Misurazione dei cambiamenti nell'integrità della barriera endoteliale cerebrale con due biosensori basati sull'impedenza in risposta alle cellule tumorali e alle citochine

La nostra ricerca si concentra sulla microvascolarizzazione cerebrale e sulla barriera emato-encefalica. Le cellule endoteliali cerebrali regolano il flusso molecolare nel cervello. Utilizziamo biosensori basati sull'impedenza per valutare l'integrità della barriera nella malattia.

Con analisi concomitanti e molteplici variabili di trattamento, abbiamo già stabilito che diverse linee cellulari tumorali interrompono l'endotelio cerebrale. È importante sottolineare che abbiamo stabilito che questo non è prevalentemente mediato da proteasi o citochine, ma potrebbe invece essere una funzione dei corpi vescicolari correlati al cancro. Stiamo studiando come i tumori metastatici distruggono le cellule endoteliali cerebrali, entrano nel cervello e formano tumori secondari.

Utilizzando biosensori basati sull'impedenza, esploriamo questa interazione per comprendere la compromissione della vascolarizzazione cerebrale e la malattia. Il nostro obiettivo è identificare e bloccare i bersagli per salvare le nostre cellule endoteliali cerebrali dall'interruzione. In questo protocollo, descriviamo in dettaglio le modifiche apportate da cinque a sette anni di esperienza che contribuiranno ad aumentare la riproducibilità e la robustezza dell'utilizzo di entrambe le tecnologie basate sull'impedenza.

I vantaggi e i limiti di entrambi i sistemi rispetto ad altre tecnologie sono discussi nel manoscritto. Utilizzando questa tecnologia, possiamo studiare diverse proprietà delle cellule endoteliali microvascolari cerebrali contemporaneamente e in tempo reale. Abbiamo stabilito che le cellule tumorali e le citochine possono interrompere la barriera endoteliale.

Successivamente, valuteremo se il blocco di queste molecole o recettori di adesione aiuta a proteggere la barriera endoteliale cerebrale, misurata con queste tecniche.