הקלטות אלקטרוג בעכברים מונערים באמצעות הפניה II

המשמעות של הפרוטוקול שלנו היא כי מדידת אלקטרוקרדיוגרמה יכולה להתבצע ברגישות רבה בעכבר קטן כי כבר מניפולציה גנטית או פרמקולוגית. הפרוטוקול הוא יתרון גם כך שהוא פשוט, מהיר, זול ורגיש. בנוסף, זה יכול להתבצע על עכברים קטנים, אפילו neonates.

אנו מאמינים כי שיטה זו תתרום להבנת אזורים שלא נחקרו של הפרעות קצב באזור הלב וכלי הדם. הדגמת ההליך תהיה טה וונג הא מהמעבדה שלי. התחל על ידי פתיחת תוכנת הניתוח והגדרתה לרכישת נתוני א.ק.ג.

עבור אל הגדרות התקנה וערוץ והגדר את קצב הדגימה ל- 2,000 דוגמאות לשניה. הגדר את הטווח ל-20 מילי-וולט ואת מגבר הקלט ל-200 הרץ של מעבר נמוך. לאחר מכן, עבור אל ניתוח א.ק.ג. והגדרות א.ק.ג. ולאחר מכן בחר עכבר בהגדרות הזיהוי והניתוח המוגדרות מראש.

בלוח Averageing, בחר ל שרשור ומחזורי לב רצופים לאות ממוצע יחיד או לתצוגה ממוצעת ותצוגת טבלה. בחלונית QTc, בחר בשיטת Bazett, המוגדרת כערך תיקון הדובי של מרווח QT. מקם את העכבר בסולם הדיוק והקליט את משקלו.

לאחר הבטחת כי העכבר הוא הרדמה כראוי להכניס אלקטרודות עם מחטי דיקור לתוך השיניים הימנית והשמאלית ואת hindlimb שמאל. ודא כי עומק אלקטרודה ומיקום עקביים לאורך כל הניסויים. חבר את הקצוות האחרים של האלקטרודות על ידי לחיצה עליהם לשלושת מחברי ההצמדה בקצה השני של חוטי העופרת של כבל שלושת המגברים הביולוגיים המובילים והזרק תרופות כשלוש דקות לאחר ההרדמה.

10 דקות לאחר מתן הרדמה, להתחיל להקליט את הא.ק.ג. לאחר השלמת ההקלטה, השתמשו בנתונים של א.ק.ג בין 12 ל-17 דקות לאחר הזרקת הרדמה לניתוח. בסיום, הסר בזהירות את האלקטרודות.

כדי לקבוע אם מדידת א.ק.ג לא פולשנית זו משקפת את השפעת האפנון האוטונומי על מערכת הולכת הלב, עכברי BALB/c רגילים אותגרו עם אגוניסטים ואנטגוניסטים של מערכת העצבים האוטונומית. בהשוואה לשליטה ברכב, קצב הלב עלה באופן משמעותי באטרופין ועכברים שטופלו איזופרנולין ונפלו עם קרבאכול. בנוסף, מרווח QTc עלה באטרופין ו isoprenaline טיפל בעכברים וירידה בעכברים שטופלו קרבכול.

תצוגות תרשים מייצגות ותצוגות ממוצעות של אותות הא.ק.ג באטרופין, קרבכול ועכברים מטופלים ברכב מוצגים כאן. בעת ניסיון פרוטוקול זה, הדבר החשוב ביותר הוא להבטיח כי אלקטרודות א.ק.ג מוכנסים באופן מאובטח לאורך כל הניסוי. בצע מספר ניסויים ראשוניים עד שאותות הא.ק.ג. יציבים ועקביים.

הפרסומים הקודמים שלנו עם עכברים אישרו וריאציות א.ק.ג. שדווחו במחקרים גנטיים בבני אדם, התומכים בתועלת של שיטה זו בתחומים מחקר לב וכלי דם כגון הפרעות קצב.