טכניקת תפוקה גבוהה בזמן אמת לכימות היווצרות מלכודות חוץ-תאיות של נויטרופילים בנויטרופילים אנושיים

המחקר שלנו מתמקד בנויטרופילים, שהם מגיבים ראשונים חיוניים במערכת החיסון וממלאים תפקיד משמעותי במחלות שונות. במהלך שני העשורים האחרונים, התברר כי נויטרופילים תורמים להתפתחות סרטן, מחלות אוטואימוניות ומצבים דלקתיים אחרים על ידי שיבוש הוויסות החיסוני. זה כולל יצירת מלכודות חוץ-תאיות נויטרופיליות, רשתות, מבנים דמויי רשת המגיבים לדלקת ויכולים להיות ממוקדים לטיפול במחלות אלה.

עם זאת, למרות כמה מולקולות מבטיחות המכוונות לרשתות, בפיתוח עדיין אין טיפול מאושר המשפיע באופן ספציפי על מנגנון זה. ניתן לייחס זאת לפחות חלקית להיעדר שיטת כימות אובייקטיבית, בלתי מוטה, ניתנת לשחזור ובעלת תפוקה גבוהה להיווצרות נטו. הפרוטוקול שלנו משתמש בהדמיית תאים חיים בשני צבעים כדי לנתח התנהגות נויטרופילים באמצעות צבעים חדירים ובלתי חדירים לממברנה למעקב מדויק אחר היווצרות רשת.

שיטה זו מבחינה בין נויטרופילים יוצרי רשת ובריאים בהתבסס על שלמות הממברנה ומספקת התמיינות ברורה של סוגי מוות תאי באמצעות שינויים מורפולוגיים הנבלעים בדימות ניגודיות פאזה. שיטה זו מתגברת על הבעיות של טכניקות שדווחו בעבר לכימות היווצרות נטו ומספקת כימות רשת יעיל, ניתן לשחזור ומדויק באופן אוטומטי. שיטה זו תסייע בפיתוח תרופות ממוקדות נויטרופילים על ידי מתן היכולת לסנן מטרות טיפוליות מרובות נגד היווצרות נטו באופן תפוקה גבוהה.