يمكن أن يكون تحديا لنقل وشل ذباب الفاكهة. باستخدام هذه التقنيات والأدوات، يمكنك جعل نقل الذباب الروتيني وشل الحركة أسهل. المواد اللازمة لجعل هذه الأدوات غير مكلفة وسهلة للحصول عليها.
يمكن للاستشارات والتدريس أو مختبر البحوث جعلها بكل سهولة. قبل البدء في هذا الإجراء، استخدم الحديد الكهربائي لصنع ثقب في مراكز اثنين من المقابس الاسفنج التي هي أكبر من القطر الداخلي للقنينات التي سيتم استخدامها لنقل الذباب. بعد ذلك ، استخدم سكينًا حادًا لقطع طرف ميكروبيت واحد من ملليمتر واحد بشكل مستعرض في النصف وقطع 1.5 سنتيمتر من طرف ميكروبليت ثاني من ملليمتر واحد.
الغراء قطعة من اثنين من نصائح ماصة جنبا إلى جنب مع لاصق لجميع الأغراض. ثم أدخل طرف micropipette الممدود في قابس إسفنج واحد ، وأدخل قمعًا في قابس الإسفنج الآخر ، وقم بغطاء نصائح الماصات مع أنابيب ميكروسيرتر الفردية 100 microcentuge. لإعداد إبر microdissection ، حدد دبابيس الحشرات التي تتطابق مع أقطار عبوات الرصاص من أقلام الرصاص الميكانيكية المريحة ، واستخدام زوج من كماشة لقطع أطراف العين الواحدة من الدبابيس.
ثم ملف التخفيضات شقة، واستبدال الرصاص في أقلام الرصاص مع دبابيس المعدلة. لإعداد حالة جمع البيض Drosophila، استخدم قاطعًا صغيرًا لقطع زجاجة مشروب ية ناعمة من البلاستيك 500 ملليلتر حوالي 2/3 أسفل الزجاجة، واستخدم الشريط لتأمين شريط من ورق الورق حول لوحة عصير التفاح قطرها 60 ملليمترًا. لنقل الذباب البالغ بين القنينات، تحقق بعناية من جذع القمع في سدادة القمع وطرف الماصات في سدادة الطرف.
اضغط لأسفل الذباب في القارورة الأولى، واستبدل المكونات مع سدادة تلميح. قم بتوصيل القارورة الثانية مع سدادة قمع، ووضع القارورة الأولى على القارورة الثانية بحيث يتم إدراج نهاية طرف الماصات في سدادة التلميح في فتح القمع من سدادة القمع. تدق حافة القارورة الأولى للسماح للذباب أن تنزلق من طرف ماصة ومن خلال جذع القمع في القارورة الثانية.
إذا كان أي طعام قديم في القارورة الأولى يصبح أقل إحكاما ويسقط عندما يتم عكس القارورة، عكس القارورة الثانية على القارورة الأولى، والسماح للذباب الزحف إلى القارورة الثانية. عند نقل العدد المطلوب من الذباب، قم بفصل سدادة التلميح عن سدادة القمع، واستبدل سدادة التلميح بالمكونات الأصلية. ثم استبدل سدادة القمع في القارورة الثانية بمكونات مناسبة.
لزلال ذبابة الفاكهة الكبار عن طريق تقشعر لها الأبدان، وضع حزمة الجليد refreezable، التي تم تبريدها في ناقص 80 درجة مئوية لمدة 24 ساعة على الأقل، في درجة حرارة الغرفة، وبرد قارورة فارغة في الجليد سحقت. بعد 20 دقيقة ، ترطب قليلا قطعة من الشاش الطبي غير العقيم ، وهذا هو أصغر قليلا من حزمة الجليد المبردة ، مع المياه الجارية. ضع الشاش على سطح حزمة الثلج بحيث يتشبث الشاش بشكل وثيق على سطح العبوة.
بعد ذلك استخدام قطعة من الورق الماص لمسح الماء من القارورة المبردة الفارغة، ونقل الذباب الكبار التي تحتاج إلى أن تكون مشلولة في القارورة. عندما تم نقل كل من الذباب، وتغطية القارورة المبردة، وضرب القارورة ضد الجليد سحقت مرتين إلى ثلاث مرات للاستفادة من كل من الذباب إلى الجزء السفلي من القارورة. الذباب سيصبح على الفور غير مُشلّ.
ضع القارورة مرة أخرى على الجليد لمدة دقيقة واحدة قبل صب الذباب على الشاش الذي يغطي حزمة الثلج. ثم استخدم فرشاة الطلاء لنشر الذباب المتداخل. لفحص الذباب المُشلّم تحت مجهر ستيريو، قم بإزالة مقاطع المسرح من المجهر التشريحي، وتغطي المرحلة بقطعة من الأفلام البلاستيكية.
ضع حزمة الثلج على المسرح، ودرّر مصدر الضوء البارد للمجهر كما هو متاح. ثم ركز على المجهر ستيريو، ونقل حزمة الجليد حتى يمكن رؤية الذباب المبرد بوضوح. بعد عرض الذباب، نقل كل ذبابة، من قبل الجناح، إلى قارورة ثقافة جديدة.
للتضحية بالموجات الدقيقة يطير الكبار للعد أو الفرز أو التخلص ، قم بنقل الذباب البالغ الذي يهمك إلى قارورة فارغة ، وتغطية القارورة بطبق بيتري. بعد ذلك عكس القارورة داخل الميكروويف، وتسخين القارورة في درجة الحرارة القياسية لمدة 80 ثانية. الذباب الميت سيسقط في طبق (بيتري)
ارتداء قفازات عمل واقية، صب الذباب على بطاقة بيضاء، ورقة، ونقل البطاقة تحت مجهر ستيريو لفحص و / أو العد مع الإبر microdissection أعدت سابقا. يمكن التخلص من الذباب في نهاية الفحص. لنقل قفص جمع البيض على شكل زجاجة، أدخل زجاجة قفص جمع البيض المعدلة في لوحة عصير التفاح.
استخدام شريط من فيلم البارافين لختم المشتركة حول العنصرين. المقبل سد القفص مع سدادة قمع، وعكس قارورة الثقافة على سدادة. ثم إضافة الذباب إلى القفص، من خلال سدادة القمع، قبل توصيل القفص مع سدادة قارورة الثقافة.
لتغيير الطعام، قم بنقل الذباب إلى قارورة فارغة قبل استبدال لوحة عصير التفاح بطبق جديد. ثم نقل الذباب من القارورة مرة أخرى إلى القفص. في نهاية جمع البيض، نقل الذباب إلى قارورة فارغة قبل نقل الذباب إلى عدة قارورة ثقافة جديدة.
باستخدام هذه الطريقة المعدلة للتجفيف البرد، يتم الاحتفاظ الذباب غير متحركة على حزمة الجليد، والشاش الطبي الذي يمتص الماء التكثيف يحافظ على الذباب الجاف ويسمح الفينوتيفينغ أو التعامل مع الذباب المبرد بكل سهولة. في درجة حرارة الغرفة من 25 درجة مئوية، ودرجة حرارة سطح حزمة الجليد المبردة، الصلب يزيد بشكل كبير، من ناقص 19 درجة مئوية إلى ناقص درجتين مئويتين، في غضون 20 دقيقة، والوصول بسرعة إلى الهضبة التي هي آمنة لكلا الذباب القديم والذات حديثا. التدفئة الميكروويف عازلة هو أسرع وأكثر ملاءمة وكيل لقتل الذباب الكبار بالمقارنة مع الإفراط في الإيثيرينغ أو التجميد العميق.
على غرار الذباب الأثيري المفرط ، يمتد الذباب الميكروكروي بجناحيه في زوايا قائمة من الجسم. عموما ، ذبيحة الذباب التي قتلت بواسطة microwaving هي أخف بكثير في الوزن من تلك التي قتلت بسبب الأثير أو تجميد ، ولكن الحرارة لا تشوه شكل الجسم ، والجثث لا تصبح هش أو turgid. تأكد من الضغط على أكبر قدر من الماء من الشاش الرطب قدر الإمكان قبل الضغط عليه على حزمة الثلج ، والتأكد من أن الشاش يتشبث بشكل وثيق بحزمة الثلج.
من المهم أيضاً مسح الماء المكثف من القارورة المبردة الفارغة قبل نقل الذباب إلى القارورة.
