זה יכול להיות מאתגר להעביר ולשתק זבובי פירות. באמצעות טכניקות וכלים אלה, אתה יכול לעשות העברת זבוב שגרתית קיבוע קל יותר. החומרים הדרושים כדי להפוך את הכלים האלה הם זולים וקל להשיג.
ייעוץ והוראה או מעבדת מחקר יכולים לעשות אותם בקלות. לפני תחילת הליך זה, להשתמש בברזל sodlering חשמלי לעשות חור במרכזים של שני תקעי ספוג כי הם גדולים יותר מאשר הקוטר הפנימי של הבקבוקונים שישמש להעברת הזבובים. לאחר מכן, השתמש בסכין חדה כדי לחתוך קצה מיקרופיפט אחד מילימטר רוחבי לשניים לחתוך 1.5 ס"מ מהקצה של קצה מיקרופיפט מילימטר שני.
הדבק את החלקים של שני טיפים פיפטה יחד עם דבק לכל מטרה. לאחר מכן הכנס את קצה המיקרופיפט המוארך לתקע ספוג אחד, והכנס משפך לתקע הספוג השני, וכסה את קצות הפיפט עם צינורות מיקרוצנטריפוגה בודדים של 100 מיקרוליטר. כדי להכין את מחטי המיקרו-דיסקטיקציה, בחר סיכות חרקים התואמות את קטרות מילוי העופרת של עפרונות מכניים ארגונומיים, ולהשתמש בזוג צבת כדי לחתוך את הקצוות חד העין של הפינים.
לאחר מכן תגיש את החתכים שטוחים, והחלף את ההפניה בעפרונות בפינים שהשתנו. כדי להכין מארז איסוף ביצים Drosophila, להשתמש חותך הצמד לחתוך בקבוק משקה פלסטיק רך 500 מיליליטר כ 2/3 במורד הבקבוק, ולהשתמש בקלטת כדי לאבטח רצועה של נייר כרטיס סביב צלחת מיץ תפוחים בקוטר 60 מ"מ. כדי להעביר את זבובים הבוגרים בין בקבוקונים, בדקו היטב את גזע המשפך ב פקק המשפך ואת קצה הפיפסה ב פקק הקצה.
הקישו על הזבובים בבקבוקון הראשון, והחליפו את התקע ב פקק קצה. חבר את הבקבוקון השני עם פקק משפך, והצב את הבקבוקון הראשון מעל הבקבוקון השני, כך קצה פיפטה קצה של פקק קצה מוכנס לתוך פתח משפך של פקק משפך. לדפוק את הקצה של הבקבוקון הראשון כדי לאפשר את הזבובים לחמוק מקצה פיפטה דרך הגבעול של המשפך לתוך הבקבוקון השני.
אם כל מזון ישן בבקבוקון הראשון הופך פחות קומפקטי ויורד כאשר הבקבוקון הוא הפוך, להפוך את הבקבוקון השני על הבקבוקון הראשון, ולאפשר זבובים לזחול לתוך הבקבוקון השני. כאשר מספר הזבובים הרצוי הועבר, הפרד את פקק הקצה ממעצור המשפך והחלף את פקק הקצה בתקע המקורי. לאחר מכן החלף את פקק המשפך בבקבוקון השני בתקע מתאים.
עבור קיבוע זבוב פירות למבוגרים על ידי מצמרר, מניחים חבילת קרח להקפאה, כי כבר מקורר במינוס 80 מעלות צלזיוס לפחות 24 שעות, בטמפרטורת החדר, ומצננים בקבוקון ריק בקרח כתוש. 20 דקות לאחר מכן, מעט לחות חתיכת גזה רפואית לא אספטית, כי הוא קצת יותר קטן מאשר חבילת קרח מקורר, עם מים זורמים. מניחים את הגזה על פני השטח של חבילת הקרח כך שהגאזה נצמדת קרוב לפני השטח של הלהקה.
לאחר מכן השתמשו בפיסת נייר סופגת כדי לנגב את המים מהבקבוקון הצונן והריק, ולהעביר את הזבובים הבוגרים שצריכים להיות משותקים לתוך הבקבוקון. כאשר כל הזבובים הועברו, לכסות את הבקבוקון המצונן, ולהפיל את הבקבוקון על הקרח כתוש פעמיים עד שלוש פעמים כדי להקיש על כל הזבובים לתחתית הבקבוקון. הזבובים מיד יהיו משותקים.
מניחים את הבקבוקון בחזרה על קרח במשך דקה אחת לפני שופכים את הזבובים על גזה מכסה את חבילת הקרח. לאחר מכן השתמש במברשת צבע כדי לפרוש את הזבובים החופפים. כדי לבחון את הזבובים משותקים תחת מיקרוסקופ סטריאו, להסיר את קליפי הבמה מן המיקרוסקופ לנתח, ולכסות את הבמה עם חתיכת סרט פלסטיק.
מניחים את חבילת הקרח על הבמה, ומדליקים את מקור האור הקר של המיקרוסקופ כזמין. לאחר מכן מקד את מיקרוסקופ הסטריאו, והזז את חבילת הקרח עד שניתן יהיה לראות בבירור את הזבובים המצונן. לאחר צפייה זבובים, להעביר כל זבוב, על ידי הכנף, לתוך בקבוקון תרבות חדש.
כדי להקריב במיקרוגל את זבובי המבוגרים לספירה, מיון או השלכה, מעבירים את זבובי המבוגרים בעלי עניין לבקבוקון ריק, ומכסים את הבקבוקון בצלחת פטרי. הבא להפוך את הבקבוקון בתוך מיקרוגל, לחמם את הבקבוקון בטמפרטורה סטנדרטית במשך 80 שניות. הזבובים המתים ייפולו לתוך צלחת פטרי.
לובש כפפות עבודה מגן, לשפוך את הזבובים על לבן, כרטיס נייר, ולהעביר את הכרטיס תחת מיקרוסקופ סטריאו לבדיקה ו / או ספירה עם מחטי microdissection שהוכנו בעבר. ניתן להשליך את הזבובים בסוף הבדיקה. להעברת כלוב איסוף ביצים בצורת בקבוק, הכנס את בקבוק כלוב איסוף הביצים המתוקן לצלחת מיץ התפוחים.
השתמש ברצועה של סרט פרפין כדי לאטום את המפרק סביב שני המרכיבים. לאחר מכן חבר את הכלוב עם פקק משפך, ולהפוך את בקבוקון התרבות על פקק. לאחר מכן מוסיפים את הזבובים לכלוב, דרך פקק המשפך, לפני חיבור הכלוב עם פקק הבקבוקון התרבותי.
כדי לשנות את האוכל, להעביר את הזבובים לבקבוקון ריק לפני החלפת צלחת מיץ תפוחים עם צלחת חדשה. ואז להעביר את הזבובים מהבקבוקון בחזרה לכלוב. בסוף איסוף הביצים, מעבירים את הזבובים לבקבוקון ריק לפני העברת הזבובים למספר בקבוקונים תרבותיים חדשים.
בשיטת הרדמה צוננת מותאמת זו, הזבובים נשמרים חסרי תנועה על חבילת הקרח, והגאזה הרפואית שסופגת את המים המתמצתים שומרת על הזבובים יבשים ומאפשרת פנוטיפים או טיפול בזבובים המצונן בקלות. בטמפרטורת החדר של 25 מעלות צלזיוס, טמפרטורת פני השטח של חבילת קרח מצוננת וקשה עולה באופן דרמטי, ממינוס 19 מעלות צלזיוס למינוס שתי מעלות צלזיוס, תוך 20 דקות, ומגיעה במהירות לרמה בטוחה עבור זבובים ישנים וגם זבובים שזה עתה בקעו. חימום דיאלקטרי במיקרוגל הוא סוכן מהיר ונוח יותר להריגת זבובים בוגרים בהשוואה לאיתור יתר או להקפאה עמוקה.
בדומה לזבובים מאתרים יתר על כן, זבובים במיקרוגל מרחיבים את כנפיהם בזוויות ישרות מהגוף. בדרך כלל, חיידקים מעופפים שנהרגו על ידי microwaving הם משמעותית קל יותר במשקל מאשר אלה שנהרגו על ידי אתר או הקפאה, אבל החום אינו מעוות את צורת הגוף, ואת פקעות לא הופכים פריך או טורגיד. הקפד לסחוט כמה שיותר מים מתוך גזה לחה ככל האפשר לפני לחיצה עליו על חבילת הקרח, ולוודא כי גזה נצמד קרוב לחבילת הקרח.
חשוב גם לנגב את המים המגובים מהבקבוקון הצונן והריק לפני שתעבירו זבובים לתוך הבקבוקון.
