Identificazione di rare cellule T antigene-specifiche da polmoni di topo con tetrameri del complesso peptide:istocompatibilità maggiore

Il nostro laboratorio studia lo sviluppo delle cellule T CD4 in diversi contesti di tolleranza e immunità. In tutti i nostri progetti, siamo principalmente interessati a come l'esposizione all'antigene guida lo sviluppo di sottogruppi fenotipici di cellule T che stabiliscono una memoria immunitaria in grado di migliorare la tolleranza a se stessa o l'immunità contro i patogeni. Recentemente ci siamo concentrati sullo sviluppo di sottogruppi di cellule T regolatorie e di memoria che risiedono nel tessuto polmonare.

Queste cellule T residenti nei tessuti svolgono un ruolo importante nel rafforzare la tolleranza agli autoantigeni durante il danno tissutale o nel promuovere le risposte infiammatorie ai patogeni durante la reinfezione. Il nostro laboratorio è specializzato nello studio diretto di cellule T antigene-specifiche, ma anche di reagenti tetrameri MHC peptidici personalizzati. Questo ci permette di studiare queste cellule T senza l'uso di modelli transgenici TCR o altre manipolazioni sperimentali che sono note per causare artefatti sperimentali.

Sebbene possiamo facilmente identificare le cellule T antigene-specifiche con i tetrameri, queste cellule T sono spesso presenti a frequenze molto basse, in particolare quando sono in uno stato naïve o di memoria. È anche difficile isolare queste cellule T dai tessuti non linfoidi dove spesso risiedono a seguito di una risposta immunitaria. Sebbene esistano diversi protocolli consolidati per isolare le cellule T dai polmoni di topo, il protocollo che presentiamo qui è stato ottimizzato per la successiva rilevazione di cellule T antigene-specifiche a bassa frequenza mediante colorazione con tetramero.

All'interno di questo protocollo, abbiamo incluso anche due opzioni per l'associazione dei tessuti per accogliere meglio le risorse della biblioteca. Il nostro protocollo aiuterà i ricercatori ad espandere l'uso dei tetrameri alle cellule T antigene-specifiche nel tessuto polmonare. Ciò porterà a studi in vivo più potenti sullo sviluppo e la funzione delle cellule T di memoria residenti nei tessuti, che sono argomenti di intenso interesse nel campo.