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Immunology and Infection

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实时高通量技术量化人中性粒细胞中性粒细胞胞外陷阱的形成

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我们的研究重点是中性粒细胞,它们是免疫系统中必不可少的第一反应者,在各种疾病中发挥着重要作用。在过去的二十年中,很明显,中性粒细胞通过破坏免疫调节来促进癌症、自身免疫性疾病和其他炎症性疾病的发展。这包括形成中性粒细胞胞外陷阱、网状结构,这些结构对炎症有反应,可以作为这些疾病的靶向治疗。

然而,尽管有一些有前途的分子靶向蚊帐,但在开发中,仍然没有批准的疗法专门影响这种机制。这至少部分归因于缺乏客观、无偏倚、可重现和高通量的净形成定量方法。我们的方案采用双色活细胞成像,使用膜渗透性和不渗透染料分析中性粒细胞行为,以实现精确的网形成跟踪。

该方法根据膜完整性区分净形成中性粒细胞和健康中性粒细胞,并通过相差成像中吸收的形态变化提供细胞死亡类型的明确区分。该方法克服了先前报道的量化净形成技术的问题,并以自动化方式提供了高效、可重复和准确的净定量。这种方法将能够以高通量方式筛选多个治疗靶点以对抗净形成,从而有助于中性粒细胞靶向药物的开发。

我们提出了一种自动化的高通量方法,利用活细胞分析系统与膜通透性依赖性双染料方法相结合,对中性粒细胞胞外陷阱 (NET) 进行定量。

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