Technique à haut débit en temps réel pour quantifier la formation de pièges extracellulaires à neutrophiles dans les neutrophiles humains

Nos recherches portent sur les neutrophiles, qui sont des premiers intervenants essentiels du système immunitaire et jouent un rôle important dans diverses maladies. Au cours des deux dernières décennies, il est devenu clair que les neutrophiles contribuent au développement du cancer, des maladies auto-immunes et d’autres affections inflammatoires en perturbant l’immunorégulation. Cela inclut la formation de pièges extracellulaires neutrophiles, de filets, de structures en forme de toile qui répondent à l’inflammation et pourraient être ciblés pour le traitement de ces maladies.

Cependant, malgré certaines molécules prometteuses ciblant les filets, il n’existe toujours pas de thérapie approuvée en cours de développement qui affecte spécifiquement ce mécanisme. Cela est au moins partiellement attribuable à l’absence d’une méthode de quantification objective, non biaisée, reproductible et à haut débit pour la formation de filets. Notre protocole utilise l’imagerie bicolore de cellules vivantes pour analyser le comportement des neutrophiles à l’aide de colorants perméables et imperméables à la membrane pour un suivi précis de la formation de filets.

Cette méthode distingue les neutrophiles formant un réseau et les neutrophiles sains en fonction de l’intégrité de la membrane et permet de différencier clairement les types de mort cellulaire grâce aux changements morphologiques absorbés par l’imagerie à contraste de phase. Cette méthode surmonte les problèmes des techniques précédemment rapportées pour quantifier la formation de filets et fournit une quantification efficace, reproductible et précise du filet de manière automatisée. Cette méthode aidera au développement de médicaments ciblant les neutrophiles en donnant la possibilité de cribler plusieurs cibles thérapeutiques contre la formation de filets à haut débit.