Protein Extraction from Human Tear Using Schirmer Strip

Inizia tagliando e scartando l'estremità anteriore della striscia di Schirmer contenente le lacrime umane essiccate oltre il segno del millimetro zero. Quindi tagliare la striscia a intervalli di un millimetro e posizionare i pezzi in una provetta da microcentrifuga da 1,5 millilitri. Quindi, aggiungere 100 microlitri di tampone di lisi alla provetta per microcentrifuga.

Agitare a 1000 RPM a temperatura ambiente per un'ora in un termomiscelatore. Dopo una breve centrifugazione, trasferire il surnatante in una nuova provetta da microcentrifuga da 1,5 millilitri. Utilizzando una pinza pulita, spostare le strisce in puntali per pipette da 200 microlitri.

Riposizionare i puntali nella stessa provetta da microcentrifuga, quindi centrifugarla per ottenere il massimo recupero del campione. Misurare la concentrazione proteica utilizzando l'acido bicinchoninico o un test proteico compatibile.