该协议可以帮助科学家研究面部神经损伤后的结果和改善许多不同参数再生的方法。这种技术的主要优点是,大鼠解剖允许容易进入面部神经,其大规模使我们能够研究所有相关的伤害模式。该技术的应用延伸到面部神经损伤后患者的康复。
作为再生潜力,大鼠提供了一个可重复和简洁的实验模型。这种方法可以提供面部神经性神经性或瘫痪的外科和医学疗法的见解。并且它可译向其他头部和颈部模型或其他外围神经。
用双手在显微镜下操作可能具有挑战性。我建议在尝试面部神经解剖之前,在显微镜下练习双目版本。在确认对手趾捏没有反应后,对大鼠的眼睛涂抹软膏并剃光手术区域。
建立一种老鼠识别方法,并在颈部下放置一卷纱布。用三个交替的氯己丁和70%乙醇磨砂对暴露的皮肤进行消毒,将大鼠置于立体显微镜下。在前后方向操纵耳部,以确定后耳皮肤的自然折叠。
使用数字 15 刀片在后柱折痕中进行 2 到 3 毫米切口。切口的规划和放置是确保正确识别面部神经,同时最大限度地减少伤口尺寸的最关键步骤。通过直接皮下筋膜进行模糊解剖,并放置一个微威特兰缩回器,以增强组织暴露。
确定前挖肌肉,因为它以低于优势的方向向其沿头骨底部插入。沿着肌肉插入点轻轻地穿过肌肉腹部,露出前胃骨腹部的肌腱。肌腱将出现一个薄膜白色过程,从肌肉中发出,并牢固地插入到头骨基座上。
在确定前肌肉及其肌腱后,调整威特兰缩回器以进一步缩回肌肉腹部。暴露区域是面部神经主干所在的三维空间。沿着神经沿着一个低劣的方向, 从类固醇前人的出口。
要诱导粉碎伤害模式,请使用光滑表面的珠宝商钳子牢牢抓住并压缩神经,施加恒定且可重复的压力 30 秒,以确保适当的粉碎伤害。对于一个简单的转切,抓住直接的膜覆盖神经与细齿钳,并使用尖锐的微切口,以清洁转切神经在所需的点与一个单一的切口。对于神经间隙模型,使用可调卡钳设置所需的神经间隙长度,以确保动物和直肠神经之间的类似损伤模式,正如刚刚演示的。
实验损伤分娩后,用无菌盐水灌溉伤口,用无菌纱布干燥组织。在根据机构指南关闭皮肤切口之前。在这里,显示成人转基因 Thy1-GFP 大鼠中面部神经主干的活成像,其粉碎损伤约为 2 到 3 毫米,距离第一个 PES 的分支点。
评估荧光在一、二、三和四周后损伤的逐渐恢复,可作为监测这些转基因动物神经再生的标记。组织形态分析可用于获取边缘人部分的横截面图像,从而可以量化轴角直径、碎片量、神经纤维、神经百分比和密度测量。重要的是要经常调整回缩器的位置,以确保相关的解剖神经在识别面部神经时可见。
按照这个程序,相关的神经和肌肉可以收获免疫组织化学分析,以评估相对于其他实验组再生的程度。随着技术的发展,这项技术为研究人员研究面部神经损伤后的功能结果铺平了道路。具体来说,如何影响合成现象。