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Method Article
ここでは、反射共焦点顕微鏡(RCM)とRCMと光干渉断層撮影(OCT)を組み合わせた新しい非侵襲イメージングデバイスを使用して、高品質の画像を取得するためのプロトコルについて説明します。また、臨床医が臨床アプリケーションに精通し、通常の臨床ワークフローに技術を統合して患者ケアを改善できるようにします。
皮膚がんは、世界中で最も一般的ながんの1つです。診断は、目視検査とダーモスコピー、続いて組織病理学的確認のための生検に依存しています。ダーモスコピーの感度は高いですが、特異度が低いため、生検の70%〜80%が組織病理学で良性病変と診断されます(ダーモスコピーの偽陽性)。
反射共焦点顕微鏡(RCM)および光干渉断層撮影(OCT)イメージングは、皮膚がんの診断を非侵襲的に導くことができます。RCMは、 エンフェイス 層の細胞形態を可視化します。黒色腫および色素性角化細胞性皮膚がんの診断特異性をダーモスコピーよりも2倍にし、良性病変の生検数を半減させました。RCMは米国で請求コードを取得し、現在クリニックに統合されています。
しかし、イメージングの深さが浅い(~200 μm)、色素沈着していない皮膚病変のコントラストが悪い、 顔 面層でのイメージングなどの制限により、非色素性基底細胞がん(BCC)(基底細胞層に隣接する表在性BCCとより深い浸潤性BCC)の検出に対する特異性が比較的低くなります。対照的に、OCTは細胞の分解能に欠けるが、垂直面の組織を~1mmの深さまで画像化するため、BCCの表面的なサブタイプとより深いサブタイプの両方を検出できます。したがって、両方の手法は本質的に補完的です。
「マルチモーダル」のRCM-OCT複合デバイスは、 顔 面モードと垂直モードの両方で皮膚病変を同時に画像化します。BCCの診断と管理(表在性BCCの非外科的治療と深部病変の外科的治療)に役立ちます。RCM単独よりも色素沈着していない小さなBCCを検出することで、特異性の著しい改善が得られます。RCMおよびRCM-OCTデバイスは、皮膚がんの診断と管理に大きなパラダイムシフトをもたらしています。ただし、現在、それらの使用は、学術的な三次医療センターと一部の私立診療所に限定されています。このホワイトペーパーでは、臨床医がこれらのデバイスとそのアプリケーションに精通し、日常的な臨床ワークフローへのトランスレーショナルバリアに対処します。
伝統的に、皮膚がんの診断は、病変の目視検査とそれに続く皮膚鏡と呼ばれる拡大レンズを使用して疑わしい病変を詳しく調べることに依存しています。皮膚鏡は、皮膚がんを診断するための目視検査よりも感度と特異性を高める表面下の情報を提供します1,2。しかし、ダーモスコピーは細胞の詳細を欠いており、組織病理学的確認のための生検につながることがよくあります。ダーモスコピー3の特異性が低く変動する(67%から97%)ため、偽陽性と生検が発生し、病理に良性の病変を示すことが判明します。生検は、出血や痛みを引き起こす侵襲的な処置であるだけでなく4、瘢痕化による顔などの美容的に敏感な領域でも非常に望ましくありません。
既存の制限を克服することによって患者ケアを改善するために、多くの非侵襲的なin vivoイメージングデバイスが検討されています5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18.RCMおよびOCTデバイスは、皮膚病変、特に皮膚がんの診断に使用される2つの主要な光学的非侵襲的デバイスです。RCMは、米国でCurrent Procedural Terminology(CPT)請求コードを取得しており、学術三次医療センターや一部の私立診療所でますます使用されています7、8、19。RCMは、組織学的(細胞)に近い解像度で病変を画像化します。しかし、画像は顔面(一度に1層の皮膚の可視化)にあり、画像の深さは~200μmに制限されており、表在性(乳頭状)真皮にのみ到達するのに十分です。RCMイメージングは、皮膚のさまざまな構造からの反射率コントラストに依存しています。メラニンは最高のコントラストを与え、色素性病変を明るく診断しやすくします。したがって、ダーモスコピーと組み合わせたRCMは、黒色腫20を含む色素性病変のダーモスコピーよりも診断(感度90%および特異度82%)を大幅に改善しました。ただし、ピンク色の病変、特にBCCのメラニンコントラストが不足しているため、RCMの特異度は低くなります(37.5%〜75.5%)21。別の一般的に使用される非侵襲的デバイスである従来のOCTデバイスは、皮膚内の深さ1 mmまでの病変を画像化し、垂直面で視覚化します(組織病理学と同様)9。ただし、OCTはセルラー解像度に欠けています。OCTは主に角化細胞病変、特にBCCの診断に使用されますが、それでも特異度は低くなります9。
したがって、これらのデバイスの既存の制限を克服するために、マルチモーダルRCM−OCTデバイスが構築されている22。このデバイスは、単一のハンドヘルドイメージングプローブ内にRCMとOCTを組み込んでおり、病変の同時登録されたエンフェイスRCM画像と垂直OCT画像を同時に取得できます。OCTは病変の建築的詳細を提供し、皮膚内のより深い(~1mmの深さまで)画像化することができます。また、ハンドヘルドRCMデバイス(~0.75mm x 0.75mm)と比較して、~2mm22の広い視野(FOV)を備えています。RCM画像は、OCTで特定された病変の細胞の詳細を提供するために使用されます。このプロトタイプはまだ商品化されておらず、診療所23、24、25で治験装置として使用されています。
皮膚がんの診断と管理の改善に成功したにもかかわらず(文献で裏付けられているように)、これらのデバイスはまだ診療所で広く使用されていません。これは主に、これらの画像を読み取ることができる専門家の不足によるものですが、ベッドサイドで診断品質の画像を効率的に(臨床時間枠内で)取得できる訓練を受けた技術者が不足していることも原因です8。この原稿の目標は、診療所でのこれらのデバイスの認識と最終的な採用を促進することです。この目標を達成するために、皮膚科医、皮膚病理学者、モース外科医に、RCMおよびRCM-OCTデバイスで取得した正常な皮膚がんおよび皮膚がんの画像を周知します。また、皮膚がんの診断のための各デバイスの有用性についても詳しく説明します。最も重要なことは、この原稿の焦点は、これらのデバイスを使用した画像取得の段階的なガイダンスを提供することであり、臨床使用のための高品質の画像を保証します。
以下に説明するすべてのプロトコルは、機関の人間の研究倫理委員会のガイドラインに従います。
1. RCMデバイスとイメージングプロトコル
注:市販されている in vivo RCMデバイスには、ワイドプローブRCM(WP-RCM)とハンドヘルドRCM(HH-RCM)の2つがあります。WP-RCMは、デジタル皮膚鏡と統合されています。これら2つのデバイスは、個別に、または組み合わせたユニットとして入手できます。以下は、最新世代(第4世代)のWP-RCMおよびHH-RCMデバイスとその臨床適応を使用した画像取得プロトコルです。
2. RCM-OCTデバイスとイメージングプロトコルの組み合わせ
注: RCM-OCT デバイスのプロトタイプは 1 つだけです。このデバイスにはハンドヘルドプローブがあり、HH-RCMデバイスと同様に、すべての体表面で使用できます。RCMスタック(RCMデバイスと同様)とOCTラスター(連続した断面画像のビデオ22)を取得します。RCM 画像と OCT 画像はどちらもグレースケールです。RCM 画像の FOV は ~200 μm x 200 μm ですが、OCT 画像の FOV は幅 2 mm x 奥行き 1 mm です。以下は、RCM-OCTデバイスを使用した画像取得プロトコルとその臨床適応症です。 図6 はRCM-OCTデバイスのイメージを示し、 図7 はRCM-OCTデバイスのソフトウェアシステムを示しています。
反射共焦点顕微鏡(RCM)
RCMでの画像解釈:
RCM画像は、病理組織学的スライドの評価を模倣する方法で解釈されます。モザイクは、スキャン倍率(2倍)での組織学切片の評価と同様に、全体的な建築の詳細を取得し、関心のある領域を特定するために最初に評価されます。これに続いて、高倍率(20倍)でスライドを評価するのと同様に、細胞の詳細を評価するためにモザ...
本稿では、 in vivo RCMおよびRCM-OCTデバイスを用いた画像取得のプロトコルについて説明しました。現在、市販のRCMデバイスには、ワイドプローブまたはアームマウントRCM(WP-RCM)デバイスとハンドヘルドRCM(HH-RCM)デバイスの2つがあります。これらのデバイスを臨床現場でいつ使用するかを理解することが重要です。がんの種類と場所は、デバイスの選択を決定する主な要因です。
ユカレン・ハリスには競合する金銭的利害関係はありません。Jain博士はEnspectra Health Inc.のコンサルタントであり、Milind Rajadhyaksha博士は、VivaScope共焦点顕微鏡を製造および販売する会社であるCalibre ID(旧Lucid Inc.)の元従業員であり、株式を所有しています。VivaScopeは、ハーバード大学医学部のマサチューセッツ総合病院にいたときにRajadhyaksha博士によって開発されたオリジナルの実験室プロトタイプの商用バージョンです。
クワミ・ケトスグボとエミリー・コーウェンがイメージングのボランティアとして参加してくれたことに特別な感謝を捧げます。この研究は、国立がん研究所/国立衛生研究所(P30-CA008748)からメモリアルスローンケタリングがんセンターに提供された助成金によって資金提供されています。
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Crystal Plus 500FG mineral oil | STE Oil Company, Inc. | A food grade, high viscous mineral oil used with our various devices during in vivo imaging. | |
RCM-OCT | Physical Science Inc. | - | A “multi-modal” combined RCM-OCT device simultaneously images skin lesions in both horizonal and vertical modes. |
Vivascope 1500 | Caliber I.D. | - | A wide-probe RCM (WP-RCM) device that attaches to the skin to campture in vivo devices. |
Vivascope 3000 | Caliber I.D. | - | A hand-held RCM (HH-RCM) device that is moved across the skin to capture in vivo images. |
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