La valutazione emodinamica del cuore durante la perfusione ex situ isolata è scarsamente descritta. Questo protocollo fornisce un metodo per valutare le prestazioni cardiache ex situ in modalità di lavoro. Il nostro approccio confronta la tecnica PV loop invasiva con l'ecocardiografia epicardica per la valutazione funzionale del loro cuore durante la perfusione ex situ isolata.
Questo approccio richiede un'esperienza di team nella perfusione cardiaca ex situ, insieme al coinvolgimento di un cardiologo addestrato per l'ecocardiografia transoesfrontea. Una delle principali preoccupazioni nel trapianto di cuore è il rischio di fallimento primario dell'innesto. Il nostro approccio che utilizza l'ecocardiografia epicardica fornisce una valutazione del cuore prima del trapianto durante la perfusione ex situ.
Questo metodo non invasivo potrebbe essere applicato per iscritto durante la perfusione cardiaca ex situ prima del trapianto. Inizia posizionando quattro suture di polipropilene zero sull'atrio destro e sull'aorta ascendente dell'animale anestetizzato per fissare l'incannulamento con lacci emostatici. Infondere eparina e sezionare attentamente la radice aortica.
Quindi inserire una cannula venosa a doppio stadio nell'atrio destro per la raccolta del sangue e una cannula a lume singolo nell'aorta ascendente per l'infusione di cardioplegia. Dopo aver isolato la vena cava superiore e inferiore, collegare la cannula venosa a una sacca per la raccolta del sangue contenente 10.000 unità di eparina non frazionata. Posizionare il corpo del maialino nella posizione Trendelenberg per migliorare il drenaggio del sangue nella sacca di raccolta.
Procedere all'approvvigionamento cardiaco mantenendo due centimetri del tronco polmonare insieme alla parete posteriore dell'atrio sinistro. Posizionare il cuore in una soluzione salina di quattro gradi Celsius e separare l'aorta ascendente dal tronco polmonare. Verificare che la valvola aortica e l'ostea coronarica non siano feriti.
Inserire quattro punti di polipropilene zero, cinque millimetri sotto la sezione distale dell'aorta ascendente e inserire la cannula di infusione nell'aorta. Stringere un morsetto attorno all'aorta per fissare la cannula. Inserire una cannula di drenaggio nel tronco polmonare e fissarla con una sutura in polipropilene a tre zero.
Chiudere la vena cava inferiore e superiore con cinque suture di polipropilene zero. Chiudere la parete posteriore dell'atrio sinistro con una sutura in polipropilene a quattro zero. Inserire una cannula di ventilazione sinistra attraverso la parete posteriore dell'atrio sinistro e intrappolare un laccio emostatico intorno.
Inserire una cannula precaricata nell'appendice atriale sinistra e intrappolare un laccio emostatico. Ridurre il flusso della pompa a 200 millilitri al minuto. Collegare il cuore al connettore aortico dopo aver disazionato il connettore.
Regolare la pressione aortica a 30 millimetri di mercurio a temperatura ambiente. Durante la rianimazione, eseguire un massaggio cardiaco regolare fino a ripristinare il ritmo sinusale. Aumentare lentamente il flusso della pompa entro 15-25 minuti con passi di 50 millilitri al minuto per ottenere una pressione aortica di 65 millimetri di mercurio.
Allo stesso tempo, aumentare la temperatura profusa con passi da due a quattro gradi Celsius per raggiungere i 37 gradi Celsius. Una volta raggiunta la pressione aortica richiesta e abbondante una temperatura, erogare una scossa elettrica a cinque joule, se necessario, e ripetere fino a ripristinare il ritmo sinusale. Fissare un elettrodo epicardico alla parete posteriore ventricolare destra e collegarlo a un pacemaker esterno.
Quindi collegare la cannula polmonare alla linea del flusso coronarico. Aprire la linea di precarico e regolare il flusso della pompa per garantire un riempimento stabile del serbatoio di precarico. Aprire la linea di postcarico aortica e bloccare la linea principale del circuito utilizzato per la perfusione di Langandorf.
Il serbatoio di postcarico verrà progressivamente riempito. Garantire il drenaggio del serbatoio mediante una linea di troppo pieno che riporta il profuso al serbatoio principale del circuito. Iniziare l'infusione di dobutamina a 0,04 milligrammi al minuto.
Quindi rimuovere lo sfiato. Pulire il catetere di conduttanza a coda di suino francese con soluzione salina e collegarlo all'interfaccia hardware. Spingere delicatamente il catetere nella guaina francese introducer 8 precedentemente inserita attraverso il tetto dell'atrio sinistro per essere allineata con la valvola mitrale.
Interrompere la stimolazione epicardica del cuore per evitare interferenze con il segnale di conduttanza. Registra i dati in uno stato stazionario quando il segnale è stabilizzato. Selezionare una serie di 10 cicli consecutivi e aprire il software di analisi.
Per ottenere la relazione del volume della pressione sistolica finale e della pressione diastolica finale, registrare il segnale durante l'occlusione del precarico. Bloccare gradualmente la linea di profusione atriale fino a quando la riduzione del precarico è efficace. Quindi rilasciare lentamente il morsetto.
Dopo aver posizionato un drappo sterile attorno al cuore, applicare la sonda sulla parete superiore dell'atrio sinistro e ruotare manualmente il trasduttore fino ad ottenere una vista a quattro camere. Quindi eseguire il monitor della sonda a ultrasuoni per ottenere tre e due viste della camera. Per valutare l'MWI procedere all'acquisizione di quattro, tre e due viste della camera e registrare la pressione arteriosa simultanea.
Valuta la deformazione longitudinale globale utilizzando queste viste e il software MWI aperto. Utilizzare la pressione sanguigna invasiva rilevata dal sensore esterno sul circuito di perfusione utilizzando l'acquisizione del loop. Notifica manualmente al software gli orari esatti di apertura e chiusura delle valvole aortica e mitrale.
La valutazione ecocardiografica durante la perfusione in modalità di lavoro è stata eseguita nella configurazione personalizzata. Tutte e tre le viste ventricolari sinistre sono state ottenute in qualsiasi momento in tutti gli esperimenti. La frazione media di eiezione ventricolare sinistra della frazione longitudinale globale e M W I era rispettivamente di circa 40,8% meno 8,0% e 65 millimetri di mercurio.
I parametri emodinamici sono stati valutati mediante catetere di conduttanza o ecocardiografia di superficie durante la perfusione in modalità di lavoro. Durante la perfusione della modalità di lavoro è stata osservata una diminuzione significativa di M W I nel tempo in tutti gli esperimenti. Una diminuzione simile è stata osservata nella gittata cardiaca e in altri parametri relativi alla relazione del volume della pressione sistolica finale.
La sonda ecocardiografica deve essere posizionata sul tetto dell'atrio sinistro. La requisizione stabile di almeno tre-sei cicli miocardici deve essere eseguita correttamente. Una valutazione metabolica del tessuto miocardico e della funzione endoteliale porterebbe a una valutazione complementare dell'innesto cardiaco durante la perfusione cardiaca ex situ per ottimizzare le impostazioni di perfusione.
