<p class="jove_content"> Questo lavoro è stato finanziato dal Fonds de Recherche sur la Nature et les Technologies de Quebec, in Canada la Fondazione per l&#39;Innovazione e la Canadian Institutes of Health Research (CIHR). </p>

<p class="jove_title"> 1. Microfabbricazione della testa della sonda (processo non mostrato nel video) </p><ol><li> A Si <sup>2</sup> wafer, quattro pollici di diametro, 525 micron di spessore, con uno strato di 1 micron di spessore SiO2 termico è spincoated con photoresist (PR) per 45 s a 4000 giri. </li><li> Il wafer è precotti a 110C per 50 s, ed esposta attraverso una maschera con tutti gli elementi (porte e microcanali) per 5 s, sviluppato e sciacquato con DI. </li><li> La scoperta è inciso SiO2 via in una tamponata 01:07 acido fluoridrico (BHF) una soluzione ≈ 15 min (dewetting del substrato in cui SiO2 è stato inciso indica il completamento della etch). Un plasma O2 o acetone viene utilizzato in cenere o nastri il restante PR. </li><li> Un secondo strato PR è spin-rivestito a 1500 rpm per 45 s, ottenendo un overlayer spessore di ≈ 10 micron [31]. Il modello SiO2 sotto questo strato di PR è ancora visibile e viene utilizzato per allineare il wafer con una seconda maschera con le uniche porte. </li><li> Dopo l&#39;esposizione e lo sviluppo del PR, il wafer viene sciacquato, asciugato e postbaked a 95C per 20 min. </li><li> Il wafer di silicio è fissato su un wafer di supporto con fuso cera bianca per proteggere il mandrino. </li><li> Un plasma ad accoppiamento induttivo (ICP) DRIE è utilizzato per trasferire il PR ed embedded SiO2 modelli in topografia wafer in un processo in tre fasi: <ol><li> DRIE fare ≈ 500μmdeep porte in Si (modello definita dalla spessa PR). </li><li> Senza scaricare il wafer dalla macchina DRIE, il PR è incenerito con un plasma. </li><li> Il modello esposto SiO2 agisce come maschera per un secondo processo a secco etch, la creazione di 50 canali micron profondo, e aprendo il ripieno e le porte di ventilazione attraverso il wafer. Dopo lo scarico, il wafer supporto è staccata sotto un getto di acqua calda. Il wafer microlavorati viene pulito con acetone, etanolo e DI. </li></ol></li><li> Singoli chip MFP sono a dadini. </li><li> Un blocco di interfaccia PDMS è fabbricata la fusione in uno micromould composto da due strutturato poli (metilmetacrilato) (PMMA) elementi, una piastra in acciaio lucido che formano la parte inferiore, e due capillari (ciascuno inserito in una delle due vias accesso buchi nel lamiera di acciaio) che serve come segnaposto per i fori di collegamento fluidica. Il PDMS è curato in forno a 60 ° C per almeno 1 h. </li><li> Il blocco PDMS è legato ad un dadini chip di silicio MFP, attivando entrambe le parti in aria plasma a 1 mbar per 24 s a 230W, e unendo le due cose insieme con un home-made aiuto per l&#39;allineamento meccanico. </li><li> L&#39;assemblea è lasciato al bond in un forno a 60 ° C per un minimo di 1 ora </li></ol><p class="jove_title"> 2. Assemblea della MFP </p><ol><li> Tenuta di gas siringhe di vetro sono riempiti con i reagenti appropriati con siringhe e aghi di plastica per garantire che non siano presenti bolle d&#39;aria. Tipicamente, si usa una siringa da 1 -10 microlitro per iniezione, e una siringa con un volume di 5-10 volte più grande per l&#39;aspirazione. </li><li> Le siringhe sono collegati a tubi capillari utilizzando raccordi Nanotight a basso volume morto. </li><li> Capillari sono riempiti e controllati per bolle sotto il microscopio. </li><li> Il chip MFP è pre-riempite con soluzione tampone per evitare cattura di bolla quando si collegano i capillari. </li><li> I capillari sono collegati al raccordo PDMS nella testa della sonda </li></ol><p class="jove_title"> 3. Set-up della MFP </p><ol><li> La testa della sonda è bloccato nel supporto sonda e montato sulla sonda stazione in cima ad un microscopio invertito </li><li> Le siringhe sono posti in alta precisione pompe siringa. </li><li> Il substrato, come ad esempio un vetrino, viene inserito in una porta fatta in casa che viene apposta sul palco microscopio. </li><li> Il parallelismo della mesa del MFP e il substrato è regolato con un paio di goniometri osservando gli anelli di Newton (frange di interferenza) che appaiono quando la stampante MFP è portato a contatto con il substrato. Il punto di contatto e la frequenza degli anelli servono come indicazione del tilt. Quando la stampante MFP è allineato con la superficie, un anello di interferenza singolo si estende su tutta la superficie. Questa misura serve anche per calibrare la separazione tra MFP e substrato. </li><li> Il divario tra il MFP e il substrato è un fattore critico per i processi di patterning superficie. Perché il substrato è elaborato dalla scansione al di sotto del MFP, l&#39;allineamento orizzontale deve essere regolato con precisione micrometrica ed è realizzato utilizzando un supporto a tre punti formato da tre viti micrometriche. </li></ol><p class="jove_title"> 4. Funzionamento del MFP </p><ol><li> Erogazione è controllata via software LabView. Funzionamento del dispositivo viene visualizzato ad occhio e utilizzando una telecamera CCD. L&#39;iniezione: rapporto aspirazione varia 1:03-1:10, a seconda della diffusività del reagente con il tampone circostante e il modello desiderato flusso geometrico. </li><li> Per controllare il corretto funzionamento della siringa di aspirazione e la presenza di bolle, prima iniettare liquido con la siringa di aspirazione prima di iniziare l&#39;aspirazione corretta.</li><li> Inizio iniezione di liquido e il flusso di monitorare e confinamento di perline o di colorante tracciante fluorescente. </li><li> Utilizzare la sonda per la particolare applicazione, cioè la scansione attraverso la superficie per la lavorazione per la deposizione, di attacco o macchie di superficie o di cellule. </li></ol>

<ol>
	<li>Juncker, D., Schmid, H., Delamarche, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> <em style='font-style: italic'>Nature Materials</em>. <b>4</b> (8), 622-622 (2005).</li></ol>

<p class="jove_content"> La sonda microfluidica (MFP) è versatile perché è (i) mobili, (ii) adattabile per essere utilizzato con diversi tipi di reagenti e di substrato e può (iii) essere utilizzato su grandi aree. </p><p class="jove_content"> Bolle indesiderate può portare alla interruzione del flusso per evitare bolle, tutti i componenti devono essere pieni di liquidi prima del montaggio. Il divario tra la sonda e la superficie è solo di pochi micrometri, ma il mesa è diverse centinaia di micron di larghezza, e distanze nel range di ce...

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		<div>
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		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>microfluidic connectors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Upchurch Scientific</td>
<td>Micro- and Nano-tight fittings and sleeves</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>2-component manual dispenser</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Conprotec Inc.</td>
<td>DM400</td>
<td>To dispense and mix PDMS mixture</td>
</tr>
<tr>
<td>LabVIEW</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>National Instruments</td>
<td>Version 8.0</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Mechanical Convection Oven</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR</td>
<td>1330FM</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Glass syringes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hamilton</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Capillary tubing</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Polymicro Technologies</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plasma Chamber</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tegal Corporation</td>
<td>Plasmaline 415</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Inverted Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nikon</td>
<td>TE2000-E</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Syringe pumps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cetoni</td>
<td>neMESYS</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sylgard 184</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ellsworth Adhesives</td>
<td>184 Sil Elast Kit</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Camera</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Photometrics</td>
<td>QuantEM 512SC</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microscope stage</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Microfluidic probe holder goniometers</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Melles-Griot</td>
<td>07GON504</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Linear stage</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Applied Scientific Instrumentation</td>
<td>LS-50</td>
<td>For z-control of the MFP</td>
</tr>
<tr>
<td>Manual linear stage</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Newport</td>
<td>443-4 Series</td>
<td>For x- and y- axis control of the MFP</td>
</tr>
<tr>
<td>Microscope stage</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Applied Scientific Instrumentation</td>
<td>PZ-2000</td>
<td>With x-, y- and z- control</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
	

the microfluidic probe: operation and use for localized surface processing

<p class="jove_content"> Dispositivi microfluidici permettono test deve essere eseguito utilizzando piccole quantità di campione e sono stati recentemente utilizzati per controllare il microambiente delle cellule. Microfluidica è comunemente associato con microcanali chiuse che limitano il loro uso per campioni che possono essere introdotte, e colto nel caso delle cellule, all&#39;interno di un volume confinato. D&#39;altra parte, micropipetting sistema sono stati utilizzati per perfusione a livello locale le cellule e le superfici, in particolare con push-pull configurazioni in cui si agisce pipetta come sorgente e l&#39;altra come affondare, ma il confinamento del flusso è difficile in tre dimensioni. Inoltre, pipette sono fragili e difficili da posizione e, quindi, sono utilizzati in configurazione statica solo. </p><p class="jove_content"> La microfluidica sonda (MFP) elude i vincoli imposti dalla costruzione di chiuse e canali microfluidica invece che racchiude il campione nel sistema microfluidica, il flusso microfluidica può essere consegnato direttamente sul campione, e la scansione attraverso il campione, usando la MFP. . L&#39;iniezione e aperture di aspirazione si trovano a poche decine di micrometri l&#39;uno dall&#39;altro in modo che un microjet iniettato il divario è confinato dalle forze idrodinamiche del liquido circostante e interamente aspirato nuovamente dentro l&#39;altra apertura. La microjet può essere lavato tutta la superficie del substrato e fornisce uno strumento preciso per la deposizione localizzata / fornitura di reagenti che possono essere utilizzate su vaste aree mediante la scansione di sonda su tutta la superficie. In questo video vi presentiamo la microfluidica sonda <sup>1</sup> (MFP). Vi spieghiamo in dettaglio come assemblare il MFP, montarlo in cima a un microscopio invertito, e allinearlo rispetto alla superficie del substrato e, infine, mostrano come usarlo per elaborare una superficie substrato immerso in un buffer. </p>

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The Microfluidic Probe: Operation and Use for Localized Surface Processing

<p class="jove_content">In questo video vi presentiamo la sonda microfluidica<sup&gt; 1</sup&gt; (MFP). Vi spieghiamo in dettaglio come assemblare il MFP, montarlo in cima a un microscopio invertito, e allinearlo rispetto alla superficie del substrato e, infine, mostrano come usarlo per elaborare una superficie substrato immerso in una soluzione tampone.</p>

La sonda Microfluidic: funzionamento e utilizzo per l&#39;elaborazione delle superfici localizzate

Microfluidic devices allow assays to be performed using minute amounts of sample and have recently been used to control the microenvironment of cells. ...

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8.8K Views.  McGill University. In questo video vi presentiamo la sonda microfluidica 1 (MFP). Vi spieghiamo in dettaglio come assemblare il MFP, montarlo in cima a un microscopio invertito, e allinearlo rispetto alla superficie del substrato e, infine, mostrano come usarlo per elaborare una superficie substrato immerso in una soluzione tampone.