인간 호중구에서 호중구 세포외 트랩 형성을 정량화하기 위한 실시간 고처리량 기법

우리의 연구는 면역 체계의 필수 초기 반응자이며 다양한 질병에서 중요한 역할을 하는 호중구에 중점을 둡니다. 지난 20년 동안 호중구가 면역 조절을 방해하여 암, 자가면역 질환 및 기타 염증성 질환의 발병에 기여한다는 것이 분명해졌습니다. 여기에는 염증에 반응하는 호중구성 세포외 트랩, 그물, 거미줄과 같은 구조를 형성하는 것이 포함되며 이러한 질병의 치료 대상이 될 수 있습니다.

그러나, 그물을 표적으로 하는 몇몇 유망한 분자에도 불구하고, 발달에서 특히 이 기계장치에 영향을 미치는 찬성한 치료법은 아직도 없습니다. 이는 적어도 부분적으로는 순 형성을 위한 객관적이고, 편향되지 않고, 재현 가능하고, 처리량이 많은 정량화 방법이 없기 때문입니다. 당사의 프로토콜은 정확한 그물 형성 추적을 위해 막 투과성 및 불투과성 염료를 사용하여 호중구 거동을 분석하기 위해 이중 색상 라이브 셀 이미징을 사용합니다.

이 방법은 막 무결성을 기반으로 그물 형성 호중구와 건강한 호중구를 구별하고 위상차 이미징에 흡수된 형태학적 변화를 통해 세포 사멸 유형을 명확하게 구별합니다. 이 방법은 이전에 보고된 순 형성 정량화 기법의 문제를 극복하고 자동화된 방식으로 효율적이고 재현 가능하며 정확한 순 정량화를 제공합니다. 이 방법은 고처리량 방식으로 순 형성에 대해 여러 치료 표적을 스크리닝할 수 있는 기능을 제공하여 호중구 표적 약물 개발에 도움이 될 것입니다.