הפרוטוקול יסייע לספק גישה שלב אחר שלב להליך המסוכן של השתלת לבלב במודלים חזיריים. הטכניקה עוקבת כמעט אחר אותם צעדים שנצפו בבני אדם, ולכן, היא המודל הקרוב ביותר האפשרי לשכפול בפרקטיקה הקלינית. המבנים הקרביים החזיריים וכלי הדם שבירים ביותר בהשוואה לבני אדם.
ולכן, זה מספק את האתגר הגדול ביותר עבור כל מי שעושה את הניתוח בפעם הראשונה. התחל על ידי ביצוע חתך קו אמצע מן xiphisternum כדי symphysis pubis באמצעות מצב חיתוך טהור של electrocautery של Bovie. הקפד לשמור לרוחב השופכה בחלק התחתון של החתך מעבר לפאלוס כדי למנוע פציעה.
הניחו את משענת דופן הבטן התומכת בעצמה כדי למנוע פגיעה בטחול ובכבד, כדי לייעל את החשיפה לשדה הניתוחי. כדי לגייס את ראש הלבלב, לספק מתיחה נגדית לחריץ הלבלב בעזרת העוזר. לנתח לאורך מישור הפאשיאלי avascular בין האונה התריסריון של parenchyma הלבלב ב IVC infrahepatic.
התחל את גיוס טבעת הלבלב על ידי חתך לאורך הפאשיה בכל היבט של וריד הפורטל כדי להבטיח ניוד מלא של האונה המחברת מווריד השער שמעליו. הדרך הבטוחה ביותר היא להתחיל לנתח לאורך כל צד של וריד הפורטל ולהפריד את הרקמות בכיוון השעון או נגד כיוון השעון. לאחר מכן, לזהות את הצומת בין רקמות הלבלב וההורים ולהתחיל לנתח את הזנב מן הווריד הטבורי הבסיסי, להישאר קרוב parenchyma.
מחלקים ומחלקים את היובלים הוורידיים הקטנים לפרנכימה תוך הקפדה שלא לפגוע בווריד הטחול, באמצעות קשרי משי 3-0. עבור גיוס קורפוס הלבלב, לנתח לאורך שכבה דקה של רקמה המפרידה parenchyma מן המעי הגס ואת הבטן, שמירה על ארקייד כלי הדם דק לאורך האזור infrapyloric. לאחר מכן עבור גיוס הלבלב, להפריד את parenchyma מ C loop של הצמד על ידי דיסקציה חדה בחריץ הלבלב duoodenal על ידי מתיחה, המתיחה, שמירה על ארקייד כלי הדם דק לאורך לולאת C של התריסריון.
לאחר מכן, לזהות את צינור הלבלב. קשרו משי 2-0 וחיצקו, שמרו על כשלושה עד חמישה מילימטרים של גדם הצינור על לולאת C התריסריון, והתרחקו מארקייד כלי הדם של התריסריון. השלם את החלק האחרון של הניוד על ידי ניתוח הפרנכימה מהצומת בין האונה המחוברת, התריסריון והמעי הגס משני צדי וריד הפורטל.
חלץ את הדגימה במסה על ידי חלוקת האונה המחברת באספקט הקדמי של וריד הפורטל. החלוקה הפרנכימלית נדרשת כדי לחלץ את הדגימה בגלל מיקומה ההיקפי סביב וריד הפורטל. ודא hemostasis לאורך אזורי דיסקציה ולבדוק את התריסריון עבור כל פציעה וגודש בכלי הדם.
הכן את וריד פורטל השתל ואת קצה אבי העורקים הפרוקסימלי על ידי חיתוך הקצוות עבור אנסטומוזיס. הניחו את השתל המוכן בשקית האיברים עם תמיסת UW על אמבט קרח. קחו ביופסיות מחט ליבה מזנב הלבלב, אחסנו אותן בפורמלין והקפיאו בהצמדה.
לחלץ RNA בשלב מאוחר יותר. תפרו את אתר הביופסיה באמצעות פרולן 6-0 בצורה של שמונה דמויות. התחל את דיסקציה של אבי העורקים על ידי זיהוי השופכן הימני וחתך לאורך הפאשיה, תוך הפרדת השופכן מהכיסוי הרטרופריטוניאלי מעל הווריד הנבוב התחתון.
יש לנתח לאורך הגבול הצידי של אבי העורקים כדי לחשוף אותו משריר הסולאוס הבסיסי. לאחר מכן, לנתח לאורך חריץ interaortocaval כדי להפריד את אבי העורקים מן IVC. להבטיח ניוד נאות של אבי העורקים וה- IVC על ידי ניסוי של מיקום מהדק כלי הדם של סטינסקי.
החלף מיקום עם העוזר הראשון והכן את שדה הניתוח על ידי משיכת לולאות המעי בצד שמאל כדי לחשוף את כלי הדם העיקריים לאנסטומוזיס. הניחו את מהדקי הניסוי על IVC ואבי העורקים כדי להעריך מחדש גיוס נאות של שני כלי הדם לאנסטומוזיס. לאחר הנחת מהדק נשיכת צד כלי הדם ב IVC, לעשות פתח קטן בקיר הקדמי של הכלי ולהרחיב אותו לגודל מתאים גולגולת ו caudally באמצעות מספריים Potts.
לשטוף את לומן עם מלוחים heparinized באמצעות נדן גמיש של צינורית IV. באמצעות פרולן 6-0 מחט כפולה, לעשות תפרים פינה מבפנים החוצה על IVC ו להשתיל וריד פורטל. הדקו את התפר הפינתי והעבירו את אחת המחטים לאורך הדופן האחורית של וריד השתל והמקבל באופן רציף.
לאבטח את הקיר הקדמי מבחוץ - באופן רציף, ולאבטח את הקשר במרכז הקיר הקדמי לאחר שטיפת לומן של אנסטומוזה עם מלוחים heparinized. לאחר מכן הניחו מהדק כלי דם של בולדוג על וריד שער השתל הרחק מהאנסטומוזיס, ושחררו לאט לאט את המהדק הנושך הצידי מה- IVC הנמען. בדוק אם יש מילוי ורידי, וכל דימום גדול מהאנסטומוזה.
לאחר מכן, הניחו את המהדק הנושך על אבי העורקים מבלי לפגוע בענפי המותניים לאורך הקיר האחורי של הכלי. יש להנחות את המרדים להזריק הפרין ומתילפרדניזולון דרך הצנתר הוורידי המרכזי. לעשות פתח על הקיר הקדמי של הכלי, ולהרחיב אותו גולגולת ו caudally, נזהר לא לנתח לאורך דופן הכלי.
לשטוף את לומן עם מלוחים heparinized. ובאמצעות מחט כפולה Prolene 6-0, תפרו את הקצה הפרוקסימלי של אבי העורקים להשתיל לפתח אבי העורקים המקבל ברציפות על ידי טכניקת המצנח. לשטוף את לומן עם מלוחים heparinized לפני קשירת הקשר הסופי על הקיר הקדמי של הכלי.
לפני תחילת reperfusion, לבדוק את השינויים המודינמיים עבור כל נפילה דרסטית BP הממוצע. עקוב אחר BP פולשני דקה לדקה, ובצע טיטרציה מינון של כלי הדם ועומס מראש של נוזל כדי לשמור על ממוצע המטרה BP בין 45 ל -50 מילימטרים של כספית. לאחר מכן לשמור על hemostasis לאחר הסרת מהדק בולדוג מן הווריד על ידי הערכה עבור כל דימום גדול מן parenchyma, אזור paraaortic, ואזור periportal. שחרר את מהדק אבי העורקים ובדוק דימום מהאתר האנסטומוטי העורקי.
אבטחו את נקודות הדימום באמצעות ליגטורות ותפירה המוסטטית. בקשו מהמרדים להזריק בקבוקון של חומצה טרנקסמית דרך הצנתר הוורידי המרכזי. זה חיוני כדי למזער טיפול אגרסיבי של הלבלב במהלך שלב זה של זילוח כדי למנוע בצקת השתל והמטומה.
לאחר שווידאתם שאין פיתול מזנטרי, בודדו לולאה של ג'ג'ונום במרחק של 40 עד 50 סנטימטרים מצומת הדואודנוג'ונל, והביאו אותה קרוב לשתל. Anastomose את התריסריון השתל למקבל jejunum באופן רציף מצד לצד באמצעות תפר polydioxanone 4-0. לאשר hemostasis סביב השתל ובאתרי anastomosis.
לאחר מכן לקחת שלוש ביופסיות מחט ליבה מזנב הלבלב שעה לאחר reperfusion. יש לאחסן בפורמלין, להקפיא ולחלץ RNA מאוחר יותר. תפרו את אתר הביופסיה עם פרולן 6-0 בצורה של שמונה דמויות.
לאחר הערכה עבור מגבים שמורים ואבטחת hemostasis, לתפור את rectus abdominis באופן רציף באמצעות מחט polydioxanone 0, שמירה על קו האמצע התחתון הרחק מן השופכה. יש לסגור את העור באמצעות תפרים רציפים מסוג משי 0. יוצרים תעלה תת עורית על הצוואר, ומאבטחים את הצנתר הוורידי המרכזי על ידי קבורתו מתחת למנהרה ותפירת העור שמעליו במחט חיתוך משי 0-0.
לאחר הבטחת BP ממוצע יציב ומגמת שיפור של רמות pH ולקטט על ניתוח גז הדם, להסיר את הצנתר העורקי ולקשור את כלי הדם כדי להבטיח hemostasis בצוואר. סגרו את העור שמעל העור בתפר משי 0 באופן רציף. קצב הלב הממוצע שעה לאחר הרפרפוזיה היה 135 פעימות לדקה בממוצע, ולחץ הדם הממוצע היה כ-37 מיליליטר כספית.
רמות אלה נשמרו תחת מינון גבוה של עירוי נוראפינפרין שניתן היה לחדד ולהפסיק בכל חמשת המקרים לפני העברת בעל החיים בחזרה למכלאה שלו. רמות הלקטט נוטרו בחדר הניתוח במשך שלוש שעות לאחר הרפרפוזיה. כל חמשת בעלי החיים היו ערניים מבחינה קלינית, והדבר ניכר בתנועה פעילה של הגפיים ובדפוסי הנשימה בתוך חמש עד שש שעות מרגע הרפרפוזיה.
רמות העמילאז, הליפאז בסרום והסרום לקטט דהידרוגנאז לאחר הניתוח נוטרו במשך שלושת הימים הראשונים. בדיקת סבילות לגלוקוז של 120 דקות בוצעה ביום השלישי שלאחר הניתוח. דגימות הדם הוצאו לאחר מכן ועובדו לרמות גלוקוז בשתי דקות, חמש דקות, 10 דקות, 20 דקות 30 דקות, 60 דקות, 90 דקות ו-120 דקות.
טיפול קפדני של ארקייד כלי הדם סביב הלבלב במהלך כריתת הלבלב הוא קריטי. וביצוע שלב זה בזהירות מבטיח אספקת כלי דם טובה לתריסריון בסוף הניתוח, אשר בתורו הוא גורם מפתח להצלחה לאחר כריתת הלבל. טכניקה זו פתחה את האפשרות של זילוח מכונה עם השתלה במודלים חזיריים, והקמת מודלים הישרדותיים.