שיטות לחקר תרומות הרחם לביסוס הריון במודל עכבר לכריתת שחלות

לכן קשה להפריד בין תפקידן של ההשפעות ההורמונליות של הרחם והשחלות על התבססות ההריון מכיוון ששניהם קשורים זה לזה באופן הדוק. אז פרוטוקול זה מאפשר לנו לבחון ישירות את תרומת הרחם. בעוד שחלק מהטכניקות הללו כמו כריתת שחלות הן פולשניות למדי, הן פשוטות יחסית לביצוע לאחר תרגול ואימון, מה שהופך אותן למתאימות לחוקרים חדשים במודלים של עכברים.

לכן ניתן להשתמש בשיטה זו כדי להבין את הוויסות הרחב יותר של ציר HPG שכן הן השחלות והן הרחם ממלאים תפקיד חשוב בוויסות ציר זה. אם מעולם לא ביצעת טכניקות אלה בעבר, התייעץ עם הצוות הווטרינרי של המכון שלך לקבלת הדרכה ותמיכה. כדי להתחיל, יש למרוח חומר סיכה לעיניים בנדיבות על עכבר מורדם על ידי טפיחה עדינה על העין לאחר גילוח אזור קטן בשקע מתחת לתחושת עמוד השדרה.

להזריק 0.1 מיליליטר של carprofen תת עורית לתוך קשקוש הצוואר. בדוק אם בעל החיים מורדם על ידי צביטת הבוהן האחורית שלו ובדיקת רפלקס. לאחר מכן, להחיל Betadine על אתר הניתוח.

לאחר מכן לכסות אותו עם drape כירורגי. בעזרת מלקחיים עם שיני חולדה, משכו את העור בבטן כלפי מעלה, ובצעו חתך אורכי של חמישה מילימטרים. לאחר מכן, באמצעות מלקחיים קהים, נתחו את העור הרחק משכבת השריר שמתחתיה לצד אחד לכיוון הכליה.

זהה את כרית השומן בכליות, בשחלות ובשחלות דרך דופן השריר. תפוס והרים את שכבת השריר עם המלקחיים. לאחר מכן, באמצעות מספריים, לבצע חתך באורך 0.5 עד 1 סנטימטר, ולמשוך את כרית השחלה דרך החתך עם זוג מלקחיים קהה.

לאחר מכן, באמצעות מחזיק מחט מעוקל, מהדקים מתחת לשחלה ואת oviduct בקצה הדיסטלי של קרן הרחם ואת הבלו עם מספריים. לאחר 30 שניות, להסיר את המהדק לטפוח עם גזה סטרילית. כדי לסגור את החתך בדופן השריר, הרימו את החלק העליון של החתך באמצעות מלקחיים.

לאחר מכן קשרו את החתך עם קשר מנתח באמצעות תפרי משי. באופן מקומי להחיל כמה טיפות של bupivacaine באמצעות מזרק של מיליליטר אחד ללא חיבור מחט, ולטפוח את עודף עם גזה סטרילית. לאחר ביצוע דומה של כריתת השחלה בצד השני, סגור את חתך העור על ידי לחיצה על שני צידי העור יחד ומריחת כמה קליפסים כירורגיים של שבעה מילימטר, מה שמשאיר מקום לנפיחות בפצע.

הניחו את כל הציוד הדרוש על רדיד אלומיניום בתוך מכסה מנוע למינרי או בטיחות ביולוגית Class II וחיקרו UV למשך 20 דקות. שטפו את הצינורית הסילסטית ב-100% דסינול והניחו לה להתייבש באוויר בתוך מכסה המנוע. לאחר הייבוש, חתכו את הצינור למקטעים באורך סנטימטר אחד באמצעות אזמל.

לאחר מכן, לסחוט כ 200 מיקרוליטר של חומר איטום לתוך מזרק ללא בוכנה. החליפו את הבוכנה ודחפו החוצה כמות קטנה של חומר איטום. יש למרוח את חומר האיטום על קצה אחד של הצינור, ולהחליק אותו עם אצבע בכפפה.

ולאפשר לחומר האיטום להתייבש למשך הלילה או תחת אור UV למשך 30 דקות במכסה המנוע. לאחר מכן, יוצקים אבקת פרוגסטרון לתוך צלחת פטרי מעוקר. גרפו את האבקה לכדוריות בעזרת מלקחיים.

יש לטפוח על הקצה האטום של הגלולה במורד משטח מכסה המנוע כדי לעבות את האבקה. לאחר מכן אוטמים את הקצה הפתוח עם חומר האיטום. עטפו את צלחת הפטרי המכילה את הכדוריות בנייר כסף כדי להגן עליהן מפני אור.

כ-72 שעות לפני החדרה תת עורית, יש להפעיל את הכדוריות על ידי דגירה שלהן ב-FCS עם פחמים. מי שתדגים הליך זה תהיה ד"ר פיונה קאזינס, מדענית מחקר בתחילת הקריירה ממכון הדסון למחקר רפואי. לאחר מתן זריקות אסטרדיול תת-עוריות לבעלי החיים, יש לתת לבעלי החיים כדורי פרוגסטרון תת-עוריים יומיים לפני ההעשרה.

לפני הניתוח, יש להרדים את העכבר ולבדוק את עומק ההרדמה על ידי בדיקת רפלקס צביטת הבוהן. לאחר מכן הניחו את העכבר במצב נוטה, הרימו את זנבו והכניסו לאט ספקולום של שישה מילימטר לנרתיק. מקם את פלג הגוף התחתון של העכבר בין שתי האצבעות הראשונות של היד הלא דומיננטית.

לאחר מכן, באמצעות האצבע המורה, דחפו בעדינות את הזנב כלפי מעלה כדי לאפשר נגישות נרתיקית טובה יותר. מעבירים 20 מיקרוליטר שמן שומשום לחוד החזרת עוברים לא ניתוחי, ומחדירים את החוד דרך הנרתיק וצוואר הרחם לקרן הרחם. מוציאים לאט את השמן.

לאחר שתסיים, הסר את הספקולום מהנרתיק. במחקר זה, 80% מהעכברים עברו דצידואליזציה מוצלחת, בעוד 20% לא. לכן חשוב לשמור על כל הציוד הכירורגי ואזורי העבודה סטריליים ומטופלים בעת החדרת מכשיר NSAID דרך צוואר הרחם לקרן הרחם של העכבר.

לאחר גרימת דצידואליזציה מלאכותית, ניתן להסיר את חיך הפרוגסטרון כדי לחקות את הווסת ולחקור פירוק רירית הרחם. באמצעות שיטה זו, אנו יכולים לחקור ביולוגיה של הרחם וויסות ללא תלות בהשפעת השחלות. זה ממש מרגש בתחום הפוריות ובריאות האישה בכלל.