שיטה זו יכולה לשמש לשחזור האירועים הדלקתיים המתרחשים בדלקת לבלב מרה חריפה. ניתן ללמוד שינויים ברקמת הלבלב בשלביה המוקדמים, אשר בדרך כלל לא אפשרי במרפאה. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם כי זה מהיר וקל להתרבות עבור חוקר מאומן, והוא מציע תוצאות דומות דלקת לבלב חריפה בבני אדם.
השיטה יכולה לשמש לחקר תגובות חיסוניות פרמקולוגיות של מולקולות סמים והתערבויות טיפוליות אחרות, שכן היא מאפשרת לחקור תאים דלקתיים בתיווך בלבלב ובאיברים סמוכים. בעת ניסיון פרוטוקול זה, איתור האיברים והקמת אזור cannulation הוא חיוני. לשנן את המיקום של האיברים ולתרגל את יישום ההזרקה הראשון באמצעות פתרון צבעוני כגון מתילן כחול.
לאחר בדיקת עומק ההרדמה עם צביטת בוהן, לנקות את אזור הבטן של עכבר מורדם עם פתרון יוד פובידון 5%. באמצעות גוזם, להסיר שיער בין החזה והבטן התחתונה ולנקות אזור כירורגי של כשני סנטימטרים רבועים עם 70% אלכוהול. לשתק את החיה על הלוח הכירורגי ולהשתמש במספריים כדי לחתוך חמישה מילימטרים של העור אופקית על החלק העליון של הבטן וסנטימטר אחד מתחת לתהליך xiphoid.
חזור על החתך על הצפק כדי לבצע את לפרוסטומיה עם חשיפה מינימלית של החלל. באמצעות מפסק, למשוך את הכבד לכיוון הראש בערך סנטימטר אחד מן המעי ולאתר את האזור של הלבלב ואת התריסריון. באמצעות מלקחיים, להרים את הכבד לכיוון ראש החיה.
על ידי משיכה עדינה של החלק של המעי הדק, לתקן את שני הקצוות לרוחב עם תפיר פוליפרופילן 6-0 לתצוגה טובה יותר של החלק הדיסטלי של צינור המרה המשותף מדי. באמצעות קליפ כלי מיקרו, לאכום את צינור המרה המשותף הפרוקסימלי באופן זמני. לחשוף את האיבר מתוך חלל הבטן.
ואז לעשות חסם זמני של צינור המרה המשותף דיסטלי עם 8-0 תפר. כדי לגשת לצינור המרה המשותף, לנקב את אזור periampullary, אשר מופיע כחלק לבנבן של קיר המעי הדק. עם מחט 0.4 מילימטר מחובר צינור פוליאתילן 0.54 מ"מ, להתחיל את משאבת עירוי עבור 2.5% נתרן taurocholate פתרון עירוי במהירות קבועה של 10 microliters לכל 10 גרם של משקל הגוף במשך שלוש דקות.
לאחר עירוי, להסיר את קליפ כלי מיקרו, זמני 8-0 תפיל, ומחט ההזרקה מצינור מרת הלבלב. לתפירת הבטן עם 6-0 פוליפרופילן מונו-פסורנטי. הזמן בין לפרוסטומיה לתפר הסופי לא צריך להיות יותר מ -30 דקות.
לאחר הניתוח, לשכן את בעלי החיים בקופסאות פוליאתילן מרופדים שבבי עץ ומים ומזון ad libitum. החזק בעדינות את החיה עם העור משך לאחור, קידום בלייה קלה של גלגל העין, ומקם את החיה עם העין פונה כלפי מעלה. להחדיר טיפה של משחת עיניים המכילה הרדמה מקומית בעין החיה.
מקם את קצה צינור נימי בפינה המשיונית של העין והכנס אותו בעדינות מתחת לגלגל העין בזווית של כ 30 עד 45 מעלות. סובב את הצינור הנימי עד שזרימת הדם תתחיל. לאחר שהאוסף נגמר, ודא הומאוסטזיס על ידי שמירה על העפעפיים סגורים עם דחיסת אור.
מאוחר יותר, באמצעות מחט 27 מד, להזריק ארבעה מיליליטר של PBS קר קרח לתוך חלל הצפק של העכבר. לאחר ההזרקה, לעסות בעדינות את הצפק במשך 10 שניות כדי להסיר תאים דבקים. באמצעות מספריים ופינצטה, לעשות חתך קטן של 0.5 ס"מ על העור הפנימי והשרירים כדי לחשוף את חלל הבטן.
הכנס פיפטה נורה בצפק ולאסוף נוזלים רבים ככל האפשר, דואג לא לשאוף רקמת שומן. לאסוף חלק מהלבלב מאזור הראש לעיבוד נוסף. להפקיד את הנוזל שנאסף לתוך צינורות נשמר על קרח.
ואז צנטריפוגה נוזל הצפק ב 250 פעמים G במשך חמש דקות ומלא את supernatant עבור מינון interleukin-6. כדי להשיג סרום, צנטריפוגה דגימות הדם שנאספו ב 700 פעמים G במשך 15 דקות ולמלא את supernatant עבור עמילאז ואינטרלוקין-6 מינון. ניתוח של רקמת הלבלב 12 שעות לאחר אינדוקציה של דלקת לבלב חריפה הראה דלקת אינטנסיבית באיבר המושפע בהשוואה לדגימות רקמה מקבוצת הזיוף.
תוצאות דומות יוצגו על ידי בדיקה היסטולוגית לאחר הכתמת אאוזין המטוקסילין של דגימות רקמה מ מזויף ו APTA. ניתוח של סרום דם הציג עלייה משמעותית עמילאז בסרום וריכוז ציטוקינים אינטרלוקין-6 בקבוצת AP בהשוואה לקבוצת הזיוף. יחד עם זאת, ריכוז interleukin-6 היה גבוה באופן משמעותי בנוזל חלל הצפק בקבוצת AP.
חומרת דלקת הלבלב במודל זה תלויה באופן יחסי בריכוז, בנפח ובלחץ של העירוי, ובזמן האינדוקציה החריפה של דלקת הלבלב. בעזרת טכניקה זו, ניתן ללמוד את ההשפעות של שטיפת צפק מתמשכת על דלקת לבלב חריפה חמורה.
