O significado do nosso protocolo é que a medição do eletrocardiograma pode ser realizada com grande sensibilidade em um pequeno rato que foi manipulado geneticamente ou farmacologicamente. O protocolo é vantajoso, pois é simples, rápido, barato e sensível. Além disso, pode ser realizado em ratos pequenos, até mesmo neonatos.
Acreditamos que esse método contribuiria para a compreensão de regiões inexploradas de arritmia na área cardiovascular. Demonstrando o procedimento será Tae Woong Ha do meu laboratório. Comece abrindo o software de análise e configurando-o para aquisição de dados ECG.
Vá para Configurações de Configuração e Configurações de Canal e defina a Taxa de Amostra para 2.000 amostras por segundo. Defina o alcance para 20 milivolts e o amplificador de entrada para 200 Hertz de baixo passe. Em seguida, vá para análise e configurações de ECG e ECG e escolha mouse nas Configurações de Predetecção e Análise.
No painel Média, opte por concatenar e ciclos cardíacos consecutivos em um único sinal médio ou visualização média e uma visão de tabela. No painel QTc, selecione o método Bazett, que é definido como o valor corrigido da frequência cardíaca do intervalo QT. Coloque o mouse na balança de precisão e regissuse seu peso.
Depois de garantir que o mouse esteja devidamente anestesiado, insira eletrodos com agulhas de acupuntura nos membros dianteiros direito e esquerdo e na retroestadinha esquerda. Certifique-se de que a profundidade e a posição do eletrodo são consistentes durante os experimentos. Conecte as outras extremidades dos eletrodos clicando-as nos três conectores de encaixe na outra extremidade dos fios de chumbo do cabo bio amplificador de três chumbo e injete drogas aproximadamente três minutos após os anestésicos.
10 minutos após a administração de anestésicos, comece a gravar o ECG. Uma vez concluída a gravação, use os dados do ECG de 12 a 17 minutos após a injeção de anestésicos para análise. Quando terminar, remova cuidadosamente os eletrodos.
Para determinar se essa medida não invasiva de ECG reflete a influência da modulação autônoma no sistema de condução cardíaca, os camundongos BALB/c normais foram desafiados com agonistas e antagonistas do sistema nervoso autônomo. Em comparação com o controle do veículo, a frequência cardíaca aumentou significativamente em camundongos tratados com atropina e isoprenalina e caiu com carbachol. Além disso, o intervalo QTc aumentou em camundongos tratados com atropina e isoprenalina e diminuiu em camundongos tratados com carbachol.
As visualizações representativas dos gráficos e a média de visualizações dos sinais de ECG em ratos tratados com atropina, carbachol e veículos são mostradas aqui. Ao tentar este protocolo, o mais importante é garantir que os eletrodos ECG sejam inseridos com segurança durante todo o experimento. Realize vários experimentos preliminares até que os sinais de ECG sejam estáveis e consistentes.
Nossas publicações anteriores com camundongos confirmaram variações de ECG relatadas em estudos genéticos humanos, o que apoia a utilidade desse método em áreas de pesquisa cardiovascular, como a arritmia.