La importancia de nuestro protocolo es que la medición del electrocardiograma se puede realizar con gran sensibilidad en un pequeño ratón que ha sido manipulado genética o farmacológicamente. El protocolo es ventajoso en el que es simple, rápido, barato y sensible. Además, se puede realizar en ratones pequeños, incluso neonatos.
Creemos que este método contribuiría a la comprensión de las regiones inexploradas de arritmia en el área cardiovascular. Demostrar el procedimiento será Tae Woong Ha de mi laboratorio. Comience abriendo el software de análisis y desfinándolo para la adquisición de datos de ECG.
Vaya a Configuración y Configuración de canal y establezca la frecuencia de muestreo en 2.000 muestras por segundo. Ajuste el rango a 20 milivoltios y el amplificador de entrada a 200 Hertz de paso bajo. A continuación, vaya a Análisis de ECG y Configuración de ECG y, a continuación, elija Ratón en el ajuste preestablecido de configuración de detección y análisis.
En el panel Promedio, elija concatenar y ciclos cardíacos consecutivos en una sola señal media o vista de promediación y una vista de tabla. En el panel QTc, seleccione el método Bazett, que se define como el valor corregido de frecuencia cardíaca del intervalo QT. Coloque el ratón en la escala de precisión y registre su peso.
Después de asegurarse de que el ratón está correctamente anestesiado insertar electrodos con agujas de acupuntura en las extremidades delanteras derecha e izquierda y la extremidad posterior izquierda. Asegúrese de que la profundidad y la posición del electrodo sean consistentes a lo largo de los experimentos. Conecte los otros extremos de los electrodos haciendo clic en los tres conectores de presión en el otro extremo de los cables de plomo del cable bioamplificador de tres cables e inyecte medicamentos aproximadamente tres minutos después de los anestésicos.
10 minutos después de administrar los anestésicos, comience a registrar el ECG. Una vez completada la grabación, utilice los datos del ECG de 12 a 17 minutos después de la inyección de anestésicos para su análisis. Cuando haya terminado, retire cuidadosamente los electrodos.
Para determinar si esta medición de ECG no invasiva refleja la influencia de la modulación autonómica en el sistema de conducción cardíaca, los ratones BALB/c normales fueron desafiados con agonistas y antagonistas del sistema nervioso autónomo. En comparación con el control del vehículo, la frecuencia cardíaca aumentó significativamente en ratones tratados con atropina e isoprenalina y cayó con carbachol. Además, el intervalo QTc aumentó en ratones tratados con atropina e isoprenalina y disminuyó en ratones tratados con carbachol.
Aquí se muestran vistas representativas de las gráficas y vistas promediadas de las señales de ECG en atropina, carbachol y ratones tratados con vehículos. Al intentar este protocolo, lo más importante es asegurarse de que los electrodos ECG se insertan de forma segura durante todo el experimento. Realice múltiples experimentos preliminares hasta que las señales de ECG sean estables y consistentes.
Nuestras publicaciones anteriores con ratones confirmaron variaciones de ECG que se habían reportado en estudios genéticos humanos, lo que apoya la utilidad de este método en áreas de investigación cardiovascular como la arritmia.
