Metodi alternativi per la rilevazione della generazione di anioni superossido nelle piastrine

Lo scopo della nostra ricerca è quello di capire come la generazione di specie reattive dell'ossigeno, regoli la funzione piastrinica e moduli la risposta emostatica. Per il nostro lavoro, è essenziale rilevare in modo affidabile la specie reattiva chiave dell'ossigeno, l'anione superossido. La tecnica più comune per rilevare l'anione superossido è la citometria a flusso con DCFDA come sonda fluorescente.

Questi sono i limiti, inducono il rilascio di specie reattive dell'ossigeno portando a dati inaffidabili. Non permette di distinguere, tra le diverse specie reattive dell'ossigeno, e non permette di quantificare le specie reattive dell'ossigeno piastrinico. Questo video presenta due tecniche alternative per la rilevazione di anioni superossido piastrinici.

La prima tecnica utilizza il DHE su piastrine vive per rilevare l'anione superossido con una cinetica rapida e una risoluzione a singola cellula. La seconda tecnica utilizza la sonda di spin, CMH, per quantificare il tasso di generazione di anioni superossido da parte delle piastrine. Nel complesso, le tecniche presentate in questo video offrono vantaggi significativi rispetto alla maggior parte delle tecniche esistenti e rappresentano un significativo progresso negli strumenti sperimentali a nostra disposizione per studiare la regolazione redux-dipendente delle piastrine.