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The authors have nothing to disclose.

Registrazione elettrofisiologica da embrioni di Drosophila richiede la manipolazione manuale e dissezione. La salute della preparazione, e la conseguente qualità delle registrazioni, dipende da un solo essere in grado di preparare rapidamente e ordinatamente i tessuti fragili embrionali per la registrazione, e quindi eseguire l&#39;esperimento. Sperimentatori dovranno essere in grado in entrambe le dissezioni embrionale e di patch clamp elettrofisiologia prima di tentare di affrontare entrambi contemporaneamen...

electrophysiological recording in the drosophila embryo

Drosophila è un modello premier genetico per lo studio sia dello sviluppo embrionale e funzionale delle neuroscienze. Tradizionalmente, questi campi sono abbastanza isolati gli uni dagli altri, con storie in gran parte indipendenti e le comunità scientifiche. Tuttavia, l&#39;interfaccia tra questi campi di solito disparati sono i programmi di sviluppo funzionali alla base dell&#39;acquisizione di proprietà elettriche di segnalazione e la differenziazione delle sinapsi chimici funzionali durante le fasi finali della formazione circuito neurale. Questa interfaccia è un&#39;area estremamente importante per le indagini. In Drosophila, queste fasi di sviluppo funzionale si verificano durante un periodo di &lt;8 ore (a 25 ° C) durante l&#39;ultimo terzo di embriogenesi. Questo periodo tardo di sviluppo è stato a lungo considerato intrattabile a causa indagine per la deposizione di un duro, cuticola impermeabile epidermica. Un passo avanti è stato anticipato l&#39;applicazione di acqua-polimerizzazione colla chirurgica che può essere applicata a livello locale per la cuticola per permettere la dissezione controllato di fase avanzata di embrioni. Con una incisione longitudinale dorsale, l&#39;embrione può essere posato piatto, esponendo il cordone ventrale dei nervi e muscolatura della parete del corpo di indagine sperimentale. Whole-cell patch-clamp tecniche possono essere impiegate per registrare da neuroni individualmente identificabili e muscoli somatici. Queste configurazioni di registrazione sono stati utilizzati per monitorare l&#39;aspetto e la maturazione delle correnti ioniche e propagazione del potenziale d&#39;azione sia in neuroni e muscoli. Mutanti genetici che influenzano le proprietà elettriche sono stati caratterizzati per rivelare la composizione molecolare dei canali ionici e dei relativi complessi di segnalazione, e per iniziare l&#39;esplorazione dei meccanismi molecolari del differenziamento funzionale. Un focus particolare è stato l&#39;assemblaggio delle connessioni sinaptiche, sia nel sistema nervoso centrale e la periferia. Il glutamatergici giunzione neuromuscolare (NMJ) è più accessibile ad una combinazione di imaging ottico e la registrazione elettrofisiologica. Un elettrodo di vetro di aspirazione è usato per stimolare il nervo periferico, con eccitatorio giunzione corrente (EJC), le registrazioni effettuate nella tensione muscolare bloccato. Questa configurazione di registrazione è stato utilizzato per tracciare la differenziazione funzionale della sinapsi, e traccia l&#39;aspetto e la maturazione di proprietà presinaptico rilascio di glutammato. Inoltre, le proprietà postsinaptici possono essere analizzati in maniera indipendente tramite iontoforesi o applicazione di una pressione di glutammato direttamente sulla superficie del muscolo, per misurare la comparsa e la maturazione dei campi recettori del glutammato. Così, sia gli elementi pre-e post-sinaptici possono essere monitorate separatamente o in combinazione durante la sinaptogenesi embrionale. Questo sistema è stato molto utilizzato per isolare e caratterizzare mutanti genetici che impedire la formazione embrionale sinapsi, e quindi svelare i meccanismi molecolari che regolano la specificazione e differenziazione delle connessioni di sinapsi e funzionali, le proprietà di segnalazione sinaptica.

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Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

Le registrazioni elettrofisiologiche da<em&gt; Drosophila</em&gt; Embrioni consentire analisi di sviluppo muscolare e le proprietà elettriche dei neuroni, così come la caratterizzazione di sinaptogenesi funzionali a livello della giunzione neuromuscolare glutammatergica e centrale colinergici e GABAergici sinapsi.

Registrazione elettrofisiologiche in Drosophila Embryo

Drosophila is a premier genetic model for the study of both embryonic development and functional neuroscience. Traditionally, these fields are quite ...

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Research

JoVE Journal

Biology

Electrophysiological Recording in the Drosophila Embryo

11.4K Views.  University of Illinois. Le registrazioni elettrofisiologiche da Drosophila Embrioni consentire analisi di sviluppo muscolare e le proprietà elettriche dei neuroni, così come la caratterizzazione di sinaptogenesi funzionali a livello della giunzione neuromuscolare glutammatergica e centrale colinergici e GABAergici sinapsi.