben ilgili sinirler ve kaslar diğer deney gruplarına göre rejenerasyon derecesini değerlendirmek için immünohistokimyasal analiz için hasat edilebilir. Gelişiminitaki bu teknik, yüz sinir hasarı sonrası fonksiyonel sonuçları inceleyen araştırmacıların önünü açmıştır. Özellikle, nasıl sinkinezis fenomeni etkisi.
